Tek Taraflı Üreter Tıkanıklığı Murin Modeli: Fare Modellerinde Böbrekten İdrar Akışını Engellemek İçin Cerrahi Bir İşlem

Özet

Kaynak: Yanai, K. et al. Tek taraflı üreter tıkanıklığı olan fare böbreğinde mikroRNA ekspresyonlarının kantitatif gerçek zamanlı PCR değerlendirmesi. J. Vis. Uzm. (2020)

Bu videoda, tek taraflı üreter tıkanıklığı fare modeli oluşturma prosedürü gösterilmektedir. Prosedür, idrar akışını engellemek için farenin üreterlerinden birinin kesilmesini içerir.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

>1. UUO Ameliyatı

1. Aşağıdaki öğeleri hazırlayın: izofluran, mantar tabakası, tüy dökücü krem, laboratuvar mendilleri, PBS'li Petri kabı, 4-0 ipek, 4-0 naylon, 2,5 mL şırınga, pamuklu çubuklar, cımbız, cerrahi makas ve 8 haftalık C57BL / 6 erkek fareler.
2. Bir fareyi %1.5 izofluran ile uyuşturun ve %1.5'te tutun. Ardından, farenin karnına tüy dökücü krem sürün. Birkaç dakika sonra, tüy dökücü kremi PBS ile ıslatılmış bir laboratuvar mendili ile silin.
3. Farenin karnına %70 etanol enjekte edin ve fareyi mantar tabakasının üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirin.
4. Cerrahi makas ve cımbız kullanarak karın bölgesindeki deride bir kesi yapın ve kas ve periton zarını mesaneden kaburgaların sol alt kenarına kadar kesin.
5. 2,5 mL'lik şırıngayı farenin altına yerleştirin. İki pamuklu çubuk alın ve PBS ile nemlendirin. Bağırsakları cımbızla dikkatlice yana doğru çekin ve sol üreteri tanımlamak için nemli swabları uygun şekilde yerleştirin. Cımbız kullanarak sol böbreği kaldırın.
6. Sol üreteri yaklaşık 1 cm aralıklarla iki yerde bağlamak için 4-0 ipeği kullanın. Üreteri iki ligasyonun merkez noktasından kesin ve ardından periton zarını ve insizyonu kapatmak için 4-0 naylon dikişler kullanın.