$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
1. Anestezi Yapan Hayvan
- Hayvanı izofluran ile uyuşturmak için bir masa üstü anestezi sistemi kullanın. O2 tankını açın ve oksijen akış ölçeri 1 L/dk'ya ayarlayın.
- İndüksiyon odasına yetişkin bir dişi C57BL/6J fare yerleştirin. İzofluran buharlaştırıcıyı açın ve indüksiyon için% 3'e ayarlayın. Fare 2 dakika içinde anestezide olmalıdır. Önleyici analjezi için farenin indüksiyon odasından çıkarılmasının ardından deri altından buprenorfin analjezik (0.1 mg / kg) uygulayın.
not: Bu protokolde, üretra kateterizasyonu sırasında çalışmak daha kolay olduğu için dişi fareler kullanılır. Protokol erkek fareler için de işe yarar, ancak ekstra dikkatli olunması gerekir.
- Kuruluğu önlemek için hayvanın gözlerine oftalmik merhem sürün. Anestezi uygulanmış fareyi, burnu burun konisinde olacak şekilde bir ısıtma yastığına yukarı bakacak şekilde yerleştirin. İzofluranın burun konisinden geçmesine izin vermek için hava devresi anahtarını çevirin.
- Başı ve burun konisini yapışkan bantla sabitleyin. Bakım için izofluran buharlaştırıcıyı %2'ye ayarlayın.
- Uzuvları yapışkan bantla kısıtlayın. Hayvanın derin anestezide olduğundan emin olmak için ayak parmağını kıstırma testleri yapın ve ardından karın bölgesini tıraş edin.
2. İdrar tükenmesi ve mesane durulaması
- Katetere kayganlaştırıcı uygulayın (24G, uzunluk 2,11 cm, dış çap 0,045 cm) ve dış yüzeyinin tamamen kaplandığından emin olun.
- Kateteri üretra açıklığına yerleştirin ve mesaneye ulaşana kadar yavaşça itin, bu sırada idrar kateterden dışarı akmalıdır. İdrar tükenmesine yardımcı olmak için karnına hafifçe bastırın.
- Otomatik idrar çıkışını gözlemleyerek kateterin mesaneye doğru şekilde yerleştirilip yerleştirilmediğini kontrol edin. Üretra ve mesane duvarını delmekten kaçının ve gerekirse birden çok kez kayganlaştırıcı uygulayın.
- İdrarı bir pipetle atık bir behere atın.
- 80 μL fosfat tamponlu salin (PBS) kateterin dış ucuna, diğer ucu hala mesanede olacak şekilde pipetleyin. Katetere dikkatlice 1 mL'lik bir şırınga takın. PBS'yi mesaneye enjekte etmek için şırıngayı yavaşça itin. Mesanede hava kabarcıkları oluşmasını önlemek için kateterde bir miktar PBS bırakın.
- Şırıngayı çıkarın. PBS'nin mesaneden dışarı akmasını bekleyin. PBS'yi boşaltmak için karnına hafifçe bastırın.
- Kateterdeki PBS'yi bir pipetle atık behere atın.
- PBS yıkamayı (kademe 2.4 ila 2.6) iki kez daha tekrarlayın.
not: Bu yıkama adımları sırasında nazik bir şekilde çalışmak çok önemlidir. Kateterdeki kan veya sıvının otomatik olarak dışarı akışının olmaması genellikle üretranın delindiğini gösterir