Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Fare Modelinden Circumvallate Papilla (CVP) Epitelinin İzolasyonu: CVP Epitelini Fare Dilinden Ayırmak İçin Enzimatik Bir İşlem

4.1K görüntülenme

⸱

8 Temmuz 2025

Bu makalede

Özet

Kaynak: Shechtman, L. A. et al. Yetişkin Fare Tat Kök Hücrelerinden Türetilen Lingual Organoidlerin Üretimi ve Kültürü. J. Vis. Uzm. (2021)

Bu videoda, bir murin dilinden circumvallate papilla (CVP) epitelinin izolasyonunu açıklıyoruz.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

>1. CVP Epitelinin İzolasyonu

  1. Fareleri IACUC düzenlemelerine göre CO2 boğulması ile ötenazi yapın, ardından bilateral torakotomi, servikal çıkık, dekapitasyon veya kan kaybı gibi onaylanmış bir ikincil yöntem uygulayın.
  2. Yanakları kesmek ve çeneyi kırmak için büyük steril diseksiyon makası kullanın. Dili kaldırın ve dili ağız boşluğunun tabanından ayırmak için lingual frenulumu kesin. Dili kesin ve steril, buz gibi Dulbecco'nun Ca2+ ve Mg....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

figure-results-1
Şekil 1: Diseke dil ve soyulmuş CVP epiteli. (A) Dil diseke edilir ve ön dil, intermolar eminensin hemen önü kesilerek (kesikli çizgi) çıkarılır, CVP'yi (kara kutu) içeren arka dil bırakılır (B) İntermolar eminensin (siyah ok) hemen önüne bir iğne sokulur ve enzim karışımı CVP'nin (kara kutu) altına ve yan kenarlarına enjekte edilir. (C

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
1 mL TB ŞırıngaBD Şırınga309659
Dulbecco'nun Ca²⁺ ve Mg²⁺ İçeren Fosfat Tamponlu SalinGibco (Gibco)10010-023
Dulbecco'nun Ca²⁺ ve Mg²⁺ İçeren Fosfat Tamponlu SalinSigma Yaşam BilimleriD8662-500ML
Dumont #5 ForsepsGüzel Bilim Araçları11252-30
Fetal Sığır Serumu (FBS)Gibco (Gibco)26140-079
1 mL TB Şırınga BD Şırınga309659
2.0 mL Mikrosantrifüj Tüpleri ABD Bilimsel 1420-2700
Cerrahi Makas - SharpGüzel Bilim Araçları14002-14
Ekstra İnce Bonn Makası Güzel Bilim Araçları 14084-08
Büyük Rakamlı Zamanlayıcı/KronometreBalıkçı BilimselS407992
StereomikroskopZeissStemi SV6
Cohan-Vannas Yaylı MakasGüzel Bilim Araçları15000-02
Clostridium histolyticum'dan kollajenaz, tip ISigma Yaşam BilimleriC0130-1G
Dispas II (nötr proteaz, derece II)Sigma-Aldrich (Roche)4942078001
Serisi arası

Daha fazla makale keşfet

Enzimatik SindirimEpitel İzolasyonuDispase KollagenazDoku AyırımıDiseksiyon MikroskobuProtein Kaplı TüpSteril PBSHendek Epiteli