Method Article

Beyin Dilim Uyarım mikroakışkan Ağ ve Standart Perfüzyon Odası

DOI:

10.3791/302

⸱

October 1st, 2007

 ,  ,  , 
1Dept. of Bioengineering, University of Illinois, Chicago, 2Department of Anatomy and Cell Biology, University of Illinois, Chicago

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Biz farklı nörotransmitterlerin iyi kontrollü bir şekilde bir beyin dilim microscale yüzeyleri açığa çıkarmak için standart elektrofizyoloji kurulumları ile entegre edilebilir basit bir mikroakışkan cihaz imalatı göstermektedir.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Biz mevcut elektrofizyoloji kurulumları kolaylıkla entegre edilebilir bir iki düzey mikroakışkan cihazın imalat göstermiştir. Iki düzey mikroakışkan bir cihaz, iki adımlı standart litografi süreci 1 karşı negatif kullanılarak imal edilir. Ilk seviye her iki ucunda, giriş ve çıkış delikleri ile mikro içerir. Ikinci düzey, kanal uzunluğu ortasında bulunur ve kanal genişliği ile birlikte merkezli microscale yuvarlak delikler bulunur. Pasif pompalama yöntemi giriş limanından çıkış noktası 2 sıvıları pompalamak için kullanılır. Mikroakışkan cihaz off-the-raf perfüzyon odaları ile entegre ve elektrofizyoloji kurulum ile sorunsuz entegrasyon sağlar. Sıvıları yoluyla giriş çıkış portları doğru mikro port akış tanıtıldı ve aynı zamanda perfüzyon banyo içine mikro üstünde bulunan dairesel açıklıklar yoluyla kaçmak. Böylece perfüzyon odasının banyosuna yerleştirilir ve mikroakışkan cihaz üzerinde beyin dilim alt yüzeyi farklı nörotransmitterlerin maruz kalabilir. Mikroakışkan cihaz ve malzemelerin şeffaf doğası microscale kalınlığı [cam lamel ve PDMS (polidimetilsiloksan)] mikroakışkan cihaz beyin dilim mikroskopi izin yapmak için kullanılır. Mikroakışkan cihaz, beynin dilim mikroçevrelerde tanıtıldı kimyasal uyaranlara modülasyonu (hem mekansal ve zamansal) sağlar.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

SU-8 kalıp imalatı

Yüksek Lisans hazırlık

  1. SU-8 ana silikon gofret substrat iki adımlı standart negatif karşı litografi süreci kullanılarak hazırlanmıştır.
  2. Silikon gofret hizalama işaretleri bu yapıların yüksekliği gibi bir jilet kullanarak kaldırılır (gofret dış çevre boyunca yer) gerçek cihaz yapıları daha fazla.
  3. Silikon gofret izopropil alkol ile temizlenmeli ve N 2 akışı kurutulur. En yüksek cihaz yapısı daha az bant kalınlığı ile yapılmış Destek ayağı gofret dört taraftan hizalama işaretlerini değiştirin.

    Not:     destek ayağı yüksekliği en yüksek aygıt yapılardan daha ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Mevcut macroscale veya microscale beyin dilim perfüzyon odaları nörotransmitterlerin beyin dilimleri maruz sağlar uzaysal çözünürlük açısından sınırlıdır. Burada gösterilen mikroakışkan cihaz teknolojisi basit bioMEMS teknikleri kullanarak bu sınırlama üstesinden gelir. Bu basitlik mikroakışkan cihazın imalat ve mevcut elektrofizyoloji kurulumları ile entegre kolaylığı göstermiştir cihaz teknolojisi yaygın uygulama izin vereceği tahmin edilmektedir. Daha önce mümkün olmayan ilginç deneyler mevcut mikroakışkan cihazı ile yapılabilir. Farklı .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Yazarlar, farklı alanlarda biyoloji göstermiştir mikroakışkan teknoloji içeren işbirlikleri açıktır.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Finansman NIH MH-64.611 ve NARSAD Genç Araştırmacı Ödülü verilmiştir. Yazarlar ayrıca, teknik yardım için, Adam Beagley, Mark Dikopf, ve Ben Smith kabul etmek istiyorum.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
RC-26GPLAracıWarner InstrumentsW2-64-0236Düşük Profilli Büyük Banyo RC-26GLP Kayıt Odası
SHD-26GH / 10AletWarner InstrumentsW2-64-0253RC-26G için paslanmaz çelik dilim tutma, 1.0 mm diş aralığı
PDMS (polidimetilsiloksan)ReaktifDow CorningSylgard 184Silikon Elastomer Kiti
Plazma Preen-II 862TakımPlazma Sistemleri A.Ş.Mikrodalga plazma sistemi
Model P-1ToolWarner InstrumentsW2-64-0277Seri 20 Düz Platform, Model P-1
SA-NIKToolWarner InstrumentsW2-64-0291Nikon Diaphot/TE200/TE2000 için Adaptör, SA-NIK
Oksijenli, ısıtılmış ACSF (Yapay beyin-omurilik sıvısı)ReaktifTam bileşim uygulamaya göre değişecektir

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Blake, A. J., Pearce, T. M., Rao, N. S., Johnson, S. M., Williams, J. C. Multilayer PDMS microfluidic chamber for controlling brain slice microenvironment. Lab on a Chip. 7, 842-849 (2007).
  2. Walker, G. M., Beebe, D. J. A passive pumping method for microfluidic devices. Lab on a....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Microfluidic DeviceBrain Slice StimulationPassive Pumping MethodPDMS MembranePerfusion Chamber IntegrationPlasma Treatment ProcessVia Openings FormationSpatial Temporal ControlElectrophysiology SetupFluorescent Dye Visualization

Related Articles