$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
1. Laparotomi
- Hayvanları ksilazin (10 mg / kg) ve ketamin çözeltisi (80 mg / kg) ile, 1 mL şırınga ve 13 x 0.45 mm iğne 26 G 1/2 kullanarak deri altından (0.1 mL / 10g vücut ağırlığı) anestezikleştirin. Ayak parmağını sıkıştırarak yeterli anestezi derinliği olup olmadığını kontrol edin. Isıtmalı pedler kullanarak vücut ısısını kontrol edin. Tüm cerrahi malzemelerin steril olduğundan emin olun.
- Karın bölgesini %5 povidon-iyot solüsyonu ile temizleyin ve göğüs ile alt karın arasındaki tüyleri almak için bir düzeltici kullanın (yaklaşık 2cm2). Ameliyat bölgesini %70 alkol ile temizleyin.
- Cerrahi bant kullanarak hayvanı cerrahi tahta üzerinde hareketsiz hale getirin. Cildin 5 mm'sini yatay olarak, karnın üst kısmında ve ksifoid işleminin 1 cm altında kesmek için makas kullanın. Periton üzerindeki kesimi tekrarlayın. Bu, boşluğun minimum maruziyeti ile bir laparotomi ile sonuçlanacaktır.
2. Pankreasın Bulunması ve Açığa Çıkarılması
- Bir ekartör yardımıyla, karaciğeri bağırsaktan ~ 1 cm uzakta, farenin kafasına doğru çekin.
- Sodyum taurokolat (pankreas başı) enjekte edilecek pankreas bölgesini bulun. Duodenum'u karaciğere göre bulun - karaciğerin altında, sağ tarafta (fare görüntülenirken solda). Oniki parmak bağırsağı, ince bağırsağın ilk kısmıdır ve midenin son kısmına bağlıdır.
- Forseps yardımıyla karaciğeri hayvan kafasına doğru kaldırın ve ince bağırsak kısmını nazikçe çekin. Ortak safra kanalının distal kısmını daha iyi görmek için ince bağırsağın iki yan ucunu 6-0 polipropilen sütür ile sabitleyin.
3. Şiddetli Akut Pankreatit İndüksiyonu
- Retrograd infüzyonun karaciğere sızmasını önlemek için proksimal ortak safra kanalını bir mikro damar klipsi ile geçici olarak kapatın. Ana safra kanalı, onikiparmak bağırsağının karaciğer tarafında görülebilir ve onikiparmak bağırsağı ile birleştiği yer beyaz görünecektir. Organı karın boşluğundan dışarı çıkarın.
- 0,54 mm'lik bir polietilen tüpe bağlı 0,4 mm'lik bir iğne ile ortak safra kanalına erişmek için periampuller bölgeyi (ince bağırsak duvarının beyazımsı kısmı) delin.
- 8-0 ile distal koledok kanalının geçici bir tıkanıklığını yapın Sodyum taurokolat çözeltisinin duodenuma sızmasını önlemek için dikiş.
- İnfüzyon pompasını başlatın ve% 2.5 sodyum taurokolat çözeltisi (% 0.9 tuzlu su içinde seyreltilmiş) infüzyonunu 3 dakika boyunca 10 μL / 10 g vücut ağırlığı sabit hızında programlayın.
- İnfüzyondan sonra, geçici 8-0 olan mikro damar klipsini çıkarın. sütür ve safranın fizyolojik akışını yeniden oluşturmak için safra pankreas kanalından enjeksiyon iğnesi.
- Sonunda 6-0 emici olmayan monofilament polipropilen sütür ile karın bölgesine dikilmelidir. Laparotomi ile son sütür arasındaki süre en fazla 30 dakika olmalıdır (bkz. Şekil 1).
- Ameliyattan sonra hayvanları odun talaşı, su ve yiyecek ad libitum ile kaplı polietilen kutularda barındırın.
- Kontrol farelerine deney fareleriyle aynı şekilde davranın, ancak infüzyonatın sadece salin içerdiğinden emin olun. Cerrahi ve kanülasyonun neden olduğu enflamatuar önyargıyı ortadan kaldırmak için cerrahi prosedürü ve salin solüsyonunun infüzyonunu (3 dakika boyunca 10 mL / dak) bir kontrol grubunda (SHAM) gerçekleştirin.
- Ameliyat sonrası iyileşmeden sonra başlayarak her 8 saatte bir deri altından tramadol 12.5 mg / kg kullanın.
