Fare Modelinde Transvers Aort Ark Bantlaması: Sol Ventrikülde Yüksek Basıncın İndüksiyonu için Farelerde Minimal İnvaziv Bir Teknik

Özet

Kaynak: Zaw, A. M. et al. Farelerde Minimal İnvaziv Transvers Aort Daralması. J. Vis. Uzm. (2017)

Bu videoda, basınca bağlı aşırı yüklenmeye bağlı kalp yetmezliğini incelemek için farelerde minimal invaziv transvers aort daralması için deneysel bir protokol gösteriyoruz.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Operasyon Sahası Hazırlığı

1. Operasyon bölgesini %75 izopropil alkol ile dezenfekte edin. Söz konusu hayvanın kalp ve solunum hızlarındaki değişiklikleri önlemek için ısıtma yastığı sıcaklığını 37 °C'ye ayarlayın.
2. 30 dakika boyunca 121 ° C'de yerçekimi deplasmanlı sterilizatörde sterilize edilmiş cerrahi aletler kullanın.
3. 2-4 adet 30 gauge iğne alın ve bunları Şekil 1'de görüldüğü gibi bir iğne tutucu ile kıvırın, ligasyon ve doku ayırma için ve ekartör olarak kullanmak için. Ameliyatta kullanmak için şimdi kavisli iğneyi pamuklu bir aplikatöre monte edin.
4. 27 gauge bir iğneyi köreltin ve iğne tutucu ile 90º kıvırın. Ligasyon adımında 0,4 mm'lik bir ara parça yapmak için sert bir yüzeye sürtünerek ucu düzeltin.

2. Hayvan Hazırlama

1. 2 aylık, erkek, 22-25 g C57BL / 6N fareyi vücut ağırlığına göre uygun bir ketamin ve ksilazin karışımı ile uyuşturun: 100 mg / kg + 10 mg / kg i.p. Negatif kuyruk tutamlama refleksi ile anesteziyi onaylayın.
2. 2 ila 3 dakikalık tüy dökücü krem uygulamasıyla ön boyun ve göğsteki tüyleri alın. Kremayı ılık su ve pamuklu aplikatör ile çıkarın.
3. Korneanın kurumasını önlemek için hayvanın gözlerine oftalmik merhem veya jel sürün.
4. Hayvanı sırtüstü pozisyonda bir ısıtma yastığına yerleştirin ve her 15 dakikalık aralıklarla uygun belgeleri sakladığınızdan emin olarak intraoperatif izleme yapın.
5. Ameliyat sırasında hayvanı doğru pozisyonda tutmak için uzuvları ısıtma yastığına sabitlemek için cerrahi kağıt bant kullanın.
6. Cildi dönüşümlü olarak alkol ve povidon-iyot çözeltisi ile üç kez dezenfekte edin.
7. Kontaminasyonu önlemek için açıkta kalan bir çalışma alanına sahip steril bir örtü kullanın. Her fare için ve gerektiği kadar yeni steril eldivenler kullanın.

3. Ligasyon Prosedürü

1. Farenin derisini bir neşter ile boynun ve göğsün orta hiza pozisyonunda açın.
2. Künt makasla bağ dokularını nazikçe ayırarak tiroid bezini başa doğru çekin.
3. Orta hatta soluk borusu üzerindeki kas tabakasını kıvrık iğneler ile her iki yana doğru ayırın.
4. Künt makası kullanarak, sternumu ikinci kaburgaya (yaklaşık 5 mm) kesin. Kesimi bir ekartör veya kavisli forseps ile açın.
5. Kavisli iğne ile bağ dokusunu ayırarak timus loblarını birbirinden ve alt göğüs duvarından ayırın; transvers aort arkı ve iki karotis arter bu noktada açıkça görülecektir.
6. Kavisli iğneyi kemerin altına yerleştirin ve kavisli başlığı dışarı iterek diğer taraftaki damar duvarı ile bağ dokusu arasına delin.
7. Kavisli iğneyi kullanarak 6-0 monofilament sütürü aort arkının altına çekin.
8. Ara parçayı ilmeğin içine yerleştirin ve dikişi çift düğümle yerine sabitleyin. Ara parçayı yavaşça çıkarın.
9. Düğüm pozisyonu ile başarılı bir daralmayı onaylayın ve dikişin uçlarını kesin.
10. Göğüs duvarını 6/0 ipek sütür kullanarak basit bir kesintili dikiş deseni ile kapatın. Cildi 6/0 monofilament sütür ile sürekli dikiş şeklinde kapatın.

4. Ameliyat Sonrası Bakım

1. Sütür bölgesine povidon-iyot solüsyonu uygulayın ve hayvanı iyileşme ve ameliyat sonrası izleme için önceden ısıtılmış bir kafese yerleştirin.
2. Hayvan bilincini geri kazandıktan sonra ağrıyı hafifletmek ve fareye uygun yumuşak yiyecek sağlamak için buprenorfin (her 12 saatte bir 0.05-0.1 mg/kg sc) enjekte edin.
3. Tamamen iyileştikten sonra hayvanı 12 saatlik bir aydınlık/karanlık döngü odasına geri koyun.

Sonuçlar

Şekil 1: 1 inç, 30 gauge iğne ucunu bükerek istenen iğne kancalarını oluşturma işlemi. (A) Orijinal 1 inç, 30 gauge iğne ucu. (B) İğne ucunu iğne tutucu ile kavrayın ve uzunluğunun yaklaşık yarısına kadar bükün. Şeklin sağ üst köşesinde gösterilen ilmeği oluşturmak için iğne tutucuyu ve ellerinizi gerektiği gibi kullanarak iğneyi bir ilmek şeklinde ...

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
1 inç 30 gauge İğneler	BD, Franklin Lakes, NJ 07417, Amerika Birleşik Devletleri	305128	Prosedürdeki gibi kavisli ve Şekil 1
27 gauge İğne	BD, Franklin Lakes, NJ 07417, Amerika Birleşik Devletleri	301629	Ara parça için kör ve pürüzsüz hale getirin
6/0 Dafilon	B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Almanya	C0933066
6/0 Silkam	B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Almanya	C0762067
Steril eldivenler	A.R. Medicom, Inc (Asya), Hong Kong
Pamuk Aplikatörü	Mannings, Taş Ocağı Körfezi, Hong Kong		Yerel Alışveriş Merkezi
Tüy Dökücü Krem	Veet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong Kong		Yerel Alışveriş Merkezi
Lexer-Bebek Makas	FST, Britanya Kolombiyası V7H 0A6, Kanada	14078-10
Kavisli İris Forcep	FST, Britanya Kolombiyası V7H 0A6, Kanada	11065-07
Mikro Olsen-Hegar İğne Tutucu	WPI, Sarasota, FL 34240, Amerika Birleşik Devletleri	501989
Stereo Mikroskop	WPI, Sarasota, FL 34240, Amerika Birleşik Devletleri	PZMIII-BS
GenTeal Göz Jeli	Novartis, Doğu Hannover, NJ 07936, ABD		Yerel Eczane
Isıtma yastığı	Kent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, ABD	DCT-20
Cerrahi bant	Laboratuvar Hayvanları Ünitesi
Ketamin ve Ksilazin	Laboratuvar Hayvanları Ünitesi
Betadin	Laboratuvar Hayvanları Ünitesi
Buprenorfin	Laboratuvar Hayvanları Ünitesi

Serisi Serisi