$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
1. Hayvanın hazırlanması
- Ameliyattan 30 dakika önce analjezi enjekte edin (4 mg / kg Carprofen ve 0.1 mg / kg Buprenorfin).
- Enjekte edilecek Rose Bengal dozunu ayarlamak için fare vücut ağırlığını kaydedin (10 μL / g yani 100 μg / g).
- Fareyi, vücudun ve vibrissaların kendiliğinden hareketi durana kadar uyuşturmak için% 4'lük bir izofluran akış hızına sahip indüksiyon odasına yerleştirin.
- Fareyi stereotaktik çerçeveye aktarın ve burnu anestezi maskesine bakacak şekilde yüzüstü pozisyonda yerleştirin. Hayvanı sabitleyin ve izofluran konsantrasyonunu 1 dakika boyunca% 4'te tutun. Daha sonra izofluran konsantrasyonunu% 2'de azaltın ve koruyun.
- Cerrahi prosedürler boyunca sıcaklığı izlemek için rektal probu nazikçe yerleştirin. Fare vücut sıcaklığını 37 °C'de tutmak için ilgili geri besleme kontrollü ısıtma yastığını ayarlayın.
- Her iki göze dekspantenol göz merhemi uygulayın ve cildi ve çevresindeki kürkü dezenfektan bir maddeyle temizleyin.
2. Fototromboz modeli
- 2.0-2.5 cm uzunlamasına bir kesi yapın ve kafatasını ortaya çıkarmak için geri çekin. Yara komplikasyonlarını önlemek için kafatası maruziyetini tek bir kesi ile gerçekleştirin.
- Periosteumu pamukla nazikçe çıkarın ve koronal sütürleri belirleyin.
- Koruyucu gözlükleri takın, 561 nm lazeri açın ve bregmayı +3 mm sola işaretleyin.
- Lazeri kapatın, yukarıda belirtilen işaretli koordinatlara yerleştirilmiş 4 mm çapında bir deliğe sahip bir çıkartma yapıştırın.
- Fareye intraperitoneal olarak Bengal Gülü (10 μL/g) enjekte edin. Lazer ışınını kafatasından 4-5 cm uzağa yerleştirin, 561 nm lazeri açın ve kafatasını 20 dakika boyunca aydınlatın.
- Yeniden sulandırmak için kafatasına iki damla% 0.9 salin uygulayın, yarayı dikin ve anesteziden iyileşmek için hayvanı 37 ° C'de bir kurtarma odasına yerleştirin. 1 saat sonra, fareleri sıcaklık kontrollü bir odada kafeslerine geri koyun.
- Ameliyattan sonraki 3 gün boyunca her 12 saatte bir analjezi enjekte edin (4 mg / kg Carprofen ve 0.1 mg / kg Buprenorfin).