$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
1. Görüntüleme prosedürü
- Fareyi gaz anestezisi için bir indüksiyon odasına yerleştirin ve hayvan tamamen anestezi altına alınana kadar saf oksijende% 3 izofluran sağlayın. Pençe tutamına yanıt vermeyerek anestezi derinliğini doğrulayın.
- Hayvanı, sırtüstü pozisyonda tutarak UHFUS görüntüleme istasyonunun kurucu bir parçası olan ısıtılmış bir tahtaya aktarın. Vücut ısısını ölçmek için vazelin ile yağlanmış bir rektal prob kullanın. Farenin vücut sıcaklığını fizyolojik aralıkta (36 ± 1°C) tutmak için tahta sıcaklığını ayarlayın.
- Anestezi sırasında kuruluğu önlemek için farenin gözlerini veteriner merhemi ile nemlendirin. Bir farenin burun maskesi aracılığıyla narkotik gaz (saf oksijende% 1.5 izofluran) sağlayın. Doğru anestezi derinliğini korumak için izofluran yüzdesini ayarlayın.
- Ön ve arka pençeleri iletken macunla kaplayın ve bunları tahtaya gömülü EKG plakası elektrotlarına bantlayın. Fizyolojik parametrelerin (kalp atış hızı, solunum sinyali ve çekirdek vücut sıcaklığı) doğru bir şekilde alındığını ve görüntülendiğini kontrol edin.
- Bir tüy dökücü madde uygulayarak her iki kasık bölgesindeki tüyleri alın ve bunları akustik bir bağlantı ortamı ile kaplayın.
- UHFUS lineer probunu (40 MHz merkez frekansı) UHFUS görüntüleme istasyonuna gömülü özel bir 3D motora sıkıştırarak probun otomatik ve kademeli hareketine izin verin.
- Kasık lenf düğümünün (sol/sağ) kısa eksenli görüntülerini elde etmek için ultrason probunun konumunu uygun şekilde yönlendirin ve ayarlayın ve ilgilenilen bölgeyi odak bölgesine yerleştirin.
- Kasık lenf düğümünün tüm hacmini, daha önce açıklandığı gibi bir dizi 2D B modu görüntüsü olarak tarayın. Otomatik solunum ve kardiyak kapılı sine döngüleri açısından 3D veriler oluşturmak için dönüştürücünün mikrometre ölçeğinde adım boyutlarıyla doğrusal hareketi ile lenf düğümünün birden fazla seviyesinde görüntüler elde edin.
- Görüntü kaydını aşağıdaki parametrelerle ayarlayın: 2 ila 5 mm arasında değişen tarama mesafesi (lenf nodu boyutuna bağlı olarak); adım boyutu 44 μm, 46-114 tarama adımı/lenf nodu dilimi ve hayvan başına 1-3 dakikalık bir edinme süresi ile. Daha fazla çevrimdışı analiz için elde edilen görüntüleri ham formatta (DICOM) dijital olarak saklayın.