Fare Yavrusundan Beyaz ve Kahverengi Yağ Deposu Toplama: Fare Yavrusundan Beyaz Yağ Dokusu ve Kahverengi Yağ Dokusunun Toplanması İçin Cerrahi Bir İşlem

Özet

Kaynak: Galmozzi, A. et al. Yenidoğan Farelerden Primer Beyaz ve Kahverengi Preadipositlerin İzolasyonu ve Farklılaşması. J. Vis. Uzm. (2021)

Bu videoda, yeni doğmuş bir fareden deri altı beyaz yağ dokusunu ve interskapular kahverengi yağ dokusunu izole etmek için uygulanan cerrahi prosedürü gösteriyoruz.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Yağ depolarının toplanması ve sindirimi (1. gün)

1. Her yavru için iki adet 1,5 mL'lik tüp hazırlayın: biri kahverengi yağ dokusu (BAT) ve diğeri beyaz yağ dokusu (WAT) için. Her tüpe 250 μL fosfat tamponlu salin (PBS) + 200 μL 2x izolasyon tamponu (123 mM NaCl, 5 mM KCl, 1.3 mM CaCl₂, 5 mM glikoz, 100 mM 4- (2-hidroksietil) -1-piperazineetansülfonik asit (HEPES), penisilin-streptomisin ve% 4 yağ asidi içermeyen sığır serum albümini) ekleyin. Solüsyonları s....

Sonuçlar

Şekil 1: Yağ yastıkçıklarının toplanması ve işlenmesi. (A) Birincil beyaz (üst) ve kahverengi (alt) adiposit izolasyonunun şematik gösterimi. (B) Deri altı beyaz (üst) ve kahverengi (alt) yağ depoları. P0 farelerde, deri altı WAT neredeyse görünmezdir, ancak doğumdan sonraki ~ 2. günde ayırt edilebilir hale gelir. Buna karşılık, BAT, P0'da bile belirgin bir koyu renge.......

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
6 oyuklu plakalar	Corning	353046
Yağ asidi içermeyen BSA	Sigma-Aldrich	A8806
CaCl2	Sigma-Aldrich	C4901
glikoz	Sigma-Aldrich	G7021
HEPES ÜNİVERSİTESİ	Sigma-Aldrich	H3375
Kartal	Sigma-Aldrich	P9333 Serisi
NaCl (Doğal)	Sigma-Aldrich	S7653 Serisi
Kalem/Strep	Gibco (Gibco)	15140122
Cerrahi forseps	ROBOZ Cerrahi Alet A.Ş.	RS-5158
Cerrahi Makas	ROBOZ Cerrahi Alet A.Ş.	RS-5880
DPBS, kalsiyum yok, magnezyum yok	Gibco (Gibco)	14190144

Gazetesi Serisi Gazetesi Serisi Gazetesi Serisi Gazetesi Serisi Gazetesi Gazetesi Serisi Serisi