Apikal Rezeksiyon Yenidoğan Fare Modeli: Yenidoğan Fare Kalbinde Rejeneratif Potansiyeli İncelemek için Ventriküler Apeksi Ampute Etmek İçin Cerrahi Bir Prosedür

Özet

Kaynak: Li, Y. et al. Yenidoğan Fare Kardiyak Makrofajlarının Yetişkin Farelere Nakli. J. Vis. Uzm. (2021).

Bu videoda, yenidoğan fare kalbinin sol ventrikül apeksini cerrahi olarak çıkarma prosedürünü gösteriyoruz.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Yenidoğan 1 günlük Cx3cr1 ^GFP/+ farede apikal rezeksiyon operasyonu (C57BL/6 arka plan)

1. Anestezi
   1. Tüm fare yavrularını kafeslerden çıkarın ve temiz ve kuru bir kutuya koyun.
   2. Her fareyi yaklaşık 2-3 dakika buzun içine gömün. Donmayı önlemek için buz ile fare yavrusu arasında lateks veya gazlı bez gibi ince bir bariyer olduğundan emin olun.
   3. Aşağıdaki belirtileri gözlemleyerek yeterli anesteziyi belirleyin: soluk cilt, uzuv hareketi eksikliği ve pedal refleksi eksikliği.
2. TORAKOTOMI (TORAKOTOMI)
   1. Anestezinin korunmasına yardımcı olmak için bronz ameliyat platformunu gece boyunca -20 °C'de önceden soğutun.
   2. Anestezi uygulanmış fareyi buz kutusundan çıkarın ve bronz bir ameliyat platformuna koyun. Tıbbi yapışkan bant kullanarak fareyi sırtüstü pozisyonda çalıştırma platformuna sabitleyin.
   3. İşletim platformunu fare ile üzerine bir stereoskop altına yerleştirin.
   4. Fare göğsünü, betadin ve% 70 alkolle ıslatılmış bir hazırlık pedi kullanarak veya kurumsal politikaya uygun olarak dezenfekte edin.
   5. Göğüs boşluğunun dördüncü interkostal bölgesinde 1 cm'lik bir kesi ile cildi kesin ve ardından kalbe erişilene kadar mikrocerrahi makas kullanarak interkostal kasları ayırın.
   6. Alternatif olarak, kalp herhangi bir mekanik hasar olmadan göğsün dışına çıkana kadar iki forseps yardımıyla göğse ve karına bastırın.
   7. Kalbi hareketsiz hale getirmek için kaburgaları küçük kesiğin altına ve üstüne doğal bir fiksasyon olarak yerleştirin.
3. Ventriküler apeks rezeksiyonu
   1. Sol ventrikülün tepesini bulun. Stereoskop altında iridektomi makası kullanarak 1 mm çapında ventriküler apeks dokusu kesin.
   2. Sol ventrikül odasının açıkta olduğunu onaylayın ve sızmaya başlayın.
   3. Pamuklu bir bez kullanarak kalbi göğüs boşluğuna hafifçe bastırın.
   4. 8-0 kullanarak kasları, kaburgaları ve cildi dikin Prolen sütürler.
   5. İşlemden sonra fareyi iyice temizleyin.
4. Ameliyat sonrası bakım
   1. İşlemden hemen sonra vücudu ısıtmak için fareyi çalıştırma platformundan 37 °C'lik bir ısıtma battaniyesine aktarın.
   2. Aşağıdaki belirtileri gözlemleyerek farenin anabiyozunu onaylayın: spontan solunum restorasyonu, cilt renginin soluktan pembeye değişmesi ve uzuvların hareketi.
   3. Ameliyat edilen fareyi iyileştikten sonra annesine geri götürün.
   4. Gerekirse ameliyat edilen fareyi annesinin yuvalama malzemeleriyle karıştırın.
      not: 1 günlük tüm yavruların anneden bir kerede alınması ve tüm yavrular kurtarıldıktan sonra hepsini bir kerede geri vermek önemlidir.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Yenidoğan Kalp Ayrışma Kiti	Miltenyi Bio Tech, Teterow, Almanya	130-098-373