Lazer Doppler Probunun Konumlandırılması: Murin Modelinde Kan Akışı Ölçümü için Orta Serebral Arter Üzerine Prob İmplante Etme Tekniği

Özet

Kaynak: Llovera, G., et al. Farelerde İnme Modellemesi: Dış Karotis Arter Yoluyla Geçici Orta Serebral Arter Tıkanıklığı. J. Vis. Uzm. (2021).

Bu videoda, lazer Doppler probunu murin beyninin orta serebral arteri veya MCA üzerinde hareketsiz hale getirmek için kullanılan cerrahi prosedür açıklanmaktadır. Prob, arter içindeki kırmızı kan hücrelerinin hareketinden kaynaklanan Doppler kaymasını ölçerek beynin mikro damar sistemindeki kan akışını ölçmeye yardımcı olur.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Lazer Doppler'in hazırlanması ve konumlandırılması

1. 10 μL'lik bir pipet ucunun (3-5 mm uzunluk) ucunu keserek lazer Doppler probu için bir tutucu hazırlayın.
   not: Tüm aletler sıcak boncuk sterilizatörü kullanılarak sterilize edilir. Yüzeyler ayrıca ameliyat öncesi ve sonrası mikrobiyal dezenfektan sprey ile dezenfekte edilir. Ameliyattan önce, farelerin başını ve göğsünü çevreleyen alanlar bir yara dezenfeksiyon spreyi ile dezenfekte edilir.
2. Ameliyattan 30 dakika önce fareye analjezi enjekte edin (intraperitoneal olarak 4 mg/kg Carprofen ve 0,1 mg/kg Buprenorfin).
3. Fareyi, spontan vücut hareketi ve vibrissae durana kadar% 4'lük bir izofluran akış hızına sahip indüksiyon odasına yerleştirerek uyuşturun.
4. Fareyi, burnu anestezi maskesinin içinde olacak şekilde operasyon bölgesinde yüzüstü pozisyonda yerleştirin. İzofluran konsantrasyonunu bir dakika daha% 4'te tutun, ardından azaltın ve% 2'de tutun.
5. Fare vücut sıcaklığını 37 °C'de tutmak için ilgili geri besleme kontrollü ısıtma yastığını ayarlayın ve cerrahi prosedürler boyunca sıcaklığı izlemek için rektal probu nazikçe yerleştirin.
6. Her iki göze dekspantenol göz merhemi sürün.
7. Sol göz ve kulağı çevreleyen cildi ve saçı %70 etanol ile dezenfekte edin.
8. Kafatası kemiğini ortaya çıkarmak için sol kulak ile göz arasındaki kafa derisini (1 cm uzunluğunda) kesin.
9. Kafatasının altındaki MCA'yı görselleştirmek için temporal kası kesin ve emekli edin.
10. Lazer Doppler probunu/fiberini sol MCA'nın üstünde tutan ucun dış kısmını yapıştırıcı ile yapıştırıcı ile sabitleyin. Ardından, uç tutucunun etrafındaki yarayı kapatmak için cildi yapıştırın. İşlemi hızlandırmak için 2-3 damla sertleştirici yapıştırıcı uygulayın. Lazer Doppler fiberinin yapıştırılmadığından ve herhangi bir zamanda uç tutucudan kolayca çıkarılabildiğinden emin olun.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
45° rampa	H&S Kunststofftechnik		Yükseklik: 18 cm
5 mL Şırınga	Braun
İzofluran için anestezi sistemi	Dräger Kumaş
Bepanthen pomat	Bayer
C57Bl/6J fareler	Charles Nehri	000664
Etanol %70	CLN Chemikalien Laborbedorf	521005
Etanol %96	CLN Chemikalien Laborbedorf	522078
Etanol %99	CLN Chemikalien Laborbedorf	ETO-5000-99-1
Filament	Doktor	602112PK5Yeniden
İnce 45 açılı forseps	FST (Türkçe)	11251-35
İnce forseps	FST (Türkçe)	11252-23
İnce Makas	FST (Türkçe)	14094-11
tutkal	Orechseln Belediyesi	BSI-112
Sertleştirici Tutkal	Drechseln ve Mehr	BSI-151
Isıtma battaniyesi	FHC DC Sıcaklık Kontrol Cihazı
İzofluran	başrahip	B506
Lazer Doppler	Perimed	PF 5010 LDPM, Periflux Sistemi 5000
Lazer Doppler probu	Perimed	91-00123

Serisi Serisi Serisi adet