Bir Fare Modelinde Kolonoskopik Kılavuzlu Tutam Biyopsisi: Fare Kolonundan Doku Örneklerini Görselleştirmek ve Çıkarmak İçin Bir Teknik

Özet

Kaynak: Montrose, D.C., et al. Farelerde Kolonoskopik Kılavuzlu Tutam Biyopsileri Yapılması ve Sonraki Doku Değişikliklerinin Değerlendirilmesi. J. Vis. Uzm. (2021)

Bu video, farede kolonoskop kılavuzluğunda tutam biyopsisi gerçekleştirme protokolünü gösterir. Bu teknik, kolon lümenini görsel olarak analiz etmeye ve ayrıntılı çalışmalar için doku örnekleri toplamaya yardımcı olur.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Kolonoskopi ve yara indüksiyonu

1. Önce 1.9 mm'lik rijit delikli endoskopu kılıfın içine yerleştirerek endoskopun bileşenlerini önceden birleştirin (Şekil 1A-B). Verilen boruyu kullanarak hava pompasını (kolon insuflasyonu sağlamak için) çalışma kanalının yanındaki kılıfın sol tarafındaki gaz vanasına takın (Şekil 1C).
   not: Burada açıklanan lens 0° olmasına rağmen, bu amaçla 30°'lik bir lens de kullanılabilir.
2. Çalışma kanalının açık konumda olduğundan emin olun ve çalışma kanalından 3 adet Fr biyopsi forseps sokun ve kılıfın sonuna kadar ilerletin (kılıftan dışarı çıkmamasına dikkat ederken) (Şekil 1C). Monte edilmiş endoskopu üreticinin talimatlarına göre ışık kaynağına ve video görüntüleme cihazına takın.
3. Fareyi bir indüksiyon odasında oksijenli% 5 izofluran ile uyuşturun. Daha sonra fareyi ventral tarafında bir ısıtma sistemi (hipotermiyi önlemek için) içeren bir endoskopik evreleme platformuna taşıyın ve oksijenli% 2 izofluran içeren bir burun konisi kullanarak anestezi altında tutun. Anestezi altındayken kuruluğu önlemek için gözlere veteriner merhemi ekleyin. Refleksi test etmek için arka ayağı hafifçe sıkıştırarak farenin tam olarak uyuşturulduğundan emin olun.
   not: Bu teknikle farelerin herhangi bir türü veya her iki cinsiyeti de kullanılabilir; Bununla birlikte, farelerin en az 8 haftalık olması tercih edilir, bu nedenle prosedür için yeterince büyük olurlar.
   1. Anestezi altındayken kuruluğu önlemek için gözlere veteriner merhemi ekleyin.
   2. Bir refleks olup olmadığını test etmek için arka ayağı hafifçe sıkıştırarak farenin tamamen uyuşturulduğundan emin olun.
4. 3 mL'lik bir şırıngayı, oda sıcaklığında fosfat tamponlu salin (PBS) ile ekli bir sıçan gavaj iğnesi ile doldurun. İğneyi farenin anüsüne yaklaşık 1 cm sokun ve dışkı materyalini temizlemek için PBS'yi nazikçe infüze edin. Birkaç dışkı topağı, infüze edilen PBS ile birlikte fareden çıkmalıdır.
   not: Aşırı hacimde PBS'nin damlatılması, lümende köpük oluşumuna neden olabilir ve bu da lümenin görüntülenmesini engelleyebilir.
5. Monte edilmiş endoskopu farenin anüsüne 0,5 cm yerleştirin. Biyopsi forsepslerini, forsepslerin tam 'çeneleri' (menteşe dahil) kılıfın ucunun ötesine geçene kadar (video monitöründe görüldüğü gibi) rektumun lümenine ilerletin. Forsepsleri 90° çevirin, böylece çeneler doğu-batı yönünde açılır.
6. Biyopsi yapmak için forsepsleri açın ve yaklaşık 1 cm ilerletin, forsepsleri kapatın ve tek bir yumuşak hareketle forsepsleri kapalı bırakarak hızla geri çekin.
   1. Biyopsi yaparken kolonu tamamen şişirmekten kaçının. Bu nedenle, bu adımda gaz vanasının sağ tarafını açık bırakın; Bununla birlikte, forsepsin açılması üzerine, kolon bu pozisyondayken mukozaya zarar verme riski olduğu unutulmamalıdır.

Sonuçlar

Şekil 1: Biyopsi yapmak için gerekli öğeler. (A) Lens (a), kılıf (b) ve biyopsi forsepslerinin (c) görüntüsü. (B) Lensin kılıfın içine yerleştirilmesi. (C) Forsepslerin kılıfın çalışma kanalından sokulması (katı ok). Kesikli ok, hava pompasının takılması için doğru konumu gösterir.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Biyopsi forseps, 3 Fr	Karl Storz ·	61071ZJ
Coloview Kule sistemi	Karl Storz ·	Şirketle İletişime Geçin
Muayene kılıfı, 9 Fr, Kit	Karl Storz ·	61029DK
Hopkins teleskopu, 0', 1,9 mm x 10 cm	Karl Storz ·	64301AA
İzofloran	Koy	2905
Pawfly MA-60 akvaryum pompası	Amazon	Yok