Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
Çalışma, yaklaşık 40 kg ağırlığında altı adet üç aylık erkek ve dişi domuzda (German Landrace) gerçekleştirildi. Hayvanlar, deneylerden en az 7 gün önce hayvan bakım tesislerine getirildi ve hayvan refahı tavsiyelerine uygun olarak barındırıldı. Hayvanlara ad libitum yiyecek ve su sağlandı ve sağlık durumları sorumlu veteriner hekim tarafından düzenli olarak değerlendirildi. Deneylerden önce 12 saatlik bir açlık süresi korundu. Hayvanların tüm deneysel prosedürü ve ele alınması sorumlu veteriner hekim tarafından denetlendi.
1. Anestezi indüksiyonu ve anestezinin sürdürülmesi
- Anestezi indüksiyonu ve anestezinin sürdürülmesi için, hayvanları premedikate edin ve endotrakeal entübasyon gerçekleştirmek için intramüsküler bir enjeksiyon ve ardından gerekirse intravenöz enjeksiyonlar kullanarak derinlemesine sedasyon yapın. Daha sonra, ek bir opioid bolus enjeksiyonu ile tamamlanan sürekli bir opioid uygulaması ile uçucu bir anestezi ajanının bir kombinasyonunu kullanarak anesteziyi indükleyin ve sürdürün.
- Premedikasyon ve sedasyon için ketamin 20 mg · kg-1, azaperon 4 mg · kg-1 ve midazolam 0.1 mg · kg-1 kas içi enjeksiyonları yapın.
2. Prob yerleştirme
- Hayvanı doğru yanal pozisyona getirin ve omurlar arasındaki boşluğu genişletmek için hayvanın sırtını esnetin.
- Beyin omurilik basıncını ölçmek ve kontrol etmek için beyin omurilik sıvısı drenajının perkütan yerleştirilmesi için, L 4/5 veya L 5/6 seviyesini belirleyin, cildi ve deri altı boşluğunu giriş iğnesi ile delin ve inley iğneyi çıkarın.
- İğnenin üzerine tuzlu su dolu bir şırınga yerleştirin ve iğneyi sıvı dolu şırınga üzerine sabit basınçla dikkatlice yerleştirin.
- Epidural pozisyon için kanıt olarak bir direnç kaybı hissedildiğinde, inley iğneyi tekrar takın ve dura mater'i delmek ve inley iğneyi çıkarmak için iğneyi 2-3 mm daha sokun.
- Berrak likörün hızlı bir şekilde damlatılmasıyla intratekal pozisyonu doğrulayın. Drenajı 20 cm derinliğe kadar sokun, Luer-lock adaptörünü takın ve likörü dikkatli bir şekilde aspire ederek konumu doğrulayın.
- Drenajı dikişlerle dikkatlice sabitleyin ve beyin omurilik sıvısı drenaj sistemine bağlayın.