Bir Tavşan Kalvarial Defekt Modeli Oluşturma: Kemik Rejenerasyon Kapasiteleri için Kemik İkame Materyallerini Değerlendirmek için Tavşan Kafatasının Üst Kısmında Yuvarlak Defektler Oluşturmak İçin Cerrahi Bir Prosedür

Özet

Kaynak: Marger, L. ve diğerleri, Kemik İkame Malzemelerinde Kemik Büyümesi ve Neovaskülarizasyonun Değerlendirilmesi için Tavşanda Kemik Büyütmenin Calvarial Modeli. J. Vis. Uzm. (2019).

Bu videoda, ilgilenilen kemik örneği ikame materyallerinin kemik rejenerasyon kapasitelerini değerlendirmek için bir tavşan kalvarial modeli oluşturmak için cerrahi prosedürü açıklıyoruz.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Cerrahi

1. Site hazırlığı
   1. Tavşanı ameliyat masasının üzerine bir şilte pedi (yanıkları önlemek için) ile örtülmüş ısıtılmış bir pedin (39 °C) üzerine yerleştirin. Saç derisini tıraş edin.
   2. Tahriş ve kuruluğu önlemek için gözlere kayganlaştırıcı bir jel sürün. Cildi povidon iyot (% 10) ile ovalayarak bölgeyi dezenfekte edin. Daha sonra tavşanı steril bir cerrahi örtü ile örtün ve kafatası için bir erişim alanı kesin.
   3. Ameliyat bölgesini ikinci kez povidon iyot (% 10) ile dezenfekte edin. Tahriş ve kuruluğu önlemek için gözlere kayganlaştırıcı bir jel sürün.
   4. Tüm cerrahi tepsiyi yerleştirmek için dökümlü bir masa (steril örtü) hazırlayın.
2. Cerrahi alan açma
   1. Kafatasına %2 (1 mL) subkutan (SC) lidokain enjeksiyonu ile lokal olarak anestezi uygulayın.
   2. Kalvarial sagital çizgi boyunca, yörüngelerden dış oksipital çıkıntıya (~ 4 cm uzunluğunda) kadar deriden (bir neşter ile) kesin. Periosteumun kesildiğinden emin olun.
   3. İnsizyonun her iki tarafındaki periosteuumu (periosteal asansör ile) nazikçe kaldırın. Bölgeyi steril tuzlu su ile durulayın.
3. Silindir yerleşimi
   1. Kafatasındaki medyan ve koronal sütürleri bulun (Şekil 2A, B). Bu anatomik çizgilerin bir haç oluşturduğuna dikkat edin. Silindirler, haç ile tanımlanan kadranların her birine yerleştirilecek ve silindirin kenarının sütürün üzerinde olmadığından emin olunacaktır (Şekil 2C).
   2. İlk silindiri sol üst kadrana (sol ön kemik) yerleştirin ve cihazı düz bir şekilde yatırmaya çalışın. Güçlü el basıncı ile yerine sabitleyin ve direnç hissedilene kadar bir mikro vidayı vidalayın. Vida başının silindir tırnağının yüzeyi ile aynı hizada olduğundan emin olun.
   3. Silindiri kafatasına sıkıca sabitlemek için diğer sekmede de aynı işlemi tekrarlayın. Silindirin kemiğe hava geçirmez şekilde sabitlendiğinden emin olun.
   4. İşlemi sağ üst çeyrekte (sağ ön kemik), sol alt çeyrekte (sol parietal kemik) ve sağ alt çeyrekte (sağ parietal kemik) tekrarlayın.
4. Silindirlerin çevrelediği alan içinde 5 adet intramedüller deliğin kemik delinmesi (Şekil 1)
   1. Tuzlu sulama altında (0,8 mm çapında, ~ 1 mm derinliğinde) kemik üzerinde, silindirin çevrelediği alanın merkezinde yuvarlak bir frez ile intramedüller bir delik açın. Kanamanın göründüğünden emin olun.
   2. Silindirin iç kenarlarında, iki tırnaklı vidadan geçen eksen boyunca iki intramedüller delik daha açın. Dikey eksen boyunca, silindirin iç kenarlarında iki intramedüller delik daha açın. Kanamanın göründüğünden emin olun.
   3. İşlemi diğer üç silindirin içinde tekrarlayın.
5. Silindirlerin malzeme numuneleri ile doldurulması ve kapatılması (Şekil 3)
   1. İstenilen kemik ikame malzemesini üretici talimatlarına veya malzeme özelliklerine göre hazırlayın.
   2. İlk silindiri malzeme numunesi ile ağzına kadar doldurun ve kapağı takarak silindiri kapatın. İşlemi diğer 3 silindirde tekrarlayın.
6. Cerrahi alan kapatma
   1. Silindirlerin üzerindeki cildi aralıklı olarak emilemeyen bir dikişle kapatın.
   2. Yaranın üzerine püskürtülebilir bir pansuman uygulayın.

2. Ameliyat sonrası tedavi

1. Analjezi ve anesteziyi durdurun (propofol ve fentanil perfüzyon tutuklaması) otonom solunumun iyileşmesini kontrol edin.
2. Hayvan otonom solunumu geri kazandıktan sonra havalandırmayı durdurun. Tamamen uyanmadan önce hayvanı saf oksijen altında tutun.
3. Buprenorfin hidroklorür SC (0.02 mg / kg, 0.03 mg / mL, 0.67 mL / kg) enjekte edin ve enjeksiyonu cerrahi sonrası analjezi olarak 3 gün boyunca her 6 saatte bir tekrarlayın.
4. Hayvanı su ile normal yuvasına aktarın ve beslemeyi tamamlayın.

Sonuçlar

Şekil 1: PEEK silindirlerinin teknik özellikleri. Vidalama için yanal dengeleme tırnaklarına iki delik (0,8 mm çapında) açılmıştır. Kafatası üzerinde açılacak 5 adet intramedüller deliğin (0.8 mm çapında) silindirin sınırladığı alan içindeki konumları kırmızı daireler kullanılarak işaretlenir.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Uyuşturucu
Fentanil	Bischel		Analjezi için
Ketalar 50mg / ml	Pfizer		Anestezi için ketamin
Lidohex Belediyesi	Bichsel Belediyesi		Gözler için kayganlaştırıcı jel
Karşı site	Smith ve Yeğeni	66004978	Püskürtülebilir pansuman
Povidon iyot% 10, Betadine	Mundipharma (İlaç		anti-enfektif ajan
Propofol %2	Braun	3538710	Anestezi için
Rapidocain% 2	Sintetica (Sintetica)		Lokal anestezi
Rompun %2	Bayer		Anestezi için ksilazin
Sevofluran% 5	Kısaltma		Anestezi için
ekipman
Fresenius Flakon pilotu C	Imexmed Belediyesi		İnfüzyon pompası
Isıtmalı ped	Harvard Aygıtı
Emiş baskın 50	Medela Dili
Emme borusu Optimus	Tıbbi	80342.2
Cerrahi motor	Schick diş	Qube (Türkçe)	İntramedüller deliklerin delinmesi
Havalandırma	Maquet Servo1
malzeme
Silindirler ve kapaklar	Butyplast	Özel -leştirilmiş	Kompozisyon: PEEK (poli eter eter keton)
Manuel kendinden tutucu şaft	KüreselD	ACT1K
Kendinden tutucu şaft için mobil tutamak	KüreselD	Mtm
Matkap uçlu vidalar	KüreselD	VA1.2KL4	Titanyum grade5, ISO 5832-3'ten oluşan çapraz tahrikli vidalar
Cerrahi tepsi
Endotrakeal tüp Shiley çapı 2,5mm	Covid (Türkçe)	86233	Entübasyon için
Endotrakeal tüp Shiley çapı 4,9mm	Covid (Türkçe)	107-35G	Entübasyon için
Ethicon prolene 4-0	Ehticon Belediyesi	8581H	Emilemeyen sütür
Forseps	Marcel Blanc'ın fotoğrafı	BD027R	145 Milimetre
Entübasyon kateteri	Tıbbi aşçı		Entübasyon kılavuzu
Yuvarlak cerrahi frezler	Patterson	78000	0,8 mm çapında, intramedüller deliklerin delinmesi
neşter	Kuğu-Morton		10 ve 15
makas	Marcel Blanc'ın fotoğrafı	657	180 Milimetre
Şırıngalar Omnifix	Braun	4616057V	5ml, 10ml ve 50ml
Venflon G22	Braun	42690985-01	Kulak iv hattı için Vasofix güvenliği