$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
1. Kemik Enfeksiyonu Modellerinin Hazırlanması
- 3 aylık erkek Yeni Zelanda beyaz tavşanlarını ayrı kafeslerde, hava kontrollü koşullar (20 ± 1 °C) ve 12 saat / 12 saat aydınlık-koyu aydınlatma döngüleri altında tutun. Günlük rutin diyet ve musluk suyu sunun.
- Ameliyat sırasında tavşanın 3 kg'dan daha ağır olduğundan emin olun.
- Tavşanları pentobarbital sodyum (100 g vücut ağırlığı başına 3 mg) ile intraperitoneal enjeksiyonla anestezi altına alın. Tavşanların bir pençe tutamına cevap vermemesi nedeniyle tamamen uyuşturulduğundan emin olun. Operasyon prosedürü sırasında tavşanları ameliyat masasına sabitleyin.
NOT: Modelleme prosedürü süresinin 1 saatten az olduğundan emin olun.
- Proksimal tibia bölgesini tüylerin büyüme yönünün tersine elektrikli bir tıraş makinesi kullanarak tıraş edin. Bir povidon-iyot çözeltisi uygulayarak cildi dezenfekte edin.
- S. aureus (tibianın üst ucuna olan mesafe 1,5 cm'dir) ile tibianın üst ucunu ve enjeksiyon için delme deliği konumunu kalem ve cetvel ile işaretleyin. Delme deliği konumlarının yatay olarak tibial platonun ortasında olduğundan emin olun (Şekil 1A).
- 11 numaralı neşter kullanarak tibia derisini kesin ve periosteumda 1 cm'lik bir kesi yapın (Şekil 1B, C). Elektrikli bir kemik matkap ünitesi kullanarak kaval kemiğine 2 mm çapında bir delik açın (Şekil 1D).
- Tibial platodaki 2 mm çapındaki deliklere 2 mm çapında ve 2 mm yüksekliğinde bir kemik balmumu silindiri ile bastırın (Şekil 1E). Yedek kemik mumunu tibial platonun yatay düzlemi boyunca çıkarın (Şekil 1F). 2 mm'lik deliğin kemik mumu ile dolu olduğunu kontrol edin (Şekil 1G).
not: Kan taşması olan veya olmayan deliği kontrol ederek deliklerin kemik mumu ile dolu olduğundan emin olun.
- Hayvanın dikişleri çiğnemesini önlemek için periosteuumu ve cildi emilebilir cerrahi sütür ile dikey bir yatak sütüründe dikin (Şekil 1H).
- 1 mL asepsi enjektörü ile 1 x 108 CFU/mL S. aureus solüsyonu (100 g vücut ağırlığı başına 30 μL) enjekte edin (Şekil 1I). İğnelerin kemik mumuna nüfuz ettiğinden emin olun ve S. aureus solüsyonunu yavaşça kemik iliğine enjekte edin.
- Modellemeden sonra ısı kaybını önlemek için hayvanı sıcak ve temiz koşullarda tutun. Solunum hızını ve kalp atış hızını izleyin. Uyandıktan sonra, tavşanları yiyecek ve suya ücretsiz erişimi olan ayrı kafeslerde barındırın.
