Safranin-O boyama: kıkırdağın yapısal bütünlüğünü ve hücreselliğini görselleştirmek için bir yöntem

Özet

Kaynak: Zhao, Y., et al. Osteoartritte Progranulinin Koruyucu Rolünü Araştırmak İçin Farelerde Cerrahi Olarak İndüklenen Bir Modelin Kurulması. J. Vis. Uzm. (2014).

Bu videoda, safranin-portakal kullanarak kıkırdak için bir boyama prosedürü gösteriyoruz. Bu yöntem, kıkırdağın görüntülenmesine ve herhangi bir hasarın tespit edilmesine yardımcı olur.

Protokol

1. Safranin O boyama

1. Destabilize medial menisküs ile ötenazi yapılmış bir fare modelinin lateral kondilinin merkezinden medial kondilinin merkezine kadar bir bölgeyi kapsayan seri sagital kesitler içeren cam slaytlarla başlayın.
2. Daha sonra, slaytları oksilende deparafinize edin ve bunları damıtılmış suya bir etanol gradyanında nemlendirin. Daha sonra slaytlar, Weigert'in Demir Hematoksilen Çözeltisi, %0.05 Hızlı Yeşil (FCF) Çözeltisi, %1 Asetik Asit Çözeltisi ve %0.1 Safranin O Çözeltisi ile boyanır. Slaytları reçineli ortam kullanarak monte edin.
3. Kıkırdakta proteoglikan (kırmızı renk) kaybına ve kıkırdak yapısındaki tahribat yüzdesine dayalı olarak Safranin O-boyalı slaytları puanlayın, histolojik skor için istatistiksel analiz yapın.