Yöntem makalesi

Periferik Sinir Bölümlerinin Toluidin Mavisi Boyaması: Periferik Sinir Yapısının Görüntülenmesi İçin Miyelinli Sinir Liflerini Boyama Tekniği

8 Temmuz 2025

Bu makalede

Özet

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Ghnenis, A. B. ve ark., Periferik Sinir Morfolojisinin Değerlendirilmesi için Reçineye Gömülü Bölümlerin Toluidin Mavisi Boyanması.J. Vis. Uzm.(2018)

Bu video, toluidin mavisi kullanılarak reçine gömülü, osmiyum tetroksit ile tedavi edilmiş sıçan periferik sinir bölümlerinin boyama tekniğini göstermektedir. Lekeli sinir bölümleri, periferik sinirlerin ince yapılarını görselleştirmeye yardımcı olur.

Protokol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Toluidin Mavisi Boyama

  1. 2 g sodyum boratı 100 mL deiyonize su içinde çözerek% 1 toluidin mavisi çözeltisi hazırlayın, ardından 1 g toluidin mavisi ekleyin ve çözünene kadar karıştırın. Solüsyonu filtre kağıdı (gözenek boyutu: 11 μm) kullanarak filtreleyin ve solüsyonu opak bir şişede oda sıcaklığında iki haftaya kadar saklayın.
  2. Plastik bir pipet veya mikro pipetleyici kullanarak, sinir bölümlerinin üstüne bir damla toluidin mavisi solüsyonu ekleyin ve 20-30 saniye bekletin.
  3. Slaytları deiyonize su kavanozuna hafifçe daldırarak tüm toluidin mavisi solüsyonunu durulayın ve bölümler temizlenene kadar 3-4 kez tekrarlayın. Slaytları 60 °C'de en az 15 dakika veya gece boyunca oda sıcaklığında kurutun ve ardından bölümleri normal montaj ortamı kullanarak bir lamel ile örtün. Monte edilen kızakları hemen inceleyin veya oda sıcaklığında saklayın.
  4. Işık mikroskobu altında inceleyin. G oranlarını hesaplamak için kullanılan ayrıntılı görüntüler için 100X yağa daldırma lensi önerilir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Toluidin Mavisi OSigma-AldrichT3260 Serisi
Sodyum Tetraborat DekahidratAcros Organik205950010
Mikroskop Kapak CamıBalıkçı Bilimsel12545102
VWR Mikro Slaytlar, Superfrost PlusVWR (VWR)48311-703
100 Watt FırınKırlangıç 6350115
Whatman Filtre KağıdıSigma-AldrichWHA10010155
Olympus floresan mikroskobuÇift CCD Renkli ve Tek Renkli Kamera, DP80
3 mL plastik pipetSigma-AldrichZ331740
Gazetesi Gazetesi Gazetesi

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Re ineye G m l KesiplerOsmiyum Tetroksit lemiI k MikroskobuSchwann H cresi ekirdekleriMiyelin K l f G r nt lemeAkson Morfolojisi AnaliziG Oran Hesaplamas

İlgili makaleler