Papanicolaou boyama: tubal hücrelerin sitolojik özelliklerini görselleştirmek için bir teknik

Özet

Kaynak: Chen, H. et al. Over Kanseri Erken Teşhisi İçin Umut Verici Bir Araç Olarak Fallop Tüpünün Tubal Sitolojisi. J. Vis. Uzm. (2017).

Bu videoda, tubal sitolojiyi incelemek için Papanicolaou boyamanın değiştirilmiş bir protokolünü gösteriyoruz. Bu teknik, malign ve malign olmayan fallop tüpü epitel hücrelerinin sitolojik özelliklerini görselleştirmek için kullanılabilir.

Protokol

1. Değiştirilmiş Papanicolaou Boyama Protokolü

1. Tablo 1.
   'da gösterildiği gibi otomatikleştirilmiş jinli olmayan boyama prosedürünü çalıştırarak doku bulaşmış slaytları boyayın NOT: Boyama yöntemi, jinekolojik olmayan örnekler için rutin olarak kullandığımız Papanicolaou boyama tekniğinin bir modifikasyonunu temsil eder. Bazı slaytları boyamak için otomatik bir doku işlemcisi kullanıyoruz. Bu çalışmada Gyn boyama prosedürü yerine Non-Gyn boyama prosedürünü seçtik. Kullanılan Eosin, jinekolojik örnekler (Pap smear örneği) için kullanılan EA-50 yerine EA-65'tir. Ek olarak, esas olarak skuamöz hücre boyama için olan Gyn boyama prosedüründeki OG-6, bu çalışmada skuamöz hücre görülmesi beklenmediğinden boyama prosedürüne dahil edilmemiştir. EA65 (Eosin Azure), 3 boyadan oluşan bir karşı leke çözeltisidir: Eosin Y, Hızlı yeşil FCF ve Bismarck kahverengi Y. Prosedür Tablo 1'de gösterilmiştir.
2. Aşağıdaki gibi manuel bir hızlı Pap boyama prosedürü gerçekleştirin:
   1. Doku bulaşmış slaytı 10 kez% 95 etanole batırın ve her daldırma yaklaşık 1 s sürer.
   2. Slaytı H₂O'ya 10 kez daldırın ve her daldırma yaklaşık 1 s sürer.
   3. Hematoksilen içindeki slaytı 10 - 60 saniye boyunca ortaya çıkarın.
   4. Slaytı H₂O'ya 10 kez daldırın ve her daldırma yaklaşık 1 s sürer.
   5. Slaytı 10 kez %95 etanole batırın, her daldırma yaklaşık 1 saniye sürer.
   6. Slaytı EA65'te 1 - 3 dakika boyunca ortaya çıkarın.
   7. Slaytı H₂O'ya 10 kez daldırın ve her daldırma yaklaşık 1 s sürer.
   8. Slaytı 10 kez %95 etanole batırın ve her daldırma yaklaşık 1 saniye sürer.
   9. Slayt netleşene kadar slaytı ksilene batırın.
      NOT: Bu, modifiye edilmiş bir Papanicolaou boyama prosedürüdür. Bu yöntem, yerinde ince iğne aspirasyonu ve STAT örnekleri gibi sınırlı zaman veya mekana sahip vakalar için daha hızlı bir boyama yöntemi olarak kullanılır. Bu prosedür, otomatikleştirilmiş Non-Gyn boyama prosedürü ile karşılaştırılabilir kalitede boyama sağlar. Prosedür Tablo 2'de gösterilmiştir.

Tablo 1: Jinli Olmayan Leke Adımları.

Serisi

% 95 Etanol	5 dk
H2O	10 saniye
Hematoksilen	15 sn - 3 dk
Damıtılmış H2O	5 dk
% 95 Etanol	30 saniye
EA65	2 - 5 dk
% 95 Etanol	30 saniye
% 95 Etanol	30 saniye
%100 Etanol	30 saniye
%100 Etanol	30 saniye
Ksilen	30 saniye
Ksilen	5 dk

Tablo 2: Manuel Hızlı Pap Leke Adımları.

Serisi

% 95 Etanol	10 daldırma
H2O	10 daldırma
Hematoksilen	10 sn-1 dk
Damıtılmış H2O	10 daldırma
% 95 Etanol	10 daldırma
EA65	1 - 3 dk
% 95 Etanol	10 daldırma
%100 Etanol	10 daldırma
Ksilen	Berraklaşana kadar daldırın

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Papanicolaou Lekesi, EA 65	Sigma Aldrich	HT40432
% 95 Etanol	Sigma Aldrich	652261
%100 Etanol	Sigma Aldrich	493538
Ksilen	Sigma Aldrich	214736
Hematoksilen	Sigma Aldrich	H9627

Serisi