Method Article

Taramalı Elektron Mikroskobu Kullanılarak Membran Fırfır Oluşumunun Miktar Tayini

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Ahn, W. et al., Taramalı Elektron Mikroskobu Kullanarak Membran Fırfır Oluşumunu Görselleştirme.J. Vis. Uzm. (2021)

Bu video, taramalı elektron mikroskobu, SEM kullanarak zar fırfırları gösteren bir makrofaj hücresinin numune hazırlama, fiksasyon ve görüntülemesini göstermektedir. Membran morfolojisi ve organizasyonu hakkında ayrıntılı bilgi, hücrelerin fizyolojik durumunu anlamak için çok önemlidir.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Hücre hattı ve hücre kültürü

  1. 37 ° C ve% 5 CO 2'de nemlendirilmiş bir inkübatörde% 10 (hacim / hacim) ısıyla inaktive edilmiş Fetal Sığır Serumu (FBS), 100 IU / mL penisilin ve 100 μg / mL streptomisin ile desteklenmiş Dulbecco'nun Modifiye Kartal Ortamında (DMEM) RAW 264.7 makrofajları büyütün. Büyüme ortamını her gün değiştirin.
  2. Hücreler% 80 birleştiğinde, plakayı steril PBS kullanarak iki kez yıkayın.
  3. 1.000 μL% 0.5 tripsin-EDTA ekleyerek hücreleri ayırın ve hücre kültürü plakasını 37 ° C'de nemlendirilmiş bir inkübatörde 3-5 dakika inkübe edin.
  4. Hücre ayrışmasını doğrulamak için plakayı ışık mik....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
% 0.5 Tripsin-EDTAGibco (Gibco)15400-054
% 2 GluteraldehitElektron Mikroskobu Bilimleri16320
% 4 ParaformaldehitSanta Cruz Biyoteknoloji281692
5-(N-etil-N-izopropil)-AmilorSigma Yaşam BilimleriA3085
Karbon Yapışkan TabletlerElektron Mikroskobu Bilimleri77825-09
Dimetil SülfoksitCorning25-950-CQC
Dulbecco'nun Modifiye Edilmiş Kartal OrtamıCytiva Yaşam BilimleriSH30022.01
Falcon 24 kuyulu Şeffaf Düz Tabanlı TC ile muamele edilmiş Çok Kuyulu Hücre Kültürü Plakasıdoğan353047
Fetal Sığır Serumuİkizler Burcu Biyografisi900-108
HERAcell 150i CO2 inkübatörüThermo Fisher Bilimsel51026282
Hummer Model 6.2 Püskürtmeli KaplayıcıAnatech Türkiye58565
JSM-IT500HR taramalı elektron mikroskobu
Mikroskop Kapak CamıThermo Fisher Bilimsel12-545-82
Kalem StrepGibco (Gibco)15140-122
Phorbol 12-miristat 13-asetatKırlangıç Sigma524400
RAW 264.7 makrofajATCC (Uzay Servisi)ATCC TIB-71
Rekombinant İnsan M-CSFPeprotech teknolojisi300-25
Samdri-790 Kritik Nokta KurutucuTousimis Araştırma Şirketi8778B
SEM Alüminyum Numune BağlantılarıElektron Mikroskobu Bilimleri75220
Sodyum KakodilatElektron Mikroskobu Bilimleri12300
Tripan Mavisi ÇözeltisiThermo Fisher Bilimsel15250061
Serisi arası Serisi arası

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Membrane Ruffle FormationScanning Electron MicroscopyMacrophage Cell CultureSample PreparationFixation ProtocolCritical Point DryingSputter CoatingElectron Beam ImagingSecondary Electron DetectionCell Surface Morphology

Related Articles