Yöntem makalesi

Güçlü TCR Sinyallerine Timosit Yanıtını Modüle Eden Kinaz İnhibitörlerinin Belirlenmesi

8 Temmuz 2025

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Chen, E. W., et al. Kimyasal İnhibitör Kütüphanelerinin Taraması Yoluyla T Hücresi Reseptör Sinyalizasyonunun Mediatörlerinin Tanımlanması. J. Vis. Uzm. (2019).

Bu videoda, kendiliğinden reaktif CD4+CD8+ çift pozitif immatür timositlerin apoptozunu modüle eden küçük moleküllü kinaz inhibitörlerini tanımlamak için bir yöntem açıklıyoruz. Apoptoz, çift pozitif timositlerde, anti-CD3- ve anti-CD28 kaplı manyetik boncuklarla aktive edilerek indüklenir; Bunu, inhibitörlerin apoptotik belirteç ekspresyonunu modüle edip etmediğini tespit etmek için küçük moleküllü bir inhibitör tedavisi ve akış sitometrisi analizi takip eder.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Kinaz İnhibitörü Kütüphane Taraması (Santrifüjden Bağımsız Test)

  1. Timositlerin kinaz inhibitörleri ile tedavisi
    1. Bir timosit süspansiyonu hazırlayın.
    2. 25 x 106 hücre / mL'lik bir timosit süspansiyonu elde etmek için timositleri tam RPMI'de seyreltin.
    3. Çok kanallı bir pipet kullanarak küçük hacimli bir plakanın her bir oyuğuna 40 μL timosit ekleyin. Plakayı buzun üzerine yerleştirin.
    4. İnhibitörleri, stok plakasından, DMSO'dan ve deksametazondan gelen inhibitörleri, dört kısım tam RPMI'ye bir kısım inhibitör / DMSO / deksametazon (5 seyreltme faktörü) oranında tam RPMI'de seyreltin.
      not: Bu küçük hacimli plakada kullanılan hacimler geleneksel yönteme göre 5 kat daha küçük olduğundan, inhibitörler ve kontrol reaktifleri, plakadaki timositlere eklenmeden önce beş kat seyreltilir.
    5. Adım 1.1.4'te hazırlanan inhibitör plakasının karşılık gelen kuyucuklarından 96 oyuklu plakaya 0.5 μL kinaz inhibitörü ekleyin.
    6. Sekiz kuyu işlenmemiş kontrol hazırlayın. Adım 1.1.4'te hazırlanan DMSO'nun 0,5 μL'sini ekleyerek dört kuyulu araç ile tedavi edilen kontrol hazırlayın. Adım 1.1.4'te hazırlanan seyreltilmiş deksametazonu kullanarak 5 μM deksametazon ile muamele edilmiş kontrollerden oluşan dört kuyu hazırlayın (Şekil 1).

2. Anti-CD3/CD28 boncukları kullanılarak timositlerin uyarılması

  1. Boncukların eşit şekilde yeniden askıya alındığından emin olun. 1 mL boncuk alın ve 2 mL PBS ile yıkayın. Manyetik bir stand kullanarak boncukları ayırın ve çözeltiyi aspire edin. Boncukları 1 mL tam RPMI.
    içinde yeniden süspanse edin not: Boncukların hücrelere oranı 1'e 2,5'tir. Uyarılacak kuyucuk sayısına ve kullanılan timosit sayısına bağlı olarak boncuk miktarını ayarlayın.
  2. İnhibitör ile muamele edilen her numuneye, DMSO ile muamele edilen dört numuneye ve muamele edilmemiş sekiz numuneden dördüne 10 μL boncuk süspansiyonu ekleyin. Kalan dört işlenmemiş kuyucuğa 10 μL tam RPMI ekleyin. Şekil 1, genel plaka düzenini göstermektedir.
    not: Kuyuların nihai hacmi, kuyuların maksimum kapasitesi dahilinde olan 50 μL'dir. Çapraz kuyu dökülmesini önlemek için dikkatli olmak ve plakaları dik tutmak önemlidir.
  3. Karıştırmak için, bir mikroplaka orbital çalkalayıcı kullanarak plakayı çalkalayın. Alternatif olarak, çok kanallı bir pipet kullanarak kuyucukların içeriğini karıştırın.
  4. Timositleri 37 °C,% 5 CO2 inkübatörde 17 - 20 saat (veya gece boyunca) buharlaşma önleyici bir kapakla inkübe edin.

3. Plaka yıkayıcının kurulumu

>NOT: Plaka yıkayıcıyı kurma talimatları üretici tarafından sağlanır. Adımlar aşağıda kısaca belirtilmiştir. Her hazırlama adımı için yaklaşık 150 mL çözelti gereklidir.

  1. Yıkama sistemini %1 Tween 20 içeren %70 etanol ile astarlayın.
  2. Yıkama sistemini %1 Tween 20 içeren deiyonize su ile astarlayın.
  3. Yıkama sistemini FACS yıkama tamponu ile astarlayın.

4. Yüzey antijenlerinin boyanması

  1. Anti-TCRβ, anti-CD4, anti-CD8 ve anti-CD69 antikorları içeren bir antikor boyama karışımı hazırlayın. Antikorları FACS yıkama tamponunda 1:100 (h/v) oranında seyreltin.
  2. Otomatik laminer akışlı yıkama sistemini kullanarak, yıkama başına 55 μL FACS yıkama tamponu kullanarak plakayı 9x yıkayın.
    not: Yıkamaların sonunda, her bir kuyucukta 25 μL artık hacim olacaktır.
  3. Hücreleri, adım 1.4.1'de hazırlanan boyama antikor karışımının 25 μL'sinde yeniden süspanse edin.
  4. Numuneler 96 oyuklu bir plakadan aktarılırsa, hücreleri 50 μL antikor karışımında yeniden süspanse edin ve numuneleri küçük hacimli plakaya aktarın. Bu adım, Şekil 2A'da gösterildiği gibi 2 numaralı yönteme karşılık gelir.
  5. Karıştırmak için, plakayı bir mikroplaka orbital çalkalayıcı ile çalkalayın veya numuneleri çok kanallı bir pipet kullanarak karıştırın ve 30 dakika buz üzerinde inkübe edin.

5. Hücrelerin sabitlenmesi

  1. Otomatik laminer akışlı yıkama sistemini kullanarak, yıkama başına 55 μL FACS yıkama tamponu kullanarak plakayı 9x yıkayın.
  2. Kuyucuk başına 50 μL'de fiksasyon / geçirgenleştirme tamponu ekleyin (aktif kaspaz-3 apoptoz kiti ile birlikte gelir; adım 1.6.1'de belirtilen 10x perma / yıkama tamponu ve adım 1.6.2'deki anti-kaspaz-3 antikoru ile aynı).
  3. 30 dakika buz üzerinde inkübe edin.

>6. Aktif kaspaz 3 için hücre içi boyama

  1. 25 mL 10x perma/yıkama tamponunu 225 mL ultra saf su ile seyrelterek 1x perma/yıkama tamponu hazırlayın.
  2. 2 mL 1x perma/yıkama tamponuna 1 mL anti-kaspaz-3 antikoru ekleyerek hücre içi aktif kaspaz boyası hazırlayın. Antikorun perma/yıkama tamponuna oranı 1:2'dir.
  3. Yıkama sistemini 1x perma/yıkama tamponu ile astarlayın.
  4. Plakayı 9x 1x perma/yıkama tamponu ile her yıkamada 55 μL'de yıkayın.
  5. Adım 1.6.2'de hazırlanan hücre içi kaspaz boyasından 25 μL'yi tüm kuyucuklara ekleyin.
  6. Karıştırmak için, plakayı bir mikroplaka orbital çalkalayıcı ile çalkalayın veya numuneleri çok kanallı bir pipet kullanarak karıştırın ve 1 saat buz üzerinde inkübe edin.
  7. Plakayı 9x 1x perma/yıkama tamponu ile her yıkamada 55 μL'de yıkayın.
  8. Tüm kuyucuklara 25 μL FACS yıkama tamponu ekleyin.
  9. Pipetleme yoluyla yeterli karıştırma işleminden sonra numuneleri mikrotitre tüplerine aktarın.
  10. Boş kuyucuklara 50 μL daha FACS yıkama tamponu ekleyin ve adım 1.6.9'u tekrarlayın.
  11. 1.6.9 ve 1.6.10 adımlarını, numunelerin 200 μL'si mikrotitre tüplerinde toplanana kadar 2 kez tekrarlayın.
    not: Adım 1.6.10 ve 1.6.11'de açıklanan prosedürlerin amacı, hücrelerin küçük hacimli plakadan maksimum geri kazanımını sağlamaktır. Hücre sayıları önemli değilse, 1.6.10 adımından sonra, mikrotitre tüplerini FACS yıkama tamponu ile 200 μL'ye kadar doldurun.
  12. Numunelerin akış sitometrik analizini yapın ve sonuçları bir FACS analiz programı ile analiz edin. CD4+CD8+DP timosit içeren kapıda kaspaz-3 aktivasyonu ve CD69 ekspresyonu analiz edildi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Şekil 1: Timosit aktivasyon testinin plaka yerleşimi. (Yukarıya) Sütun 1 ve 12 kontroller için ayrılırken, sütun 2 ila 11 inhibitörle muamele edilen numunelerdir (bej). Negatif kontrol (uyarılmamış [NS]; gri) A1 ila D1 kuyularını işgal eder ve hücre ölümü için pozitif kontrol (deksametazon ile tedavi edilen [DEX]; mor) E1 ila H1 kuyularını kaplar. 2 ila 12 numaralı sütunlar, anti-CD3 / CD28 boncukları ile uyarılmış timositleri içerir...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
DEV/SINIRHyClone (KlonSH30027FS
FBS (FBS)HyClone (KlonSH3007103
L-GlutaminHyClone (KlonSH3003401
Sodyum piruvatHyClone (KlonSH3023901
10 kat PBS Vivantis Belediyesi PB0344 – 1L
Kinaz Tarama Kütüphanesi (96-Kuyulu)Cayman Kimya10505Kütüphanenin tam içeriği değişebilir
DMSO (Türkçe)Sigma AldrichD2650
DeksametazonSigma AldrichD4902
anti-CD3 / CD28 boncuklarıThermo Fisher Bilimsel11452D
FITC Aktif Kaspaz-3 Apoptoz KitiBD Pharmingen550480Fiksasyon/Geçirgenlik tamponu, 10X Perma/Yıkama tamponu ve anti-kaspaz 3 antikoru içerir
DA-Hücreli Yıkayıcı MERAK HT1000
96 kuyulu DA-Hücre PlakasıMERAK96-DC-CL-05
Antikor
CD3e (İngilizce) Biyo Efsane 100236
TCRbBD Biyolojik Bilimler553174
CD4 (İngilizceBD Biyolojik Bilimler740007
CD8BD Biyolojik Bilimler563786
CD69eBiyobilim25-0699-42
Inhibitör -leri
TG003Cayman KimyaKinaz Tarama Kütüphanesinden
TG003Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
PKC 412Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Doramapimod (Doramapimod)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
PaklitakselCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Erlotinib (Erlotinib Çiçeği)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Nekrostatin-5Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
NVP-BEZ235Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Ftalazinon pirazolCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AG-879Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
1-NA-PP1Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Torin 1Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Bisindolilmaleimid IICayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
BIBF 1120Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
SMI-4a (İngilizce)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Bisindolilmaleimid XI (hidroklorür)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CAY10657Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AS-703026Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Şeletrin klorürCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
TunikamisinCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
GSK 1059615Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
RuksolitinibCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Nekrostatin-1Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
SB 505124Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
MÜREKKEP128Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Kanertinib (hidroklorür)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
SB 431542Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
PD 173074Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Valproik Asit (sodyum tuzu)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
PD 0325901Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
SB 203580Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
VX-702Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Emodin DiliCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CHIR99021Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
BiyoCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Imatinib (mesilat)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Sunitinib MalatCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
GefitinibCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
PP2Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
3-MetiladeninCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Bisindolilmaleimid ICayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Bisindolilmaleimid IVCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Bisindolilmaleimid VCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
MGK 663284Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
D 4476Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
NU 7026Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
H-9 (hidroklorür)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
İndirubin-3'-monoksitCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
KN-62Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
KN-93Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CGP 57380Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
İzo-OlomoucineCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
(S)-Glycyl-H-1152 (hidroklorür)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Bisindolilmaleimid VIII (asetat)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
ST638Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
SU 6656Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
LY364947Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
SB 203580 (hidroklorür)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CAY10621Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
YM-201636Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
ZM 447439Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AS-041164Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
NVP-AEW541 (hidroklorür)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
PP242Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
ABT-869Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CAY10622Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
17β-hidroksi WortmanninCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CAY10626Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
SU 6668 SerisiCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CAY10572Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
N,N-DimetilsfingosinCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
LY294002Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
U-0126Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
StaurosporinCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
KN-92 (hidroklorür)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AS-605240 (potasyum tuzu)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
O-1918Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Y-27632 (hidroklorür)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
LeelaminCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
PD 98059Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
PD 169316Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
TGX-221Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
(S)-H-1152 (hidroklorür)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AS-605240Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
D-eritro-sfingosin C-18Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
OSU03012Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
JNJ-10198409Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Leelamin (hidroklorür)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Araşidonik Asit LeelamidCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Laurik Asit LeelamidCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AS-252424Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CAY10505Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
PI-103Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
PIK-75 (hidroklorür)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Sfingozin Kinaz İnhibitörü 2Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Piceatannol (Pikeatannol)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
SC-1Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
( R ) -RoskovitinCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
BAY-43-9006Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CAY10561Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AS-604850Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
PI3-Kinaz α İnhibitörü 2Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
ML-9 (İngilizceCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
TrisiribinCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Erbstatin AnalogCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Kenpaullone BelediyesiCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Olomoucine (Olomoucine)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AG-494Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AG-825Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AG-1478Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
SB 216763Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
SB 415286Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AG-17Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
H-8 (hidroklorür)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
LFM-A13Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
SC-514Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Apigenin BelediyesiCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AG-18Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CAY10554Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
DRB (Demokratik SinirCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
RG-13022Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
RG-14620Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AG-490Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AG-82Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AG-99Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AG-213Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AG-183Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Lavendustin CCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
ZM 336372Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
5-İyodotubercidinCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
SB 202190Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CAY10571Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
NilotinibCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
SP 600125Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
L-treo-Sfingosin C-18Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
H-89Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
HA-1077 (hidroklorür)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AG-370Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
WortmanninCayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
AG-1296Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
KT 5823Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Janex 1Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CAY10574Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CAY10575Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CAY10576Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
NH125Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
TWS119Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
MGK 210902Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CAY10577Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CAY10578Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
PD 184161Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
CCT018159Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
Myricetin (Miricetin)Cayman Kimya-Kinaz Tarama Kütüphanesinden
) ) ) ) · Serisi · Serisi Serisi ) Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi ) Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi T Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Timosit ApoptozuTCR SinyalizasyonuAk SitometrisiKaspaz 3 AktivasyonuCD69 EkspresyonuManyetik BoncuklarAnti CD3 Anti CD28H cre Stim lasyonuFACS Analizi

İlgili makaleler