Adjuvan İndüklenen Artrit Fare Modeli Oluşturmak İçin Bir Teknik

Özet

Kaynak: Lu, Q., et al. Farelerde Nötrofillerin Migrasyonunu ve İnfiltrasyonunu Tespit Etme. J. Vis. Exp. (2020).

Bu video, bir fare modelinde adjuvan kaynaklı artrit oluşturmak için bir yöntem göstermektedir. Komplet Freund adjuvanı (CFA) fare ayak bileği eklemine ve periartiküler bölgelere enjekte edilir. CFA, bağışıklık sistemini aktive ederek nötrofil infiltrasyonuna ve abartılı iltihaplanmaya yol açar.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Adjuvan kaynaklı artrit (AA) fare modelinin indüksiyonu

1. En az 5 s vorteks yaparak tam Freund adjuvanını (CFA) askıya alın, ardından bir insülin enjektörüne 100 μL süspansiyon çekin.
   not: Steriliteyi sağlamak için deneylerde tamamen yeni bir CFA kullanmanızı öneririz.
2. Fareleri tarif edildiği gibi uyuşturun.
3. Seçilen pençeyi işaretleyin ve ayak bileği eklem boşluğuna 20 μL CFA enjekte edin. Seçilen pençe üzerindeki dört periartiküler noktaya 20 μL süspansiyon enjekte edin (toplamda 80 μL).
4. Fareleri solunum ünitesinden çıkarın ve işlenmiş fareleri yeni bir odaya koyun. Hareket kabiliyetlerini yeniden kazanana kadar nefes aldıklarından emin olmak için fareleri izleyin.
5. Her 3 günde bir, bir cep kalınlık ölçer kullanarak ayak bileği eklem çapını ölçerek eklem çapını değerlendirin (Şekil 1A).
6. Her 3 günde bir, artrit skorlama kriterine göre artrit şiddetini değerlendirin (Şekil 1C): 0, normal, eritem ve şişlik belirtisi yok; 1, tarsals veya ayak bileği eklemi ile sınırlı en hafif artrit, eritem ve hafif şişlik; 2, orta derecede artrit, eritem ve ayak bileğinden tarsallara uzanan hafif şişlik; 3, şiddetli artrit, eritem ve ayak bileğinden metatarsal eklemlere uzanan orta derecede şişlik; 4, En şiddetli artrit, eritem ve şiddetli şişlik ayak bileği, ayak ve parmakları veya uzuvun ankilozunu kapsar.

Sonuçlar

Şekil 1: Adjuvan kaynaklı artrit (AA) fare modelinin temsili sonuçları. (A) Ayak bileği eklem çapı bir cep kalınlık ölçer kullanılarak ölçüldü. (B) Eklem şişmesi, ayak bileği eklem çapına (n = 7) göre değerlendirildi. (C) Her artrit skorunun resimleri. (D) Artritin şiddeti 0-4 puanlık bir ölçekte derecelendirildi (n = 7). Veriler orta...

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
15 mL Konik Polipropilen Santrifüj Tüpü	doğan	14-959-53A
23 G x 1 1/4" İğne	Bd	305120
26 G x 3/8" İğne	Bd	305110
30 G x 1/2" İğne	Bd	305106
Komple Freund Adjuvanı, 10 mg / ml	Sigma	1002036152
Eppendorf Mikrotüpler, 1.5 mL	Sigma	Z606340
Kadran Kalınlık Ölçer	Mitutoyo Belediyesi	7301
Shu Rui U40 Tek Kullanımlık Steril İnsülin Enjeksiyon İğnesi 1 mL	Bd	328421

Adet