Monosit Tek Tabakalarında Fcγ Reseptörü Güdümlü Fagositozun İncelenmesi İçin Bir Test

Özet

Kaynak: Tong, T. N., et al. Fcyb Reseptörü Aracılı Fagositozu Değerlendirmek için Monosit Tek Tabakalı Testin Kullanımı. J. Vis. Uzm. (2017)

Bu videoda, poli D antikoru opsonize edilmiş R₂R₂ kırmızı kan hücreleri ile Fcγ reseptör aracılı fagositozu değerlendirmek için periferik kandan birincil monositleri kullanan bir monosit tek katmanlı test gösterilmektedir.

Protokol

Numune toplama ile ilgili tüm prosedürler enstitünün IRB yönergelerine uygun olarak gerçekleştirilmiştir.

1. Periferik Kan Mononükleer Hücre İzolasyonu

1. Asit-sitrat-dekstroz (ACD) antikoagülan (sarı tepeli tüpler) içeren vakutainerler kullanarak sağlıklı bir donörden veya bir hastadan venipunktur yoluyla insan tam kanı elde edin.
   not: Tam kan, bir sonraki adıma geçmeden önce oda sıcaklığında (18-22 ° C) 36 saate kadar ACD'de saklanabilir. Normalde, test için 1-2 adet 10 mL'lik tam kan vakum tüpü yeterlidir.
2. Tam kanı 1: 1 v / v ılık tam RPMI ortamında seyreltin (R....

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
dev/dak 1640	dev/dak 1640	R8758 Serisi
Fosfat tamponlu tuzlu su	Sigma	D8537
8 odacıklı slaytlar	Lab-Tek-ll	154534
R2R2 (cDE / cDE) kırmızı kan hücreleri			Ticari olarak temin edilebilir (örneğin, http:// www.bio-rad.com/en-ca/product/ reaktif-kırmızı-kan hücreleri)
İnsan serumundan poliklonal anti-D	Gama Biyolojikler	DIN 02247724	Piyasada bulunan monoklonal anti-D veya Rh immün globulin ile ikame edilebilir
%100 metanol	Kaledon	6700-1-42
Kapak fişleri	VWR (VWR)	48366 067

Serisi