Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
1. 89Zr-DFO-J591 ile In Vivo PET Görüntüleme
>DİKKAT: Protokolün bu adımı, radyoaktivitenin işlenmesini ve manipüle edilmesini içerir. Bu adımları gerçekleştirmeden önce, araştırmacılar kendi kurumlarının Radyasyon Güvenliği Departmanına danışmalıdır. İyonlaştırıcı radyasyona maruz kalmayı en aza indirmek için mümkün olan tüm adımlar atılmalıdır.
- Erkek atimik çıplak farelerde, prostat (LNCaP) kanser hücrelerinin 5 x 106 lenf nodu karsinomunu deri altına implante edin ve bunların 100-150 mm3 ksenogrefte (aşılamadan 3-4 hafta sonra) büyümesine izin verin.
- 89Zr-DFO-J591 radyoimmünokonjugatını% 0.9 steril salin içinde 1.0 mCi / ml konsantrasyona seyreltin.
- 89Zr-DFO-J591'in 200 μl'sini (DFO = desferrioksamin, J591 = prostat spesifik membran antijeni [PSMA] hedefleyen antikor) çözeltisini (200 μCi; 7.4 MBq) ksenogreft taşıyan farelerin lateral kuyruk damarına enjekte edin.
- İstenen görüntüleme zaman noktasında (ör., enjeksiyondan 12, 24, 48, 72, 96 veya 120 saat sonra), fareyi %2'lik bir izofluran: oksijen gazı karışımı ile uyuşturun.
- Fareyi küçük hayvan PET tarayıcısının yatağına yerleştirin ve tarama sırasında %1 izofluran: oksijen gazı karışımı kullanarak anesteziyi koruyun. Hayvanı tarayıcı yatağına yerleştirmeden önce, ayak parmağını kıstırma yöntemini kullanarak anesteziyi doğrulayın ve anestezi sırasında kurumayı önlemek için farenin gözlerine oftalmik merhem sürün.
- 350-700 keV'lik bir enerji penceresi ve 6 nsn'lik bir çakışma zamanlama penceresi kullanarak en az 40 milyon çakışan olayla statik bir tarama yoluyla fare için PET verilerini elde edin.
- Görüntünün elde edilmesini tamamladıktan sonra, fareyi gözetimsiz bırakmayın ve bilincini geri kazanana kadar diğer farelerle birlikte bir kafese koymayın.
