Method Article

HIV'e Karşı Tasarlanmış Bağışıklığa Sahip İnsanlaştırılmış Bir Fare Modeli Oluşturma

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Zhen, A., et al. İnsanlaştırılmış Fare Modelinde HIV Enfeksiyonuna Karşı Kök Hücre Tabanlı Tasarlanmış Bağışıklık. J. Vis. Uzm. (2016).

Video, insan immün yetmezlik virüsüne (HIV) karşı kök hücre tabanlı tasarlanmış bağışıklığa sahip insanlaştırılmış bir fare modeli oluşturma tekniğini göstermektedir. İnsan fetal timus dokusu ve tasarlanmış hematopoietik kök hücreler (HSC'ler), bağışıklığı ciddi şekilde baskılanmış bir farenin böbrek kapsülüne implante edilir. HIV'e karşı kimerik antijen reseptörlerini (CAR'lar) eksprese eden HSC'ler, timus dokusu ile birlikte lokalizasyonlarını destekleyen jelatinimsi bir protein karışımı içinde karıştırılır. Prosedür sonrası, HSC'ler çeşitli insan bağışıklık hücrelerine farklılaşır ve bu da HIV'e karşı işlevsel bir insan bağışıklık sistemine sahip insanlaştırılmış bir fare modelinin geliştirilmesine neden olur.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Numune toplama ile ilgili tüm prosedürler enstitünün IRB yönergelerine uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. CD4 Kimerik Antijen Reseptörü ile Tasarlanmış İnsanlaştırılmış Farelerin Yapımı

  1. Fetal Timusun İşlenmesi ve Fetal Karaciğerden CD34+ HSC'lerin İzole Edilmesi
    1. Timus İşleme
      1. Timusu 15 ml'lik konik bir tüpte pH 7.4, Fosfat tamponlu salin (PBS) içinde nazikçe yıkayın. Yıkama adımını 3 - 4 k....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
CD34 mikro boncuk kitiMiltenyi130-046-702İnsan CD34+ progenitör hücrelerini sıralamak için
BambankerWako (Vahşi)302-14681hücreleri dondurmak için
QIAamp Viral RNA kitiKeçi52904Serumdaki viral yükü ölçmek için
MACSKüküren Akış SitometresiMiltenyiAkış analizi için
BD LSRFortessa™BD biyolojik bilimlerAkış analizi için
HyaluronidazSigmaH6254-500MGDoku sindirimi için
Deoksiribonükleaz IWorthingtonLS002006doku sindirimi için
KollajenazYaşam teknolojisi17104-019doku sindirimi için
CFX Gerçek zamanlı PCR tespit sistemiBiyoradViral yükü ve gen ekspresyonunu ölçmek için
Fareler, NOD suşu. Cg-Prkdcscid il2rgtm1Wjl/szJJackson Laboratuvarı5557İnsanlaştırılmış fareleri inşa etmek için
Penisilin Streptomisin (Kalem Strep)Thermo Fisher Bilimsel10378016Hücreleri kültürlemek için
piperasilin / tazobaktamPfizerZosyn BelediyesiMantar önleyici
Amfoterisin B (Mantar zonu antimikotik)Thermo Fisher Bilimsel15290-018Mantar önleyici
AUTOCLIP Yara Klipsi, 9 mm - 1000 adetBecton Dickinson'ın fotoğrafı.427631Ameliyat için
Steril Poli Takviyeli Aurora Cerrahi Önlükler, vaka başına 30Medline (Medline)DYNJP2707Ameliyat için
Sütürler, 4-0, vicrylOwens ve Küçük23000J304HAmeliyat için
Alkol hazırlama pedleriOwens ve Küçük3583006818Ameliyat için
Eldiven, cerrahi, 6 1/2Owens ve Küçük4075711102Ameliyat için
Yssel'in Serumsuz T Hücreli OrtamıGemini Biyo-ürünleri400-102CD34+ hücre transdüksiyonu için
İnsan Serum AlbüminiSigma-AldrichA9511CD34+ hücre transdüksiyonu için
sayılı Kanun Hükmünde Kararname adet arası Gazetesi Serisi

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Humanized Mouse ModelEngineered ImmunityHIV InfectionHematopoietic Stem CellsChimeric Antigen ReceptorsFetal Thymus TissueRetro orbital InjectionKidney Capsule ImplantationGelatinous Protein MatrixHuman Immune System

Related Articles