Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Tüm Hücre Yama-Kelepçe Tekniği Kullanılarak Medial Vestibüler Çekirdek Nöronlarına Gürültü Akımlarının Uygulanması

738 görüntülenme

⸱

8 Temmuz 2025

Bu makalede

Özet

Kaynak: Stefani, S. P., et al. Medial Vestibüler Çekirdek Nöron Duyarlılığının In Vitro Değerlendirilmesi için Stokastik Gürültü Uygulaması. J. Vis. Uzm. (2019).

Bu video, gürültü akımlarının elektriksel uyaranlara nöronal duyarlılık üzerindeki etkisini incelemek için tüm hücre yama-kelepçe tekniğini kullanarak eşik altı gürültü akımlarının medial vestibüler çekirdek nöronlarına uygulanmasını içeren bir protokolü göstermektedir.

Protokol

Numune toplama ile ilgili tüm prosedürler enstitünün IRB yönergelerine uygun olarak gerçekleştirilmiştir.

>1. Hayvanlar

NOT: Fareler, Avustralya Kemirgen Merkezi'nden (ARC; Perth, Avustralya) ve Sidney Üniversitesi'ndeki Tıp Vakfı Binası Hayvan Tesisi'nde düzenlendi.

  1. Fareleri, çevresel zenginleştirme ile standart 12 saatlik bir aydınlık/karanlık döngüsünde tutun.
  2. Tüm deneyler için erkek ve dişi C57BL / 6 fareleri (3-5 haftalık) kullanın.

2. Çözeltilerin Hazırlanması

  1. 29 mM NaHCO3, 11 mM....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

figure-results-1
Şekil 1: 12 pA eşiğinin objektif olarak belirlenmesi. 12 pA'dan az (3 ve 6 pA) ve 12 pA'dan (18 ve 24 pA) fazla ateşleme oranları toplandı ve ortalaması alındı. Bu ortalamalar daha sonra bir ANOVA ve sahte ile >12 pA arasında ve <12 pA ile >12 pA arasında istatistiksel anlamlılık kullanılarak analiz edildi. *p < 0.05.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
CaCl2Scharlau BelediyesiCA01951000ACSF ve sACSF için kullanılır
D-(+)-GlikozSigmaG8270ACSF ve sACSF için kullanılır
EGTA (EGTA)SigmaE0396-25GK bazlı hücre içi çözelti için kullanılır
HEPES ÜNİVERSİTESİSigmaH3375-25GK bazlı hücre içi çözelti için kullanılır
KartalKimyasal tedarikPA054-500GACSF, sACSF ve hücre içi çözelti için kullanılır
K-glukonatSigmaP1847-100GK bazlı hücre içi çözelti için kullanılır
Mg-ATPSigmaA9187-500MGK bazlı hücre içi çözelti için kullanılır
MgClKimyasal tedarikMA00360500ACSF ve sACSF için kullanılır
Na3-GTPSigmaG8877-100MGK bazlı hücre içi çözelti için kullanılır
NaCl (Doğal)Kimyasal tedarikSO02270500ACSF ve hücre içi çözelti için kullanın
NaH2PO4.2H 2OAjaxAJA471-500GACSF ve sACSF için kullanılır
NaHCO3SigmaS5761-1KGACSF ve sACSF için kullanılır
SakarozKimyasal tedarikSA030-500GsACSF için kullanılır
İzofluranHenry Schein1169567762Fareleri uyuşturmak için kullanılır
ekipman
Borosilikat cam kılcal damarlarWarner enstrümanlarıGC150T-7.51,5 mm Dış Çap, 1,16 mm İç Çap, 7,5 cm < / > uzunluk
Veri toplama yazılımıSaksografElektrofizyoloji ve analiz için kullanılır
Friedmen-Pearson RongeursDünya hassas enstrümanlar14089 Haber BülteniDiseksiyon için kullanılır
Mikropipet çektirmeNarishige (Narishig)PP-830Mikropipet için kullanılır
Çoklu kelepçe amplifikatörAkson aletleri700 milyarElektrofizyoloji için kullanılır
pH metreBilimsel sper860033Dahili çözüm için kullanılır
Standart desen makasıFST (Türkçe)14028-10Diseksiyon için kullanılır
Sutter mikromanipülatörüSutterMP-225/MElektrofizyoloji için kullanılır
Dik mikroskopOlympusBX51WIElektrofizyoloji için kullanılır
VibratomLeica BelediyesiVT1200Beyin dokusunu dilimlemek için kullanılır
Serisi Serisi Serisi Serisi · Serisi Serisi Serisi

Daha fazla makale keşfet

Gürültü Akımı UygulamasıNöronal Hassasiyet AnaliziElektrofizyolojik KayıtMikropipet TekniğiMembran Mühür OluşturmaAkım Kenetleme KayıtlarıAteşleme Hızı ÖlçümüLineer Regresyon Analizi