Bir omurilik diliminin substantia jelatinosa nöronunda tam hücre yama kelepçesi kaydı

Özet

Kaynak: Zhu, M., et al. Substantia Gelatinosa Nöronlarında Tam Hücre Yama Kelepçesi Kaydı için Akut Omurilik Dilimlerinin Hazırlanması. J. Vis. Uzm. (2019)

Bu video, nöron ateşleme modellerini analiz etmek için tam hücre yama-klemp tekniklerini kullanarak omurilik dilimlerinin substantia gelatinosa (SG) nöronlarında elektrofizyolojik kayıtlar gerçekleştirme prosedürünü göstermektedir. Bu yöntem, omuriliğin SG nöronlarındaki uyaranlara verilen sinirsel tepkilerin incelenmesine izin verir.

Protokol

Hayvan örneklerini içeren tüm prosedürler, uygun hayvan etik incelemesi tarafından gözden geçirilmiş ve onaylanmıştır.

1. Çözelti ve Malzemelerin Hazırlanması

1. Çözümleri
   1. Yapay beyin omurilik sıvısı (ACSF) hazırlayın (mM cinsinden): 117 sodyum klorür (NaCl), 3.6 potasyum klorür (KCl), 1.2 sodyum dihidrojen fosfat dihidrat (NaH₂PO₄ · 2H₂O), 2.5 kalsiyum klorür dihidrat (CaCl₂ · 2H₂O), 1.2 magnezyum klorür hekzahidrat (MgCl₂ · 6H₂O), 25 sodyum bikarbonat (NaHCO₃), 11 D-glikoz, 0.4 askorbik asit, ve 2....

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
NaCl (Doğal)	Sigma	S7653 Serisi	ACSF ve PBS'nin hazırlanması için kullanılır
Kartal	Sigma	60130	ACSF, sükroz-ACSF ve K + bazlı hücre içi çözeltinin hazırlanmasında kullanılır
NaH2PO4·2H2O	Sigma	71500	ACSF, sakaroz-ACSF ve PBS'nin hazırlanmasında kullanılır
CaCl2·2H2O	Sigma	C5080	ACSF ve sükroz-ACSF'nin hazırlanmasında kullanılır
MgCl2·6H2O	Sigma	M2670	ACSF ve sükroz-ACSF'nin hazırlanmasında kullanılır
NaHCO3	Sigma	S5761 Serisi	ACSF ve sükroz-ACSF'nin hazırlanmasında kullanılır
D-Glikoz	Sigma	G7021	ACSF'nin hazırlanması için kullanılır
Askorbik asit	Sigma	P5280 Serisi	ACSF ve sükroz-ACSF'nin hazırlanmasında kullanılır
Sodyum piruvat	Sigma	A7631	ACSF ve sükroz-ACSF'nin hazırlanmasında kullanılır
Sakaroz	Sigma	S7903 Serisi	Sükroz-ACSF'nin hazırlanmasında kullanılır
K-glukonat	Wako (Vahşi)	169-11835	K + bazlı hücre içi çözeltinin hazırlanması için kullanılır
Na2-Fosfokreatin	Sigma	P1937 Serisi	Hücre içi çözeltinin hazırlanması için kullanılır
EGTA (EGTA)	Sigma	E3889	Hücre içi çözeltinin hazırlanması için kullanılır
HEPES ÜNİVERSİTESİ	Sigma	H4034	Hücre içi çözeltinin hazırlanması için kullanılır
Mg-ATP	Sigma	A9187	Hücre içi çözeltinin hazırlanması için kullanılır
Li-GTP (Çelik)	Sigma	G5884	Hücre içi çözeltinin hazırlanması için kullanılır
CsMeSO4	Sigma	C1426	Cs + bazlı hücre içi çözeltinin hazırlanması için kullanılır
CsCl (İngilizce	Sigma	C3011	Cs + bazlı hücre içi çözeltinin hazırlanması için kullanılır
ÇAY-CL	Sigma	T2265	Cs + bazlı hücre içi çözeltinin hazırlanması için kullanılır
Na2HPO4	Hengxing Kimyasal Reaktifleri		PBS'nin hazırlanması için kullanılır
Borosilikat cam kılcal damarlar	Dünya Hassas Aletler	TW150F-4	1,5 mm Dış Çap, 1,12 mm İç Çap
Mikropipet çektirme	Sutter Enstrümanı	P-97	Mikropipetlerin hazırlanmasında kullanılır
Kızılötesi CCD kamera	Dage-MIT	IR-1000
Yama kelepçesi amplifikatörü	HEKA (Türkçe	EPC-10
Mikromanipülatör	Sutter Enstrümanı	MP-285
XY aşaması	Burleigh	CEBELITARIK X-Y
Dik mikroskop	Olympus	BX51WI
Ozmometre	ileri	FISKE 210
PH metre	Mettler Toledo	FE20

Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi Serisi ) Serisi Serisi Serisi Uçağı Serisi ) Serisi Serisi Dersi Serisi