Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
1. Domuz yavrusu
- Bir domuz yavrusunu bacağından veya göğsünden tutarak yakalayın. Tutun ve herhangi bir dışkılama veya idrara çıkmanın farkında olun.
- Gerekirse, domuz yavrusunu bir sayı ile işaretleyin.
- Domuz yavrusunu bir havluya sarın. Domuz yavrusu sakinleşecek. Domuz yavrusunun aşırı ısınmasına dikkat edin.
- Domuz yavrusunu bir elinizle vücutta veya önkolda tutun. Burnu tutmak için diğer elinizi kullanın. Domuz yavrusunun aşırı ısınmasının farkında olun ve düzgün nefes almakta serbest olduğundan emin olun.
2. Elektrotlar
- Elektrotları ikinci bir kişinin takmasını sağlayın.
- Cildi kirden su veya etanol ile temizleyin. Gerekirse, kafayı tıraş edin.
- Aşındırıcı bir elektroensefalogram (EEG) jeli ve kaliteli (Q) uçlu bir ölü deri hücresini çıkarın. Daha sonra aşındırıcı jeli çıkarın. Alternatif olarak, zımpara kağıdı kullanın.
- Kendinden yapışkanlı elektrotları istenen yere sabitleyin. Toprak elektrodunu beyinciğin üzerine (kulakların arasına) ve referans elektrodu burnun üzerine yerleştirin. Kayıt elektrodunu istediğiniz yere yerleştirin.
not: Bu durumda, referans nötr bir konuma (burun) yerleştirildiği için tek kutuplu bir kayıt yapıldı. Şimdiye kadar domuz yavruları için standart bir sistem mevcut değildir. Burada, sağ beyin hemisferinde parietal bir kayıt pozisyonu (göz ve kulak arasında) kullanıldı.
- Kabloları telemetri ünitesine bağlayın. Üniteyi açın. Kullanılan telemetri sistemine bağlı olarak, bu bir manyetik anahtar veya radyo frekansı uyandırma sinyali olabilir.
- Telemetri ünitesini ve tüm kabloları ve tüm elektrotları iki bileşenli cilt yapıştırıcısı silikon kauçukla kaplayın (bkz. Malzeme Tablosu). Her iki bileşenden eşit miktarlarda karıştırılarak, kürlenme süresi 1 dakika aralığında olacaktır. Gözler ve kirpikler lastikle kapatılmamalıdır.
- Silikon kauçuk tamamen kürlenene kadar bekleyin.
- Domuz yavrusunu tekrar ağıla yerleştirin.
- Daha uzun bir süre (birkaç dakika) boyunca rahatsızlık belirtileri gösterip göstermediğini görmek için domuz yavrusunu gözlemleyin.
3. Ölçüm
- Domuz yavrusu iyileşene ve davranışlarını kardeşlerininkiyle (beslenme, oynama, uyuma) senkronize etmeye başlayana kadar, genellikle 30 saniye sonra bekleyin (Şekil 1).
- İsterseniz uyku evrelerini bekleyin. Kayıt süresi, belirli bilimsel soruya bağlıdır. Burada 10 dakikalık kayıt seansları kullanıldı.
- Telemetri ünitesi 2'den fazla domuz yavrusu tarafından kapsanıyorsa, sinyal alıcı için çok düşük olabilir. Üstte uyuyorlarsa domuz yavrularını nazikçe itin. Dişi domuzun farkında olun; Agresif tepki verebilir.
- Veri toplama yazılımı ile kaydı başlatın (bkz. Malzeme Tablosu).
4. Bitir
- Kayıttan sonra (genellikle birkaç saat), 1. adımda açıklandığı gibi domuz yavrusunu tekrar yakalayın. Dişi domuzun farkında olun; Agresif tepki verebilir.
- Silikon kauçuğu bir kenarından yavaşça kaldırın. Ardından, elektrotları ve telemetri ünitesini içeren tüm silikon kauçuk yamasını çıkarın. Domuz yavrusunun gözlerine dikkat edin.
- Domuz yavrusunu tekrar ağıla yerleştirin.