Canlı Fare Hipokampusunda Floresan Olarak İşaretlenmiş Nöronların Uzunlamasına İki Fotonlu Görüntülenmesi

Özet

Kaynak: Ulivi, A. F., et. al. Canlı Farelerde Dorsal Hipokampal CA1'in Uzunlamasına İki Fotonlu Görüntülemesi. J. Vis. Uzm. (2019)

Bu video, canlı bir farede floresan olarak işaretlenmiş piramidal nöronların uzunlamasına iki fotonlu görüntülemesini göstermektedir. hipokampal CA1 bölgesindeki nöronal yapıyı incelemek için dendritlerin ve dendritik dikenlerin hazırlanmasını, kanül hizalamasını ve görüntülenmesini sergilemek.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

Sonuçlar

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Paslanmaz çelik boru Ø 3,0 x 0,25 mm (İç Ø 2,5 mm) L = 500 mm	Sawade	R00303	Kanül metal halka için paslanmaz çelik boru
Mikroskop Kapak camı (4 mm yuvarlak)	Engelbrecht Medizin and Labortechnik		Cam lameller kanül camı
Isofluran CP, Flasche 250 ml	Henry Schein VET GmbH	798932	Liquid anestezi için isoflurane
Harvard Apparatus Isoflurane Funnel-Fill Vaporizer	Harvard Apparatus GmbH	34-1040	Isofluran vaporizer
Lab Active Scavenger	Gropper Medizintechnik	UV17014	Isoflurane çöpçü system
CMA 450 Sıcaklık Kontrol Cihazı	Hugo Sachs Elektronik - Harvard Apparatus GmbH	8003770	Isıtma battaniyesi
Bepanthen Augen- und Nasensalbe	Bayer AG		Oftalmik merhem
Head plates	Custom made		30 mm x 10 mm boyut; 8 mm çapında delik, titanium
Head plate clamp	Custom made		Head plate holder
Kaide direk tutucular	Thorlabs	PH20E/M	Kafa plakası tutucu
Paslanmaz çelik direk	Thorlabs	TR30/M	Kafa plakası tutucu
Paslanmaz çelik direk	Thorlabs	TR75/M	Kafa plakası tutucu
Paslanmaz çelik direk	Thorlabs	TR150/M	Kafa plakası tutucu
Post bağlayıcı kelepçeleri	Custom made	<
Alüminyum Breadboard, 300 mm x 450 mm x 12,7 mm, M6 Taps	Thorlabs	MB3045/M	Mikroskop aşaması
7" x 4" Lab Jack	Thorlabs	L490/M	Mikroskop aşaması
Düşük profilli yüz maskesi küçük fareler	Emka Technologies	VetFlo-0801	Anestezi yüz maskesi tutucusu
Güç Ölçer Modeli 1918-R	Newport		Güç ölçer
X-Cite 120Q	Excelitas Technologies		Floresan lamba
İki fotonlu mikroskop	Bruker	Ultima IV	İki fotonlu mikroskoplar
İki fotonlu mikroskop	Thorlabs	Bergamo	İki fotonlu mikroskoplar
Plan N 4x/0.10 ∞/-/FN22	Olympus		Objective
Plan N 10x/0.25 ∞/-/FN22	Olympus		Objective
LMPlan FLN 20x/0.40 ∞/-/FN26.5	Olympus		Objective
XLPlan N 25x/1.00 SVMP ∞/0-0.23/FN18	Olympus		Objective
2P uyarma için Ultafast ayarlanabilir lazer	Spectraphysics	Mai Tai Deep See	Excitaiton lasers
2P uyarma için Ultafast ayarlanabilir lazer	Spectraphysics	InSight DS+ Dual beam	Excitaiton lasers
3P uyarma için Ultafast ayarlanabilir lazer	Tutarlı	Monaco	Excitaiton Lazer

td style='background-color:#ffffff; Renk: #1a202c; yazı tipi ailesi:Roboto; yazı tipi boyutu: 7pt; font-weight:normal; taşma:gizli; dolgu: 0 piksel 3 piksel; dikey hizalama: alt; beyaz boşluk: normal; sözcük kaydırma:kesme sözcüğü; sarma-stratejisi:4;' >Kafa plakası tutucu