$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
- Difüzyon manyetik rezonans görüntüleme (MRG)
NOT: Difüzyon ağırlıklı görüntüleme travma indüksiyonundan önce ve 1 gün sonra yapılır.
- {{}}2 karışımı ile doldurulmuş küçük bir indüksiyon odasında sıçanı uyuşturun. Sıçan bir pençe veya kuyruk tutamına yanıt vermediğinde, anesteziyi 500 mL / dak'lık bir akış hızıyla% 2'ye düşürün. Hayvanı tarayıcı yatağına baş üstü yüzüstü pozisyonda aktarın.
- Sıçatanı, diş çubuğu ve burun konisi ile baş tutucuya yerleştirin, anesteziyi verin ve beynin merkezi, karesel hacimli MRI bobininin merkezi seviyesine gelene kadar kafayı öne doğru kaydırın. Korneaya herhangi bir zarar vermemek için gözlere küçük miktarlarda kayganlaştırıcı merhem sürün. Tarama sırasında hareket etmesini önlemek için kafayı küçük bir bant parçasıyla sabitleyin.
- Solunumu izlemek için farenin göğüs kafesinin altına bir basınç pedi yerleştirin ve fareyi sıcak tutmak için fareyi dolaşan ılık su ısıtma battaniyesi ve balonlu naylon ile örtün. Taramadan önce, sinyalin gürültüsüz bir şekilde net olduğundan ve solunum döngüsünün tutarlı olduğundan emin olmak için solunum monitörünü kontrol edin. Gerekirse baskı pedinin yerini değiştirin.
NOT: Anestezi seviyesi %1-2 arasında ayarlanarak solunum hızı 1.200-1.700 ms'de 1 nefes arasında tutulmalıdır. - Dörtlü hacim bobinini başın üzerine kaydırın. Bobinin ayar ve eşleştirme kapasitörlerini, bobin satıcısı tarafından sağlanan talimatlara göre uygun frekans ve empedansa ayarlayın. Taramaya başlamak için tarayıcı yatağını tarayıcı deliğine ilerletin.
- Doğru konumlandırmayı sağlamak için varsayılan bir üç düzlemli keşif taraması ("tripilot") edinin.
- Yeni Tarama öğesine tıklayarak ve protokol listesinden üç pilot dizisini seçerek tripilot dizisini Tarama Kontrolüne yükleyin. Ardından, taramayı başlatmak için trafik ışığı } düğmesine tıklayın.
- {{}} Tarama bittiğinde, taramayı görüntü ekranına yükleyin ve 1) başın düz durduğundan ve 2) beynin mıknatıs ve bobinin merkezinde konumlandırıldığından emin olun. Gerekirse başlığın ve/veya tarayıcı yatağının konumunu ayarlayın ve yeni bir tripilot taraması edinin.
- Otomatik bir ikinci dereceden şim protokolü kullanarak yerel manyetik alanı ayarlayın: ikinci dereceden dolgu protokolünü adım 1.5.1'de açıklandığı gibi Tarama Kontrolüne yükleyin. Ardından, Acq sekmesine tıklayın | Mevcut Ayarlamalar | {{}} için yönteme özel ayarlama.
- Adım 1.5.1'de açıklandığı gibi Tarama kontrolüne Yeniden Odaklanmış Yankılar (RARE) dizisine sahip yeni bir T2 Hızlı görüntüleme yükleyin.
- Aşağıdaki parametreler dışında varsayılan ayarları kullanarak T2 ağırlıklı görüntüler elde edin:
- {{}} sekmesini açın ve tekrarlama süresini (TR) ve yankı süresini (TE) 5.500 ms ve 37 ms olarak ayarlayın, sırasıyla. Ayrıca, 109 μm x 109 μm'lik daha yüksek bir düzlem içi çözünürlüğe izin vermek için görüş alanını ve matris boyutunu değiştirin (varsayılan çözünürlük = 156 μm x 156 μm). Dilim kalınlığının 600 μm olduğundan, dilim sayısının 45 olarak ayarlandığından ve RARE faktörünün 8 olarak ayarlandığından emin olun.
- Geometri düzenleyicisi açın ve dilim paketini beynin bulbusu ve beyincik dahil olmak üzere doğru konuma yerleştirin.
- Adım 1.5.1'de açıklandığı gibi B_DIFFUSION klasöründen üç yeni eko-düzlemsel difüzyon ağırlıklı spin-eko dizisi (DtiEpi) Tarama Kontrolü protokolüne yükleyin.
NOT: Üç farklı difüzyon "kabuğu" kullanılarak, difüzyon tensör görüntüleme (DTI) modeli, difüzyon basıklığı görüntüleme (DKI) modeli ve beyaz cevher yolu bütünlüğü (WMTI) modelinin tümü tahmin edilebilir. En yüksek b değeri maksimum 3000 s/mm2 olmak üzere en az üç farklı b değeri kullanılması önerilir ve görüntüleme kabuğu başına en az 15 eşit aralıklı yön bulunur. - Aşağıdaki ayarların dışında varsayılan ayarları kullanarak difüzyon ağırlıklı görüntüler (DWI'ler) alın:
- sekmesini açın ve Geometry sekmesi altında geometrik parametreleri ayarlayın. 333 μm x 333 μm çözünürlük sağlamak için görüş alanını ve matris boyutunu 105 x 105 olarak ayarlayın.
- Dilim yönünü eksene ve dilim sayısını 25 olarak ayarlayın, böylece 500 μm'lik bir dilim kalınlığı ve 600 μm'lik dilimler arası mesafe elde edilir. Okuma yönünü sağa doğru değiştirin.
- Kontrast sekmesine tıklayarak yankı süresini 24 ms ve tekrarlama süresini 6.250 ms olarak ayarlayın.
- Bant genişliğini 250.000 Hz'e ayarlayın ve yağ bastırmayı açın. Ortalama sayısını bir olarak ayarlayın.
- Research sekmesine tıklayın ve ortalama sayısını (EPI segmentleri) 4 olarak değiştirin.
- Araştırma sekmesi içindeki Diffusion sekmesine tıklayın. Bu adımı, üç difüzyon kabuğunun her biri için ayrı ayrı gerçekleştirin.
- Difüzyon yönlerinin sayısını ilk mermi için 32, ikinci mermi için 46 ve üçüncü mermi için 64 olarak ayarlayın.
- Özel degrade yön dosyalarıyla degrade yönlerini ayarlayın.
- B0 görüntülerinin sayısını ilk mermi için 5, ikinci mermi için 5 ve üçüncü mermi için 7 olarak değiştirin.
- Yön başına b değerini 800 s/mm2, ilk mermi için 1500 s/mm2 ve üçüncü mermi için 2000 s/mm2 olarak ayarlayın.
NOT: Degrade yönlerini özel bir degrade yönleri dosyasıyla ayarlamak, Enter Difüzyon Yönleri seçeneğini evet olarak ayarlayarak manuel olarak veya DTI_SET_DIRECTIONS makro kullanılarak otomatik olarak yapılabilir.
- Geometri düzenleyicisi açın ve artefaktı ve tarama süresini azaltmak için yalnızca serebrum'u içeren görüş alanını bulbus ve beyincik arasına yerleştirin. Doygunluk üzerine tıklayarak ve kaydırma çubuklarını kullanarak bantları tercih edilen konumda kaydırarak artefaktları azaltmak için 5 mm'lik altı doygunluk bandını beynin dışına yerleştirin.
NOT: Bulbüs ve beyincik, anatomik işaretlere ve üç pilot taramanın üç görüntüsüne dayanarak tanımlanabilir.
- {{}} trafik ışığı sembolüne tıklayarak içe aktarılan dizileri alın. Yukarıda açıklanan parametrelerin ayarlarını kullanarak, T2-RARE taramasının alım süresi 12 dakika, ilk DWI kabuğunun 15 dakika, ikinci DWI kabuğunun 21 dakikası ve üçüncü kabuğun 30 dakikasıdır. Toplam çekim süresi yaklaşık 80 dakikadır (tek bir alıcı kanal sisteminde).
- Tarama protokolünün tamamlanmasının ardından, hayvanı tarayıcı yatağından çıkarın ve hayvanı 37 °C'de bir ısıtma yastığı ile temiz bir kafese yerleştirin. Bilinci yerine geldiğinde hayvanı ev kafesine geri koyun.