$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
1. Optik Nörit ve Beyin İltihabının Biyolüminesan Görüntüleme
- Görüntüleme sisteminin kurulumu
- Biyolüminesans ve yakın kızılötesi sinyallerin analizine izin veren herhangi bir ekipmanla in vivo görüntüleme gerçekleştirin.
- Tüm görüntüleme prosedürleri sırasında fareleri% 2 - 2.5 izofluran anestezisi altında tutun.
- Ortadaki gaz kaynaklarını kullanarak bir veya iki fareyi aparatta yan yana yerleştirin. Üst omurgayı merkeze yerleştirin.
- İlaç etkilerini değerlendirmek için, her grupta bir tane olmak üzere aynı anda iki fare kullanarak fare çiftlerini karşılaştırın. Bu, biyolüminesan görüntüleme için önemlidir.
- Aşılama bölgesini siyah bezle koruyun ve farenin/farenin doğru konumlandırılmasını değerlendirmek için bir fotoğraf ve temel görüntü çekin. Tüm görüntüler için, fotoğraf makinesinden 6,5 cm uzakta olacak şekilde B odağını kullanın.
- Biyolüminesan inflamasyon probunun enjeksiyonu ve görüntülenmesi
- in vivo görüntüleme sistemi ayarlarını kullanın: Epi-BLI, Em filtresi açık, Ex filtre bloğu, fstop 1, gruplama 8, odak B = 6,5 cm, reklam pozlaması 120 sn; Temel bir görüntü alın.
- Kullanıma hazır kemilüminesan reaktiften (40 mg / mL) 100 μL ip enjekte edin. Şırıngayı doldurmadan önce iyice karıştırın.
- Enjeksiyondan 5, 10 ve 15 dakika sonra biyolüminesans görüntüleri yakalayın. Biyolüminesan zirvenin zaman seyri hayvanlar arasında farklılık gösterir.
NOT: Zirve enjeksiyondan 5-10 dakika sonra ortaya çıkacaktır; 15 dakikalık bir düşüş, daha fazla görüntüye gerek olmadığını gösterir. Farklı zaman kurslarından kaynaklanan küçük önyargıları ortadan kaldırmak için fare çiftleri kontrol ve tedavi gruplarını kullanın. - Denemeyle ilgili açıklamaları doldurun. Otomatik olarak açılan bir iletişim kutusunu gözlemleyin; Fare suşu, cinsiyet, zaman noktası, prob enjeksiyonunun zamanı, grup, vb gibi bilgileri içerir. Dosyaların tümünü tek bir klasöre kaydedin; Zaman etiketlerine ve tüm açıklamalara sahip olacaklar.