Farelerde Tekrarlayan Hipoksik Ön Koşullandırmaya Nöronal Adaptasyon

Özet

Kaynak: Poinsatte, K., et al., Farelerde Tekrarlayan Hipoksik Ön Koşullandırma ve Geçici Orta Serebral Arter Oklüzyonu Sonrası Nörovasküler Korumanın Niceliklendirilmesi. J. Vis. Uzm. (2015)

Bu video, iskemik inmeye neden olmadan önce bir fareyi kontrollü hipoksi döngülerine maruz bırakarak tekrarlayan hipoksik ön koşullandırma (RHP) yöntemini göstermektedir. Deney, kan-beyin bariyeri stabilitesi, nöronal adaptasyon ve iltihaplanma üzerindeki etkilerini değerlendirir.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Tekrarlayan Hipoksik Ön Koşullandırma

:

1. Gaz regülatörlerinde özel tasarım dört akış ölçer ve oksijen (O₂) tanklarından gelen sıkıştırılmış gazın bir giriş portu aracılığıyla odalara akmasına izin vermek için bunları polivinil klorür (PVC) tüplü standart 15 L indüksiyon odalarına takın.
2. Fareleri 2 gruba ayırın: %8 ve %11_O2'ye maruz kalan tekrarlayan hipoksik ön koşullandırma (RHP) Grubu ve aynı anda %21_O2'ye (oda havası) maruz kalan Kontrol Grubu.
3. Her kafesin üst filtre kapağını çıkarın ve kafesi, yiyecek ve su şişeleri sağlam olacak şekilde ilgili O₂ tanklarına bağlı bölmelere yerleştirin. Haznenin kapağını kapatın ve sabitleyin.
   1. Tanklar için ana gaz vanasını açın ve her indüksiyon odası için ilk akışı, maruz kalmanın ilk 2 dakikası için dakikada 5 L (LPM) olarak ayarlayın. Pozlamanın geri kalanı için akış hızını 1 LPM'ye düşürün.
   2. Pozlamanın sonunda, akışı 0 LPM'ye düşürün ve tankların gaz vanalarını kapatın.
   3. Hazne kapaklarını açın ve her kafesteki filtre üst kapağını değiştirin. Bir sonraki hipoksik maruziyete kadar kafesleri standart muhafazaya yerleştirin.
4. Her kullanımdan sonra her indüksiyon odasına NPD (Steris) veya eşdeğer bir dezenfektan/koku giderici püskürtün.
5. Hem %21 hem de RHP farelerini iki hafta boyunca günün aynı saatinde maruz bırakın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Debimetreler, regülatörler	VetEquip, Inc	Özel sipariş	Dört akış ölçer, her bir indüksiyon odasındaki giriş portuna plastik bir dişi konektörle bağlanan 6.0 mm esnek PVC boruya bağlanır. Bu akış ölçerler 6.5" x 1" x 1" metal çubuğa cıvatalanmıştır. Bu metal çubuk, DISS çıkışlı bir MI-246-P basınç göstergesine cıvatalanmıştır. Bu manometre ve debimetre ekipmanı, her yeni gaz silindirine bir anahtarla takılabilir.
%21 O₂ tankı	AirGas	OX USP200
%11 O₂ tankı	AirGas	Özel sipariş
%8 O₂ tankı	AirGas	Özel sipariş
15 L indüksiyon odaları	VetEquip	941454