Mürin Yüzeysel lenf nodu Cerrahisi

Summary

Aynı fare zaman içinde bir bağışıklık yanıtı ilerlemesini takip etmek, lenf düğümleri sırayla ameliyatla çıkarılabilir. Burada, bu teknik gerçekleştirilebilir açıklanmıştır.

Abstract

Bir aşı, bir enfeksiyon veya tümöre karşı bir bağışıklık cevabı ilerlemesini anlamak için immünoloji alanı içinde, yanıt zaman içinde takip eder. Benzer şekilde, lenfosit homeostazı çalışma süresi Elbette deney gerektirir. Aynı fare olan bu çalışmaların gerçekleştirme deney değişkenlik de kullanılan farelerin sayısını azaltmak için uygundur. Kan çekilme zamanı tabii deneyler performans sağlar, ancak yalnızca lenfositler dolaşım hakkında bilgi verir ve hücre ^1-4 sınırlı sayıda sağlar. Vücut içinde dolaşan ve lenf bezlerinde bulunan lenfosit farklı özelliklere sahip olduğundan, her iki bölgede incelemek önemlidir. Cerrahi ile lenf nodlarının çıkarılması sıralı bir bağışıklık tepkisi veya zaman içinde aynı fare immün hücre genişleme takip eşsiz bir fırsat sunuyor. Dahası, bu teknik PE için yeterli olan lenf düğümü başına 1-2x10 ⁶ hücreleri arasında verimlerifenotipik karakterizasyonu ve / veya fonksiyonel testler rform. Sıralı lenf nodu cerrahi veya lenfadenektomi başarıyla bize ve diğerleri ^5-11 tarafından kullanılmıştır. Burada, brakiyal ve kasık lenf düğümleri bir Narkoz fare derisinde küçük bir kesi yaparak çıkarılabilir açıklar. Cerrahi yüzeysel ve hızlı bir olduğundan, fare çok çabuk kurtarır, iyi iyileştirir ve aşırı acı deneyim değil. Her iki günde, o zaman tabii deneyler için izin veren bir ya da iki lenf düğümleri hasat etmek mümkündür. Bu teknik, zamanla lenf düğümü özellikleri-bulunan lenfositler incelemek ve böylece de uygundur. Bu yaklaşım çeşitli deneysel tasarımlar için uygundur ve biz birçok laboratuvarda sıralı lenf nodu cerrahisine yarar olacağına inanıyorum.

Protocol

1. Cerrahi Öncesi Hazırlık

Fareler Hayvan Bakımı yönergelere Kanada Konseyi'ne göre tedavi edildi.

1. Ketamin / Xylazine (150/300 mg / kg, ip) ile enjeksiyon yoluyla ya da izofluran inhalasyon (% 2, 1L oksijen) ile Anesthetise fareleri. Eğer mevcutsa bu anestezi zaman ve derinliği daha iyi bir kontrolü için olanak olarak, izofluran kullanılmalıdır. Ayrıca, oksijen hayvanın fizyolojik işlevleri destekler aynı anda verilir. Dahası, izofluran doğrudan akciğerler ile elimine edilir ve böylece hepatik veya böbrek metabolizmasını gerektirmez.
2. Ya da bir başka analjezik - Buprenorfin (0.1 mg / kg, sc 0,05) enjekte edilir.
<....

Discussion

Biz pek çok deneysel sistemler için geçerli olabilir LN cerrahi bir protokol tanımladılar. Immün yanıtlar veya bağışıklık hücre homeostazının takip etmek çok yararlı olmasına rağmen, bu tekniğin birkaç sınırlaması vardır. İlk olarak, yalnızca dört LN toplanabilirler. İkincisi, incelenen immün yanıt sistemik olabilir veya yüzeyel inguinal veya brakiyal (cilt-boşaltma) LN oluşması gerekir. Son olarak, hücreler hasat sayısı LN kaldırılması, mutlak hücre sayısı ihtiyaç duyulduğunda deney değişkenliği katkıda bulunabilir bir.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Reaktif Adı	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Güzel Desen Premium Forseps Graefe	Harvard Apparatus	52-2144	Kesinlikle Eğri, 10 cm (4), 0.8 mm uç
Michel Klip Forseps uygulanması ve Çıkarma	Harvard Apparatus	52-3779	12.5 cm (5)
Michel Klip 100	Harvard Apparatus	52-3746	7,5-1,75 mm
Temgesic (Buprenorfin hidroklorür)	Schering-Plough
Vetalar (Ketamin hidroklorür)	Boniche Hayvan Sağlık		DIN: 01989529
Spinal anestezi (Ksilazin)	Bayer		DIN: 02169592
Izofluran	ABBOTT		DIN: 02032384
Hypotears göz merhemi	Novartis Ophtalmics		DIN: 02133288
Baxedin (izopropil alkol içinde Clorhexidine glukonat 2% 70%)	Omega	L0000017	DIN: 02251477