Nöronal yanıtların Elektrofizyolojik karakterizasyonu beyin fonksiyonu anlamak için ve yol izleme için boyaların yerleştirme yönlendirmek için önemlidir. Bununla birlikte, birçok çalışma anestetize hayvanlarda gerçekleştirilir. Anestezi olmadan beyin fonksiyonu anlamak için, nöronal yanıtı özellikleri kaydetmek ve uyanık fare boya enjekte etmek için bir yöntem geliştirdi.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Sinir Yanıtları Kayıt ve Tarayıcıları enjekte için bir Awake Fare hazırlanması
Bu makalede
Özet
Özet
Biliyorsunuz anestezi, beynin çeşitli bölgelerinde nöral cevabı özelliklerini değiştirir olduğu bilinmektedir. 13. Işitme sistemi olarak, eşik, frekans özgüllük ve inhibitör sidebands dahil olmak üzere beyin sapı nöronları temel yanıtı özellikleri anestezi altında 1-2 belirgin şekilde değişmiş. Bu gözlemler fizyolojistleri anestezi kirletici etkisi olmayan tek nöronlardan kaydetmek için yollar aramaya sevk etti. Bir sonuç beyin sapı tamamen Ortabeyin 4 seviyesinde transeksiyon bir decerebrate hazırlanması, idi. Bu hazırlık sakıncaları müthiş bir ameliyat, ön beyin gelen projeksiyonlar inen ortadan kaldırılması ve orta beyin yukarıdaki yapıları incelemek için duyusal stimülasyon kullanmak için bir yetersizlik vardır. Farklı bir stratejiye hayvan uyanık ve / veya 5,6 davranışlar ise tek nöronlar ve multiunit kümelerden kaydetmek için kronik elektrod dizileri implant olmuştur 10-12 yarasalar 7-9 kullanılan bir kafalık tekniği adapte var. Bu yöntemi kullanarak, biz unanesthetized farenin birkaç gün içinde elektrofizyolojik yapabiliyoruz. Kayıt seansları sonunda, biz sonra elektrot pozisyonları ve kayıt siteleri yeniden ya ve kayıt lokus gelen yolları tespit edilebilir, böylece bir izleyici enjekte etmek için bir boya enjekte edebilir. Bu yöntem kullanımı anestezi olmadan birden fazla gün boyunca iyi izole tek nöron kayıtları için izin verir.
Protokol
1. Kafalığı Genel Bakış
- Özel-yerleşik kafa yazılan birleştirmek için, bir haç oluşturacak şekilde paslanmaz çelik çubuk "a 3/32 açılan bir delik içine dik paslanmaz çelik rulo-pin" 1/16 yerleştirin. Kafa-sonrası dikey parçanın yaklaşık 20 mm ile 15 mm kadar çapraz yatay parçanın olmalıdır. Bir # 1-72 vida kabul dikey çubuğun bir ucundan dokunun. (Şekil 1).
- Cerrahi ve kayıt sırasında, baş-sonrası bir # 1-72 vida (Şekil 2) ile özel-yerleşik pirinç veya alüminyum montaj çubuğu sabitlenir. Montaj çubuğunun uzun bir parça yaklaşık 90 mm uzunluğunda ve geniş 5-10 mm olmalıdır. Kafa-son....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Fare elektrofizyolojik ve nöroanatomik deneyler için kafa sonrası koltuk sisteminin avantajı deneyler anestetik ilaçlara bağlı olası cevabı kirliliği ortadan kaldırarak, unanesthetized, uyanık fare ile yapılabilir olmasıdır. Buna ek olarak, bir kümesini daha verimli bir hayvan kullanım için izin vermek için birden çok gün boyunca kullanılabilir.
Kafa-sonrası için en bileşenleri off-the-raf mevcuttur. Sadece baş-sonrası ve montaj aparatları ısmarlama olduğu, inşa etmek oldukça basit ve yenide.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Biz ifşa hiçbir şey yok.
Teşekkürler
NSF hibe 0920060, NIH hibe DC004395, NHMRC hibe 1.009.482, Bilim ve Tıp Araştırmaları NSW ve Garnett Passe ve Rodney Williams Memorial Foundation tarafından desteklenmektedir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Isim | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
| Diş çimento önce kafatası temizlik için Etch jel | Henry Schein | 101-5396 | 1.2 ml şırınga ile 12/pk |
| Diş çimento için astar | Kerr Optibond'un | 25881 | 8 mL şişe |
| Diş çimento Yapıştırıcı | Kerr Optibond'un | 25882 | 8 mL şişe |
| Diş çimento Aplikatörler | Kerr Optibond'un | 24680 | 200/pk |
| Diş Çimento | Karizma, Heraeus Kulzer | 66000085 | 4GM Şırınga Dolum |
| Tungsten Rod (Ground Pin) | AM Sistemleri | 717200 | 0.010 "çaplı |
| Ekonomi UV Kür Işık | Henry Schein | CU-80 | |
| Head-sonrası | In-house Dahili | ||
| Montaj çubuğu | In-house Dahili | ||
| Yerleştirme bloğu | In-house Dahili | ||
| Stereotaksik Çerçeve | David Kopf Aletleri | 902 | |
| Fare ve Yenidoğan Rat Adaptör | Stoelting | 51625 | |
| İzotermal Pad Deltaphase | Braintree Scientific, Inc | 39DP |
Kaynaklar
- Evans, E. F., Nelson, P. G. The responses of single neurones in the cochlear nucleus of the cat as a function of their location and the anaesthetic state. Exp. Brain Res. 17, 402-427 (1973).
- Joris, P. X.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
