Journal of Visualized Experiments (JoVE) dergisinin Mart sayısı, Drosophila lokomotor davranışını ölçmek için temel olarak önemli üç deneye odaklanan bir makale ile başlamaktadır. Spesifik olarak bu deneyler arasında larva sürünme deneyi (larva motor fonksiyonu için), RING deneyi (ergin motor fonksiyonu için) ve kur yapma deneyi (koordinasyon ve duyusal yetenekleri değerlendirmek için) yer almaktadır.
Larval sürünme deneyi, larvaların toplanmasını ve genç sineklerin ilgili deneysel bir ilaca maruz bırakılmasını içerir. Ardından hayvanlar, bir kareli kağıt üzerine yerleştirilmiş bir petri kabına aktarılır ve dakika başına geçilen kılavuz çizgisi sayısı hesaplanabilir.
Hızlı İteratif Negatif Geotaksi veya RING protokolü, yetişkin sineklerin hafifçe vurularak dibe itildikleri özel flakonlara yerleştirilmesini içerir. Meyve sinekleri içgüdüsel olarak yerçekimine karşı yukarı doğru tırmanacaktır. Görüntü analizi yoluyla, sineklerin kısa bir süre içinde ne kadar yukarı tırmanabildiği ölçülerek yetişkin lokomotor yeteneğinin derecesi belirlenebilir.
Daha karmaşık bir duyu rehberli davranışını değerlendirmek için kur yapma deneyi kullanılır ve bu işlem, cinsel deneyimi olmayan erkek ve dişilerin çiftleşme çarkı olarak bilinen özel bir düzeneğe yerleştirilmesiyle başlar. Deneysel oturumlar sırasında araştırmacılar, erkek sineğin çeşitli karakteristik kur yapma davranışları sergilediği süreyi kaydeder. Etkileyici bir şekilde, birkaç dakika içinde erkek sinek dişiye doğru yönelir, karnına vurur, kanadıyla bir şarkı üretir, dişiyi yalar ve nihayetinde çiftleşir.
Hep birlikte, bu analizler drosophila davranışına katkıda bulunan genetik ve çevresel faktörlerin aydınlatılmasına yardımcı olabilecek bir dizi güçlü davranışsal testi temsil etmektedir.
Ayın ilerleyen günlerinde JoVE, odağını egzersiz fizyolojisine kaydırıyor; burada Sao Paulo Üniversitesi'nden araştırmacılar, spor gibi karmaşık egzersizlerde çeşitli enerji sistemlerinin katkısını ortaya çıkarmak için tasarlanmış bir yöntemi sunuyorlar. Yazarlar, gösterimleri için örnek olarak judoyu seçmişlerdir. Dikkatle konumlandırılmış taşınabilir bir gaz analizörü kullanılarak, kontrollü koşullar altında judo egzersizi sırasında oksijen tüketimi ölçülebilir. Egzersiz öncesi, sırası ve sonrasındaki oksijen tüketimi karşılaştırılarak, aerobik ve alaktik anaerobik metabolizmanın enerji katkısı belirlenebilir. Judo sporunda laktik anaerobik metabolizmanın enerji katkısını belirlemek için, egzersiz öncesi ve sonrası kan alımı ve ardından elektrokimyasal analiz kullanılır. Oksijen tüketimi ve plazma laktat konsantrasyonu verileri birleştirildiğinde, favori bir judo atışı gibi karmaşık egzersizin belirli yönlerine farklı enerji sistemlerinin göreceli katkıları belirlenebilir.
Ayrıca Mart ayında JoVE, zebra balıklarında alkol maruziyetini içeren gelişimsel bir çalışmanın yayınlanmasını planlamaktadır. Embriyolar istenen zaman noktasına ulaştığında, alkol maruziyetinin gen ekspresyonu üzerindeki etkileri, mRNA saflaştırılıp qPCR yapılarak ve whole mount in situ hibridizasyon uygulanarak değerlendirilebilir. Işık mikroskobu kullanılarak somit şekli gibi morfolojik değişiklikler de değerlendirilebilir. Eğer ilgilenilen bir genin etanol maruziyeti ile azaldığı veya arttığı gözlemlenirse, alkol kaynaklı fenotipi kurtarmak amacıyla, yaklaşık iki hücreli evrede embriyoya ya capped mRNA ya da morfolino enjekte edilebilir. Yazarlarımız, gelişmekte olan zebra balıklarındaki alkol maruziyetinin, memelilerde gözlemlenene benzer morfolojik fenotipler ve gen ekspresyon profilleriyle sonuçlandığını göstermekte ve ayrıca mRNA enjeksiyonunun, alkolün gelişimsel anomaliler üzerindeki etkilerini geri çevirebildiğini kanıtlamaktadır.
JoVE, İmmünoloji ve Enfeksiyon bölümünde, UC Riverside'dan gelen bitki parazitolojisi üzerine bir deney sunmaktadır. Yazarlarımız özellikle, enfekte etmek ve beslenmek için ıslak toprakta serbestçe hareket eden zorunlu bir bitki paraziti olan kök ur nematodları ile ilgilenmektedir. İlk olarak, enfekte bitkilerin işlenmesi ve kök ur nematodlarının toplanmasına yönelik yöntemler açıklanmaktadır. Juvenil solucanlar yüksek enfektiviteye sahip bir evreye ulaştığında, toprağa inokülasyon yapılabilir. Daha sonra kökler boyanabilir ve bu parazitlerin oluşturduğu karakteristik kök urlarının varlığı açısından değerlendirilebilir. Yazarlarımız, saksı bitkileriyle yapılan deneylerin yanı sıra, kök ur analizlerinin şeffaf poşetlerde yetiştirilen bitkilerle nasıl yürütülebileceğini de göstermektedir; bu yöntem köklerin kolayca görülmesine olanak tanır ve küresel ürün kaybının her yıl %5'inden sorumlu olan bu yıkıcı enfeksiyonun varlığına yönelik yüksek kapasiteli taramaları kolaylaştırır.
JoVE'nin Mart ayı içeriğinin bu özeti, ay boyunca yayınlanması planlanan elliden fazla makaleden dördünü öne çıkarmaktadır. Diğer dikkat çekici deneyler arasında meyve sineklerinin antenindeki kokuyla tetiklenen yanıtların görüntülenmesi yöntemleri, meyvelerdeki uçucu bileşikleri analiz etmek için elektronik bir burun kullanımı ve makromoleküllerin canlı hücrelere iletilmesi için standart ofis ekipmanlarının yeniden amaçlandırılması yer almaktadır.