Journal of Visualized Experiments'ın (JoVE) Mart sayısı, Drosophila'nın lokomotor davranışını ölçmek için temel olarak önemli üç teste odaklanan bir makaleyle başlıyor. Spesifik olarak, bu testler arasında larva tarama testi (larva motor fonksiyonu için), RING testi (yetişkin motor fonksiyonu için) ve kur testi (koordinasyon ve duyusal yetenekleri değerlendirmek için) bulunur.
Larva tarama testi, larvaların toplanmasını ve yavru sineklerin ilgilenilen deneysel bir ilaca maruz bırakılmasını içerir. Hayvanlar daha sonra bir grafik kağıdının üzerine yerleştirilmiş bir petri kabına aktarılır ve dakikada geçilen kılavuz çizgilerinin sayısı hesaplanabilir.
Hızlı Yinelemeli Negatif Geotaksiler veya RING protokolü, yetişkin sineklerin hafifçe vurularak dibe zorlandıkları özel şişelere yerleştirilmesini içerir. Meyve sinekleri içgüdüsel olarak yerçekimine karşı yukarı doğru sürünürler. Görüntü analizi sayesinde, sineklerin kısa bir süre içinde ne kadar yukarı tırmanabileceği ölçülerek yetişkin lokomotor yeteneğinin derecesi belirlenebilir.
Daha karmaşık bir duyusal güdümlü davranışı değerlendirmek için, kur yapma testi kullanılır ve cinsel açıdan saf erkek ve dişileri çiftleşme çarkı olarak bilinen özel bir cihaza yerleştirerek başlar. Deneysel oturumlar sırasında, araştırmacılar erkek sineğin çeşitli karakteristik kur yapma davranışları sergilediği süreyi kaydederler. Etkileyici bir şekilde, birkaç dakika içinde, erkek sinek kendini dişiye doğru yönlendirecek, karnına dokunacak, kanadıyla bir şarkı üretecek, dişiyi yalayacak ve nihayetinde çiftleşecektir.
Birlikte ele alındığında, bu tahliller, drosophila davranışına katkıda bulunan genetik ve çevresel faktörleri aydınlatmaya yardımcı olabilecek bir dizi güçlü davranış testini temsil eder.
Ayın ilerleyen günlerinde JoVE, odağını Sau Paulo Üniversitesi'nden araştırmacıların çeşitli enerji sistemlerinin spor gibi karmaşık egzersizlere katkısını ortaya çıkarmak için tasarlanmış bir yöntem sunduğu egzersiz fizyolojisine kaydırıyor. Örnek olarak, yazarlarımız gösterileri için judoyu seçtiler. Dikkatlice yerleştirilmiş portatif bir gaz analizörü kullanılarak, kontrollü koşullar altında judo egzersizi sırasında oksijen tüketimi ölçülebilir. Egzersiz öncesi, sırası ve sonrasında oksijen tüketimini karşılaştırarak, aerobik ve alaktik anaerobik metabolizmanın enerji katkısı belirlenebilir. Egzersiz öncesi ve sonrası kan alımı, ardından elektrokimyasal analiz, laktik anaerobik metabolizmanın judo sporuna enerji katkısını belirlemek için kullanılır. Birleştirildiğinde, oksijen tüketimi ve plazma laktat konsantrasyonu verileri, farklı enerji sistemlerinin, kişinin en sevdiği judo atışı gibi karmaşık egzersizin belirli yönlerine göreceli katkılarını belirlemek için kullanılabilir.
Ayrıca Mart ayında JoVE, zebra balıklarında alkol maruziyetini içeren gelişimsel bir çalışmanın yayınlanmasını planlıyor. Embriyolar istenen zaman noktasına geliştikten sonra, alkole maruz kalmanın gen ekspresyonu üzerindeki etkileri, mRNA'nın saflaştırılması ve qPCR gerçekleştirilmesi ve tam montajlı in situ hibridizasyon ile değerlendirilebilir. Işık mikroskobu kullanılarak somit şekli gibi morfolojik değişiklikler de değerlendirilebilir. İlgilenilen bir genin etanol maruziyeti ile azaldığı veya arttığı gözlenirse, alkolün neden olduğu fenotipi kurtarmak için embriyoya, iki hücreli aşama civarında bir yerde, kapaklı mRNA veya morfolino enjekte edilebilir. Yazarlarımız, gelişmekte olan zebra balıklarında alkole maruz kalmanın, memelilerde gözlemlenene benzer morfolojik fenotipler ve gen ekspresyon profilleri ile sonuçlandığını ve ayrıca mRNA enjeksiyonunun alkolün gelişimsel anormallikler üzerindeki etkilerini tersine çevirebileceğini göstermektedir.
İmmünoloji ve Enfeksiyon'da JoVE, UC Riverside'dan bitki parazitolojisi üzerine bir deney sunuyor. Özellikle, yazarlarımız, bitkilerin köklerini enfekte etmek ve beslenmek için ıslak toprakta serbestçe hareket eden zorunlu bir bitki paraziti olan kök düğüm nematodu ile ilgilenmektedir. İlk olarak, enfekte olmuş bitkilerin işlenmesi ve kök ur nematodlarının toplanması için yöntemler açıklanmaktadır. Yavru solucanlar yüksek bulaşıcılığa sahip bir aşamaya geldiğinde, toprak aşılanabilir. Daha sonra kökler boyanabilir ve bu parazitler tarafından üretilen karakteristik kök düğümlerinin varlığı açısından değerlendirilebilir. Saksı bitkileri ile yapılan deneylere ek olarak, yazarlarımız, şeffaf torbalarda yetiştirilen bitkilerle kök düğüm tahlillerinin nasıl yapılabileceğini, köklerin kolay görüntülenmesine olanak tanıdığını ve yıllık küresel mahsul kaybının %5'ini oluşturan bu yıkıcı enfeksiyonun varlığı için yüksek verimli taramayı kolaylaştırdığını göstermektedir.
JoVE'nin Mart ayı içeriğinin bu özeti, ay içinde yayınlanması planlanan elliden fazla makaleden dördünü öne çıkarıyor. Diğer kayda değer deneyler, meyve sineklerinin antenindeki koku ile uyarılan tepkileri görüntüleme, meyveden uçucu bileşikleri analiz etmek için elektronik bir burun kullanma ve makromoleküllerin canlı hücrelere verilmesi için sıradan ofis ekipmanlarının yeniden kullanılması için yöntemleri içerir.