Hata Düzeltmesi: Timus Kültürlerinin Yeniden Agregasyonu

Özet

Reaggregate Thymus Cultures başlıklı çalışmada bir düzeltme yapılmıştır. Yayıncı hatası nedeniyle gözden geçirilmiş bir özet yeniden yayınlanmıştır.

Özet

Şu içeriğe bir düzeltme yapılmıştır: Reaggregate Thymus Cultures. Bir yayıncı hatası nedeniyle revize edilmiş bir özet yeniden yayınlanmıştır. Özet şu şekilde düzeltilmiştir:

Lenfoid dokulardaki stromal hücreler, hematopoetik hücrelerin migrasyonunu ve gelişimini kontrol ettiği düşünülen bir iskele sağlayan üç boyutlu yapılar şeklinde organize olmuştur. Önemli olan nokta, bu üç boyutlu organizasyonun korunmasının normal stromal hücre fonksiyonu için kritik görünmesidir; nitekim iki boyutlu monokatman kültürlerin genellikle lenfoid doku fonksiyonunun yalnızca münferit parçalarını destekleyebildiği gösterilmiştir. Timusta, kortikal ve medüller epitelyal hücrelerden oluşan kompleks ağlar, lenfoid progenitörlerin intrathymik T-hücresi gelişiminin çok aşamalı sürecinden geçerken hücrelerin toplanmasını, proliferasyonunu, diferansiyasyonunu ve sağkalımını kontrol eden bir çerçeve görevi görür. Timustaki münferit stromal kompartmanların fonksiyonel rolünü anlamak, timusun benlik/benlik dışı ayrımını nasıl gerçekleştirdiğini belirlemek açısından esastır. Burada, fetal dokuların enzimatik disagregasyonunun ardından in vitro ortamda bozulmamış üç boyutlu yapılara yeniden birleşme plastisitesinden yararlandığımız bir tekniği tanımlıyoruz. Fetal timus loblarının heterojen hücresel karışımlara disosiyasyonu ve ardından bunların münferit hücresel bileşenlere ayrılması, daha sonra bu istenen hücre tiplerinin belirlenmiş oranlarda üç boyutlu reagrega yapılara in vitro yeniden birleştirilmesiyle kombine edilerek, T-hücresi gelişiminin belirli yönlerinin tanımlanmış hücresel koşullar altında incelenmesi için bir fırsat sunar. (Bu makale, ilk olarak Methods in Molecular Biology 2007, Cilt 380 sayfa 185-196'da rapor edilen çalışmaya dayanmaktadır).

den

Timusta, rastgele yeniden düzenlenmiş T-hücresi reseptörü α- ve β-zincir genlerini eksprese eden immatür CD4+8+ timositler, timik stromal hücreler tarafından eksprese edilen öz-peptit/majör histokompatibilite kompleksi (MHC) moleküllerini tanıma yeteneklerine göre pozitif ve negatif seçilim olaylarından geçerler. İntratimik seçilim sırasında timik stromal hücrelerin rolünün in vivo analizi, erişkin timusun kararlı durumundaki timik mikroçevrenin hücresel karmaşıklığı ve belirli timik stromal kompartmanlarda gen ekspresyonunu manipüle etmek için uygun hedefleme stratejilerinin eksikliği nedeniyle zordur. Tanımlanmış stromal ve lenfoid hücrelerden üç boyutlu timus loblarının hazırlanmasına olanak tanıyan reaggregate timus organ kültürlerinin kullanımı aracılığıyla, timik mikroçevrenin in vitro ortamda kolaylıkla manipüle edilebileceğini göstermiş bulunmaktayız. Diğer in vitro sistemler T-hücresi gelişiminin bazı yönlerini desteklese de, reaggregate timus organ kültürü, MHC sınıf I ve II aracılı etkin timosit seçilim olaylarını destekleyebilen tek in vitro sistem olmayı sürdürmektedir ve bu nedenle timustaki pozitif ve negatif seçilimin hücresel ve moleküler düzenlemesini incelemek için etkili bir araç olarak kullanılabilir.

Protokol

Timus Kültürlerinin Yeniden Agregasyonu başlıklı çalışmada bir düzeltme yapılmıştır. Yayıncı kaynaklı bir hata nedeniyle revize edilmiş bir özet yeniden yayınlanmıştır. Özet şu şekilde düzeltilmiştir:

Lenfoid dokular içindeki stromal hücreler, hematopoetik hücrelerin göçünü ve gelişimini kontrol ettiği düşünülen bir iskele sağlayan üç boyutlu yapılar şeklinde organize olmuştur. Önemli bir nokta olarak, bu üç boyutlu organizasyonun korunması normal stromal hücre fonksiyonu için kritik görünmektedir; zira iki boyutlu tek tabaka kültürlerin genellikle lenfoid doku fonksiyonunun yalnızca münferit parçalarını destekleyebildiği gösterilmiştir. Timusta, kortikal ve medüller epitelyal hücrelerin oluşturduğu karmaşık ağlar, lenfoid progenitörlerin intrathymik T-hücresi gelişiminin çok aşamalı sürecinden geçerken; bunların hücreye çağrılması, proliferasyonu, diferansiyasyonu ve sağkalımını kontrol eden bir çerçeve görevi görür. Timustaki münferit stromal kompartmanların fonksiyonel rolünü anlamak, timusun benlik/benlik-dışı ayrımını nasıl gerçekleştirdiğini belirlemek açısından esastır. Burada, fetal dokuların enzimatik disaggregasyonunun ardından in vitro olarak bozulmamış üç boyutlu yapılara yeniden birleşme plastisitesinden yararlandığımız bir tekniği tanımlıyoruz. Fetal timus loblarının heterojen hücresel karışımlara ayrıştırılması ve ardından bunların münferit hücresel bileşenlere ayrılması, istenen bu hücre tiplerinin tanımlanmış oranlarda üç boyutlu reaggregate yapılara in vitro yeniden birleştirilmesi ile kombine edilerek, T-hücresi gelişiminin belirli yönlerinin tanımlanmış hücresel koşullar altında incelenmesi için bir fırsat sunar. (Bu makale, ilk olarak Methods in Molecular Biology 2007, Cilt 380, sayfalar 185-196'da rapor edilen çalışmaya dayanmaktadır).

den

Timusta, rastgele yeniden düzenlenmiş T-hücresi reseptörü α- ve b-zincir genlerini eksprese eden olgunlaşmamış CD4+8+ timositler, timik stromal hücreler tarafından eksprese edilen öz-peptit/majör histokompatibilite kompleksi (MHC) moleküllerini tanıma yeteneklerine bağlı olarak pozitif ve negatif seçilim olaylarından geçerler. İntratimik seçilim sırasında timik stromal hücrelerin rolünün in vivo analizi, erişkin timusun durağan durumundaki timik mikroçevrenin hücresel karmaşıklığı ve belirli timik stromal kompartmanlarda gen ekspresyonunu manipüle etmek için uygun hedefleme stratejilerinin eksikliği nedeniyle zordur. Belirlenmiş stromal ve lenfoid hücrelerden üç boyutlu timus loblarının hazırlanmasına olanak tanıyan reaggregate timus organ kültürlerinin kullanımı aracılığıyla, timik mikroçevrenin in vitro olarak kolayca manipüle edilebileceğini göstermiş bulunmaktayız. Diğer in vitro sistemler T-hücresi gelişiminin bazı yönlerini desteklese de, reaggregate timus organ kültürü, MHC sınıf I ve II aracılı etkin timosit seçilim olaylarını destekleyebilen tek in vitro sistem olmayı sürdürmektedir ve bu nedenle timustaki pozitif ve negatif seçilimin hücresel ve moleküler düzenlemesini incelemek için etkili bir araç olarak kullanılabilir.