Yöntem makalesi

: Nisan 2012 vallahi Bu Ay

11.2K görüntüleme

DOI:

10.3791/4421

1 Nisan 2012

Bu makalede

Özet

Journal of Visualized Experiments'ın (JoVE) Nisan sayısında, Ohio Miami Üniversitesi'nden Antarktika'da kalıcı olarak buzla kaplı tuzlu bir göl olan Bonney Gölü'ne kadar bir laboratuvarı takip eden bir makale yer alıyor. Işık, sıcaklık ve karbon kaynaklarının çok az olduğu buzun altındaki zorlu koşullarda çok az organizma hayatta kalabilir. Protistler olarak adlandırılan tek hücreli mikroorganizmalar, Bonney Gölü'nün altında yaşayan ana mikrop sınıfıdır ve fotosentez yoluyla karbonu yaşam döngüsüne getirebilirler.

Uygun örnekleme alanını belirledikten sonra, yazarlarımız gölün kimyasal olarak tabakalaşmış su sütunu içindeki çeşitli derinliklerden örnekler toplayabilmek için buzu deler ve eritir. Numuneler toplandıktan sonra filtrasyon ve stabilizasyon için bir saha laboratuvarına götürülür. İşlemden sonra, su örneğinde bulunan mikroplar daha fazla deney için kültürlenir. Örneğin, yazarlarımız zenginleştirme kültürlerinin fotosentetik aktiviteyi koruduğunu ve gelecekteki deneylerin protist fizyolojisinin yanı sıra bu tür organizmaların küresel jeokimyasal döngüyü nasıl etkileyebileceğini daha iyi anlamaya yardımcı olması gerektiğini göstermektedir.

Klinik ve Translasyonel Tıp'ta JoVE, jinekolojik tümörlerin tedavisi için dikkatini stereotaktik vücut radyoterapisine veya SBRT'ye çevirir. SBRT, tümörleri biyolojik olarak etkisiz hale getirmek için robotik bir kol üzerine monte edilmiş doğrusal bir hızlandırıcı tarafından sağlanan radyasyona dayanan minimal invaziv bir kanser tedavisi şeklidir.

Case Medical Center'dan yazarlarımız, bilgisayarlı tomografi görüntülemeye dayalı olarak altın yumuşak doku referans belirteçlerinin kanser hedefinin etrafına çeşitli derinliklerde nasıl yerleştirildiğini açıklıyor. Bir tedavi planlama oturumu sırasında, BT ve PET görüntüleri alınır ve daha sonra birlikte kaydedilir. Bu görüntülerin rehberliğinde, hem radyasyon hem de jinekolojik onkologlar, tedavi sırasında hedeflenecek kanser hacimlerini ve zarar görmeden bırakılması gereken normal yapıları çevreleyen konturu belirler. Tedavinin başlangıcında, bir hedef lokalizasyon sistemi, çapraz düzlem radyografik görüntüleme yoluyla referans belirteçlerini tespit eder ve işaretleyici konumu daha önce elde edilen görüntüleme verileriyle karşılaştırılır.

Tedavi sırasında, ışık yayan diyotlar, radyasyonun doğru bir şekilde verilebilmesi için solunum paternlerini referans belirteçlerinin konumuyla ilişkilendirmek için hastanın hareketini izler. Hasta immobilizasyonu ile ilişkili komplikasyonların üstesinden gelen yazarlarımız, stereotaksik vücut radyoterapisi prosedürlerinin, yakındaki yapılara dozu sınırlarken hedef hacme tam olarak radyasyon verebileceğini göstermektedir.

Biyomühendislik bölümümüzde JoVE, ipekböceği kozalarından biyouyumlu substratlar yapmayı içeren bir makale sunuyor. İlk olarak, kozalar kontaminasyon açısından taranır ve ipek özütü üretilecek şekilde işlenir. Ekstrakt, yüzeyinde kuruyan ipek filmde bir desen oluşturmak için tasarlanmış bir PDMS kalıbının üzerine yerleştirilir. Kuruduktan sonra ipek film, filmi şeffaf ve mikroskopi için mükemmel hale getiren su tavlama olarak adlandırılan bir işleme tabi tutulur. Filmler üzerinde hücre tohumlamanın ardından yazarlarımız, mikro desenli ipek substrat üzerinde hücre göçünü izlemenin daha geleneksel doku kültürü yüzeylerinde olduğu kadar kolay olduğunu gösteriyor. İpek filmlerin biyouyumluluğunun yanı sıra kimyasal ve yapısal olarak modifiye edilme potansiyelleri, onları tıbbi cihaz tasarımı gibi in vivo uygulamalar için çekici aday malzemeler haline getirmektedir.

Şaşırtıcı bir şekilde, birincil nöronal kültür, İmmünoloji ve Enfeksiyon bölümümüze giriyor, çünkü bu Nisan ayında JoVE, herpes simpleks virüsü gecikmesini ve aktivasyonunu incelemek için kullanılan yenilikçi bir birincil sempatik nöron kültürü sistemini belgeliyor.

Periferik nöronlar, reaktivasyon olaylarının kaynağı olan herpes virüsü için rezervuar görevi görür. Periferik bir nöron kültürü oluşturmak için, superior servikal gangliyonlar embriyonik farelerden izole edilir ve sindirim ve ayrışmayı takiben 96 oyuklu plakada kaplanır. İn vitro olarak yaklaşık 6. günde, bir viral-GFP füzyon proteinini kodlayan herpes virüsleri, bir litik replikasyon inhibitörü ile birlikte hücrelere eklenir. İnhibitörün çekilmesi üzerine, latent virüs yeniden aktive olacak ve GFP ekspresyonu floresan mikroskobu ile gözlemlenebilecektir. GFP floresan sergileyen kuyucukların sayısını sayarak, küçük moleküllerin veya gen susturucu oligonükleotidlerin viral reaktivasyonu baskılama veya indükleme yeteneği test edilebilir, bu da bu testi HSV-1 enfeksiyonunu yönetmeye yardımcı olacak yeni terapötikleri ortaya çıkarmak için potansiyel bir araç haline getirir.

Bu kısa özet, JoVE'nin Nisan ayında yayınlayacağı elli makaleden yalnızca dördünü açıklıyor. Diğer dikkate değer sürümler arasında, x-ışını bilgisayarlı tomografi kullanılarak sıçanlarda obezitenin ölçülmesi, zebra balığı kalbinde miyokard enfarktüsünün indüklenmesi ve eksize edilen omuriliğin retrograd etiketlenmesi için yöntemler yer alır. Bizi izlemeye devam edin.

Açıklamalar

Çıkar çatışması ilan etti.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

University Of MiamiLake BonneyAntarcticaProtistsPhotosynthesisMicrobial CulturesStereotactic Body RadiotherapySBRTCancer TreatmentFiducial MarkersCT ImagingPET ImagingRadiation TherapyPatient Tracking

İlgili makaleler