$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Şekil 4, Şekil 3 'de gösterilen örnek bir kesim elde edilen temsili bir kesitini göstermektedir. Bölüm yukarıda tarif edilen protokollere göre, H & E ile 5 um kalınlıkta ve lekeli de kesildi. Örnek şerit brüt şekli minimal diferansiyel doku eserler (Şekil 4A) ile korunur. Yeşil boya kırmızı (Şekil 4B) daha esnek olmasına rağmen her iki boya işaretleri, sklera üzerinde görünüyordu. Retina katmanları artifactually müstakil değildi ve retina morfolojisi (Şekil 4C) korunur. Dizideki elektrotların bulunduğu yere karşılık gelen boya işaretler bitişik, retina dokusu, kolayca tespit edilebilir.
Şekil 5 doku bölümleri temsilcisi özel boyama ve immünhistokimyasal mevcut protokole göre hazırlanan gösterir. 5 captio bkz.özel lekeleri ve kullanımı yapılan değişiklikler hakkında daha fazla ayrıntı için n ve Yardımcı Malzemeler. Post-değişiklik, bu lekeleri ve immünhistokimya belirlenmiş standartlara eşitti - patolog tarafından doğrulanmadı gibi.
| Primer antikor ve titre tipi (parantez içerisinde) | GFAP (1:1500) | NF200 (1:100) | GS (1:100) |
| Ikincil antikor ve titre tipi (parantez içerisinde) | Alexa Fluor 594 | Alexa Fluor 488 | Alexa Fluor 488 |
| Ikincil antikor inkübasyon süresi | 1 saat | 2 saat | 45 dakika |
Tablo 1. Antikor Tipi, Titre ve Etiketleme Süresi.
Şekil 1. Suprachoroidal Prototip Elektrod Dizisi. Bir klinik sınıf kalıp dizinin A) Makro fotoğraf. B) el yapımı klinik öncesi dizinin photomicrograph.
Şekil 2. Eski Retina histolojisi. Standart histolojik yöntemler bu hazırlamak için kullanıldı, H & E ile boyanmış, bir suprakoroidal elektrot dizisi ile implante edilen bir göz bölümleri. A) 'deki elektrot dizisinde, boşluğun (bir yıldız ile gösterilen) ile bir dik kesit. Retina dış göz dokusundan ayrılır. Bu implante bölgesi (ok) altında özellikle belirgindir. Bu dizinin her bir elektrot bitişik retina kısmının belirlemek mümkün değildir. Ölçek çubuğu = 1 mm. B) Masası'ndaki kutulu bölgenin daha yüksek büyütme bir. Retina laye içinde, düzenli aralıklı, çeşitli eserler vardırRS (oklar) yanı sıra, tapetal katmanı (kedi gözü içinde yansıtıcı tabaka) dan büyük dekolmanı. Ölçek çubuğu = 100 mikron. C) paneli B kutulu bölgenin daha yüksek büyütme. Ok kopma olarak, in vivo ya da travma patolojisinde neden olmanın aksine, işleme bölgesinin yan etki, bir artefakt olduğunu düşündüren, fotoreseptör dış bölümler, hem de sağlam kalır pigmenter epitel olduğuna işaret etmektedir. Ölçek çubuğu = 20 mikron.
Şekil 3,. Elektrot-Bitişik Doku. AD lokalizasyonu ve diseksiyonu) yerinde bir suprakoroidal elektrot dizi ile bir enükleasyon göz Yüksek dinamik aralık makro fotoğraf,. A) Mesaj Davidson'un fiksatif ile sabit ve önce dizi kaldırılması, saydam sklera görselleştirme sağlardizi içinde özel elektrotlar (tek örnek ok ile gösterilen). B) elektrotlar önceden tanımlanmış bir boya renk ile işaretlenmiştir. C) anatomik düzenli aralıklarla Boya işaretler deneyler arasında tutarlılığı korumak için kullanılır. D) çıkarılması üzerine dizi, göz örnek şeritler halinde elle disseke edilir. Renkli oklar skleraya elektrot komşu bölgelerde iki göstermektedir. Sarı kesikli çizgi Kesit düzlemi gösterir. E) Panel E gelen agar-embed örnek şerit, köpük biyopsi yastıkları tarafından desteklenen kesip ve bir gömme kaset yerleştirilen bir agar bloğu. F içinde gömülü örnek şerit Makro-fotoğraf) Makro fotoğraf işlem sırasında bölümün hareketi en aza indirmek için.
Şekil 4. Yeni Retina Histoloji. trong> elektrot cep içeren Yukarıdaki örnek şerit (Şekil 3 boyutlu), H & E. A) Yeşil ve kırmızı boyalı bölgeleri (Şekil 3D aynı oklar, gösterilen) ile 5 mikron ve boyandı parafin, kesitli oldu görülebilir bir bölüm Şekil 3D sarı kesikli çizgi düzeyinde alınan. Ölçek çubuğu = 1,000 mikron. Retina dizi cep altında ne de uzaktan ne, müstakil değildir. B) Masası'ndan kutulu bölge görünür kırmızı ve yeşil boya ile bir oklarla gösterilen ve sağlam retina boyunca. Ölçek çubuğu = 500 mikron. Yeşil boya bitişik sağlam, ekli, retina gösteren Panel B'den C) kutulu bölge,. Ölçek çubuğu = 50 mikron. Boya yerini bir elektrot olarak görev varsa, biz güvenle elektrik stimülasyonu neden, hasar komşu retina dokusunun değerlendirmek gösterir bilerek.
ve_content "fo: keep-together.within-page =" her zaman ">
Şekil 5,. Özel lekeleri ve immun kullanılarak değiştirilebilir retina cytohistochemistry örnekleri. Olarak ana protokol metinde açıklanan standart formalin ile tespit yöntemleri, alışılmış boyama protokolleri için gerekli değişiklikler, aksine Davidson sabitleştirici, kullanımı. Patologlar bu değişiklikler eşdeğer boyama yol açtığını doğruladı.
A) H &e; pembe eozin leke hücre sitoplazma, kollajen ve destek doku çeşitli tonları.
B) LFB lekeleri miyelin mavi cresyl menekşe counterstain mor hematoksilen lekeleri hücre çekirdekleri kullanılabilir iken ise . perikaryon mavi içinde Nissl organları boyama ve hücreleri çevreleyen uydu hücreleri vurgulayarak ganglion hücreleri belirlemek
C) Masson trikrom mavi, Biebrich kırmızı-asit fuksin solüsyonu lekeleri kas fiyle kırmızı, anilin mavi lekeler kollajen, bu durumda sklera, mavi
D) PAS ise,.. hematoksilen hücre çekirdekleri mor
E) Perls 'Prusya mavisi counterstains ise bazal membran ve bağ dokusu bileşenleri glikoprotein bileşenleri, mor lekeli; nötr kırmızı leke renklerin yanı sıra kırmızı lizozomlar ise kanama yerinde, demir komplekslerinin bozulmuş kırmızı kan hücreleri ve açığa çıkan hemosiderin oluşumu bir mor renk üretir
F) GS;. Müller hücrelerinde
13 fazlası Bu nörotransmitter aşağılayıcı enzim (yeşil .), iç nükleer tabaka ve iç sınırlayıcı membranı
G), NF-200 oluşturan Müller hücre endfeet olarak Müller hücre yapıları ile her iki yönde uzanan görülebilir, bu ağır zincir iskelet proteini (yeşil) hücre soma ve işlemlerde bulunan , nöronlar
14,15 yapısını korumak için diğer nörofilament ile çapraz bağlar. Ganglionkedi retinada iç nükleer tabaka dış yatılı bulunan yatay hücrelerin aksonları sahip olmuştur hücreleri ve bunların aksonlar, ganglion hücre tabakası ve sinir lifi görülebilir. . DAPI (mavi) ile counterstaining retina katmanlarının görselleştirme
H) GFAP sağlar, bu iskelet protein (kırmızı), gliozis
16 sırasında Müller hücreleri ve astrositlerde çoğaldı için iç ile ince uzantıları oluşturan Müller hücreleri ile sinir lifi tabakası astar görülebilir dış retina katmanları. DAPI ile counterstaining (mavi) retina tabakalarının görselleştirme sağlar. Tüm panellerde ölçek çubuğu = 50 mikron. Iç retina her görüntünün üst kısmında gösterilir; dış retina subscleral reaksiyon gösterir Panel
E, hariç her görüntünün alt kısmında gösterilir.