Fare kalbinin MRG ve PET görüntülemesinin nasıl yapılacağını açıklıyoruz. Protokol, miyokard enfarktüsü ve kalp yetmezliği modellerinde tedavi etkinliğini değerlendirmek için uyarlanmıştır.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Fare kalbinin MRG ve PET görüntülemesinin nasıl yapılacağını açıklıyoruz. Protokol, miyokard enfarktüsü ve kalp yetmezliği modellerinde tedavi etkinliğini değerlendirmek için uyarlanmıştır.
Miyokard enfarktüsü, Batı dünyasında önde gelen ölüm nedenlerinden biridir. Fare kalbinin insan kalbine benzerliği, onu yeni terapötik stratejileri test etmek için ideal bir model haline getirmiştir.
in vivo manyetik rezonans görüntüleme (MRG), doğru fonksiyonel değerlendirme için kullanılabilecek net anatomik ayrıntılarla noninvaziv olarak kalbin mükemmel görüntülerini verir. Kontrast maddeler, doku canlılığının temel ölçümlerini sağlayabilir, ancak bunlar spesifik değildir. Pozitron emisyon tomografisi (PET), moleküler görüntüleme için oldukça spesifik olan, ancak MRG'nin anatomik detayından yoksun olan tamamlayıcı bir tekniktir. Birlikte kullanıldığında, bu teknikler hastalıkta kalbin değerlendirilmesi ve tedaviyi takiben iyileşmesi için hassas, spesifik ve nicel bir araç sunar.
Bu yazıda, bu yöntemlerin akut miyokard enfarktüsünün fare modellerinde nasıl uygulandığını açıklıyoruz. Burada anlatılan prosedürler, varsayılan koruyucu ilaç tedavilerinin değerlendirilmesi için tasarlanmıştır. Geç gadolinyum tutulumu ile sistolik fonksiyon ve enfarktüs boyutunu ölçmek için MRG, enfarktüslü bölgedeki metabolik fonksiyonu değerlendirmek için florodeoksiglukoz (FDG) ile PET kullandık. Makale, dilim planlama, doğru geçitleme, ilaç dağıtımı, görüntülerin segmentasyonu ve çok modlu ortak kayıt gibi pratik yönlere odaklanmaktadır. Burada sunulan yöntemler, yüksek bir verim sağlayarak iyi bir tekrarlanabilirlik ve doğruluk sağlar.
Preklinik çalışmalarda miyokard enfarktüsü (MI) için yeni tedavi stratejilerinin etkinliğini ölçmek için, akut evrenin yanı sıra uzun vadeli sonucun değerlendirilmesi gerekmektedir1. Histopatoloji, intrakardiyak kateterler2 ve ex vivo kalp modelleri3 gibi yöntemler, farelerde klinik öncesi çalışmalar için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bununla birlikte, ex vivo veya yüksek invaziv yöntemlerle tedaviyi takip etmek mümkün değildir. İn vivo manyetik rezonans görüntüleme (MRG) ve pozitron emisyon tomografisi (PET) gibi noninvaziv ölçüm teknikleri, tek deneklerde hastalık evrelemesi için uzunlamasına deneysel tasarımlara izin verir. Sine-MRG, sol ventrikül kütlesi (LVM), ejeksiyon fraksiyonu (EF) ve kardiyak debi (CO) gibi global fonksiyonel parametreleri elde etmek için kullanılır. Ek olarak, bir gadolinyum kontrast maddesinin enjeksiyonundan sonra, enfarktüste bozulmuş perfüzyon ve yıkama nedeniyle, doku canlılığı geç gadolinyum büyütme (LGE) MRG ile değerlendirilebilir. Ek olarak, PET, doku metabolizmasını değerlendirmek için radyoaktif işaretli moleküllerin hassas bir ölçümünü sunar. Bu tekniklerin yüksek doğruluğu, MI'yı hedefleyen yeni ilaçların test edilmesi için gereken hayvan sayısında önemli azalmalara izin verir.
PET ve MRI prosedürleri söz konusudur ve dikkatlice tasarlanmış bir protokol olmadan tekrarlanabilirliği sürdürmek zordur. Klinikte hastalar için oluşturulan prosedürler, önemli ölçüde daha hızlı kalp atış hızları ve kalbin daha küçük boyutları nedeniyle farelerde kullanım için önemli değişiklikler gerektirir4. Hem başlangıçta hem de indüklenen yaralanmaya yanıt olarak bireysel denekler arasında geniş farklılıklar vardır, bu nedenle tedavi etkinliğini belirlemek için önemli sayıda fareye ihtiyaç vardır.
Bu raporda, fare kalbinin sıralı PET/MRI görüntülemesi için yöntemimizi açıklıyoruz. Her iki modalite de kuyruk damarı yoluyla verilen intravenöz kontrast maddeleri kullanır. MRG, önceki çalışmamızda açıklandığı gibi LGE için optimal bir protokol ile Cine-MRI5 ile standart değerlendirmeden oluşur6. Tüm MRG prosedürü 30 dakika sürer. Cihazlarımızın yatakları için tutarlı bağlantı parçaları elde ettik, böylece hayvanı makineler arasında aynı izleme ve anestezik verme aparatına sahip bir platform üzerinde transfer etmek mümkün oluyor. PET taraması, tarama başlatıldıktan sonra yerinde enjeksiyonla 45 dakika sürer. Son adım, kokaydı takiben hem MRI hem de PET görüntülerinden parametrelerin ölçülmesidir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu çalışmanın tüm bileşenleri, 1986 tarihli Birleşik Krallık Hayvanlar (Bilimsel Prosedürler) Yasası'na uygun olarak ve Cambridge Üniversitesi Etik İnceleme Paneli'nin onayı ile gerçekleştirilmiştir.
1. Hayvan Hazırlama
2. Hayvan Konumlandırma ve İzleme
3. MRI
4. Geç Gadolinyum Geliştirmesi
5. PET Görüntüleme
6. MRG Segmentasyonu
7. PET Analizi ve MRG ile Kokayıt
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
MRI kullanmanın avantajlarından biri, hastalığı evrelemek için boylamsal bir tasarımın kullanılabilmesidir. Etki süreci bilinmeyebileceği için bu durum, özellikle yeni bileşiklerin değerlendirilmesinde önemlidir. Aynı hayvandaki hastalık ilerlemesine bağlı kalp hacimlerindeki değişimler Şekil 4'te gösterilmiştir. Şekil, miyokard enfarktüsü sonrası yeniden şekillenmenin etkilerini açıkça göstermektedir.
Doğru kesit geometrisi, bir kardiyak MRI deneyinin başarısı için kritik öne...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
PET/MRG, miyokard enfarktüsünün fare modellerinde sistolik fonksiyonun, doku canlılığının ve spesifik metabolik belirteçlerin noninvaziv ve uzunlamasına değerlendirilmesi için kapsamlı bir ölçüm yöntemidir. Burada, aynı yatağın sistemler arasında aktarılmasıyla birlikte kaydın basitleştirildiği, MRI ve PET'in sırayla gerçekleştirilmesi için bir protokol tanımladık. Klinik sistem11 üreticileri tarafindan da benimsenen bu strateji, kombine bir PET/MRI tarayicisi gerektirmez ve standart ekipmanla gerçeklestirileb...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklanacak bir şey yok.
İngiliz Kalp Vakfı'ndan TK'ye ve Birleşik Krallık Tıbbi Araştırma Konseyi'ne GB'ye lisansüstü araştırma öğrenciliği için fon sağladıkları için minnettarız.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Gadovist | Bayer Schering Pharma | PL 00010/0535 | |
| FDG | IBA Moleküler Ekipman | ||
| Bruker BioSpec 47/40 | Bruker | ||
| Bruker fare yatağı | Bruker | Bu yatak, anestezi uygulaması ve süpürme için hortum içerir. | |
| 12 cm çaplı kuş kafesi vericisi | Bruker | T5346 | |
| 2 cm çaplı yüzey bobini alıcısı | Bruker | T7027 | |
| Red Dot Yenidoğan izleme elektrotları | 3M | P/N: 2330 | |
| İzleme ekipmanı | SA Sistemleri | İzleme kiti, sıcaklık ölçümleri için solunum yastığı ve rektal prob içerir. | |
| Anestezi ekipmanları | Genel Anestezi Hizmetleri | ||
| İndüksiyon kutusu | Vet Tech Solutions Ltd | ||
| Cambridge bölünmüş mıknatıslı PET/MRI tarayıcı | Cambridge | PET'i gerçekleştirmek için özel yapım bir PET/MRI tarayıcı22 kullanıldı, PET performansı bir F120 mikropet tarayıcıya benzer şekilde kullanıldı23 | |
| Segment yazılımı | Medviso, Lund Üniversitesi | Ücretsiz olarak sunulan | |
| SPM-mouse | Cambridge | Ücretsiz olarak kullanılabilir |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.