Sistematik Analizi In Vitro Hücre Rolling

Oren Levy; Priya Anandakumaran; Jessica Ngai; Rohit Karnik; Jeffrey M. Karp

doi:10.3791/50866

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Sistematik Analizi In Vitro Hücre Rolling

11.5K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/50866

⸱

16 Ekim 2013

Oren Levy¹^,²^,³^,⁴^,⁵ , Priya Anandakumaran¹^,²^,³^,⁴^,⁵ , Jessica Ngai¹^,²^,³^,⁴^,⁵ , Rohit Karnik⁶ , Jeffrey M. Karp¹^,²^,³^,⁴^,⁵

¹Division of Biomedical Engineering, Department of Medicine, Brigham and Women's Hospital, ²Center for Regenerative Therapeutics, Brigham and Women's Hospital, ³Harvard Medical School, Harvard University, ⁴Harvard Stem Cell Institute, Harvard University, ⁵Harvard-MIT Division of Health Sciences and Technology, ⁶Department of Mechanical Engineering, Massachusetts Institute of Technology

Bu makalede

Özet

Bu çalışma, önemli fizyolojik olarak ilgili kesme akımı altında, hücre haddeleme çalışmalar artırıp, çok oyuklu bir plaka mikroakışkan sistemi kullanılır. Silsilesini ve hastalarda hücre ekzojen popülasyonlarının sistemik olarak uygulanmasını takiben hücre hedeflemesi önemini homing çok adımlı, hücre haddeleme önemi göz önüne alındığında, bu sistem, hücre bazlı tedaviyi geliştirmek için bir tarama platform olarak potansiyel sunmaktadır.

Özet

Hücre bazlı tedavisi için önemli bir sorun, sistemik damar içine veya intra-arteryel infüzyonla, aşağıdaki ilgi dokularına yüksek verim ile yaşayabilir hücrelerin büyük bir miktarda hedef yetersizliğidir. Sonuç olarak, hücre homing artan anda hücre tedavisini geliştirmek için bir strateji olarak incelenmiştir. Vasküler endotel yuvarlanan hücre hücre hedeflemesi sürecinde önemli bir adımdır ve bir paralel plaka akış odası (PPFC) kullanılarak in-vitro olarak tanınacak. Ancak bu zayıf kontrol edilen akış koşulları, son derece can sıkıcı, düşük akış tahlilidir. Bunun yerine, tam olarak kontrol edilen, fizyolojik olarak ilgili kesme akışı altında ^1,2 daha yüksek bir verim içinde hücresel yuvarlanma özellikleri çalışma sağlayan bir çok oyuklu bir plaka mikroakışkan sistemi kullanılır. Bu yazıda, P-ve E-selectin kaplı yüzeylerde hem de hücre tek-kaplı yüzeylerde HL-60 (insan promiyelositik lösemi) hücrelerinin yuvarlanma özelliklerini readil olabilir göstermeky incelenmiştir. Daha iltihaplı koşulların simüle edilmesi için, mikroakışkan kanal yüzeyi daha sonra önemli ölçüde dinamik koşullar altında HL-60 hücreleri ile etkileşimleri, artan tümör nekroz faktörü-α (TNF-α) ile aktive edilmiş endotel hücreleri (EC) ile kaplandı. Geliştirilmiş verimlilik ve bu hızları haddeleme ve yolunu haddeleme gibi parametrelerin hızlı analizi izin verir entegre çoklu parametre yazılımı analizi platformu, in-vitro hücre haddeleme özelliklerini değerlendirmek için önemli bir avantaj oluşturmaktadır. Hücre haddeleme ve homing darbe için tasarlanmış mühendislik yaklaşımları, hızlı ve doğru analiz sağlayan, bu platform önceden eksojen hücre tabanlı tedavi yardımcı olabilir.

Giriş

Hücre tabanlı tedavinin başarılı klinik çeviride önemli zorluklardan biri verimsiz dağıtım veya arzu sitelere ^3,4 sistemik aşılanmış hücrelerin hedef olduğunu. Sonuç olarak, hücre homing geliştirmek için yaklaşımlar için bir arayışlar sürmektedir, ve özellikle de, hücre terapisi geliştirmek için bir strateji olarak, haddeleme hücre. Kan damarları üzerinde yuvarlanan Cep klasik hastalık sitelerine ⁵ alınsın lökositler için tanımlanan hücre homing kaskad, önemli bir adımdır. Bu adım, endotel selektinler arasındaki spesifik etkileşimlere tarafından yönetilir örneğin, P-selektin ve E-(P-ve E-sel) ve lökositlerin ^5,6 yüzeyinde kon....