Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Fareler ve Reeves 'munçağı Deer için Süt Toplama Yöntemleri

20.1K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/51007

⸱

19 Temmuz 2014

Bu makalede

Özet

Hayvan modellerinden süt toplanması çeşitli araştırma yollarını kolaylaştırır: pasif bağışıklığı anlamak, dikey bulaşmadan sorumlu patojenleri tanımlamak ve hatta transgenik farelerin kullanımı yoluyla insan anne sütünde bulunan proteinlerin ticari üretimi. Burada farelerde ve Reeves'in munçak geyiğinde süt toplama için basit bir yöntem gösteriyoruz.

Özet

Hayvan modelleri, bir patojenin doğal konakçısında normalde pratik olmadığı düşünülen şeyleri gerçekleştirmek için araştırma laboratuvarlarında yaygın olarak kullanılır. Hayvanlardan süt toplama, bilim insanlarına dikey iletim, pasif bağışıklık, meme bezi biyolojisi ve emzirme dahil olmak üzere üremenin birçok yönünü inceleme fırsatı verir. Bu çalışmalar için yeterli miktarda süt elde etmek, özellikle küçük hayvan modellerinden zorlu bir iştir. Burada, farelerde ve Reeves'in munçak geyiğinde süt toplama için özel ekipman veya kapsamlı eğitim gerektirmeyen ucuz ve kolay bir yöntemi gösteriyoruz. Bu özel yöntem iki araştırmacı gerektirir: biri sütü sağmak ve hayvanı stabilize etmek, diğeri ise sütü bir Muntjac veya fare modelinden uygun bir kapta toplamak. Fare modeli ayrıca bir P-200 pipetleyici ve ilgili pipet uçlarının kullanılmasını gerektirir. Bu yöntem düşük maliyetli ve gerçekleştirilmesi nispeten kolay olsa da, araştırmacılara optimal süt toplanması için hayvanın uyuşturulmasının gerekli olduğu konusunda bilgilendirilmelidir.

Giriş

Hayvan modelleri in vitro analizi ile elde edilemez hastalığı patolojisi içgörü sağlayabilir. En etkili sonuçlar elde etmek için, yakından hastalığın ve ilgili türler ile ilgili bir hayvan modeli kullanmak önemlidir. Örneğin, Reeves 'muntjac (Muntiacus reevesi), cervid prion proteini (CerTgPrP) 3 eksprese eden bir küçük Asya geyik 1,2, ve transjenik farenin cervid türleri için yararlı hayvan modelleridir. Her iki tür de yıl boyunca üreme izin polyestrous ve bu nedenle gebelikle ilgili dokular ve sıvılar için tutarlı bir kaynak cervid biyolojide belirli mekanizmaları incelemek için. Süt çalışmalar insanlarda daha hayvan mode....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

1.. Fare Süt Sağım Protokol

Bu protokol açıklanan yöntemler IACUC tarafından onaylanmıştır.

Offspring gelen Barajı'nın 1. Ayırma

  1. Sağılan edilecek baraj seçin. 8-12 gün toplama 21 gün için herhangi bir zaman noktası sonrası doğum kadar mümkün olan maksimal süt toplama-olsa sağlamak için doğumu yayınlamak 4 veya daha fazla yavru bir çöp ile bir baraj seçin.
  2. Sağımdan önce onu çöp en az 2 saat mesafede baraj ayırın.
    Not: Belirli bir zaman diliminde birden fazla baraj süt için tek arzusu Should, yeterli yiyecek ve su kaynağı ile aynı kafeste ayrı baraj evine kabul edilebilir.
....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Fare

Deneylerde, biz birkaç değişkenlere bağlı bir laboratuvar faresi süt yaklaşık 100-400 ul toplamak mümkün olduğunu tespit ettik. Bu değişkenler) toplanması için ayrılan süreyi, 2) oksitosin dozu, 1 içerir 3) baraj şu anda bakım ve zaman sonrası doğumun 4) miktarı kaç yavrular. Çalışmalarımız barajlar, en az 2 saat boyunca yavrularına ayrılır, en yüksek verimi elde edildiğini göstermiştir ve bir saat için en az 45 dakika sağma için, fare başına bir kenara ayrılmaktadır. E.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Fare

1 dahil olmak üzere bir fare süt toplama dikkate alınması gereken çeşitli faktörler,) toplanması için ayrılan süreyi, oksitosin 2) doz, 3) baraj şu anda hemşirelik ve 4) miktarı kaç yavrular vardır toplama sırasında doğumdan bu yana geçen zaman. Kurallar olarak önceki çalışmaları kullanarak, süt verimi için koşulları optimize etmek için yola çıktı.

Önceki araştırmalar, doğrudan çöp boyutu 8 ile süt verimi korelasyon vardır. Ne yaz.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Teşekkürler

Bu deneyler NIH hibe #RAI093634A tarafından finanse edildi. Munçak sağımındaki yardımları için DVM, PhD'den Jenny Powers'a büyük şükranlarımızı sunarız.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Malzemeler— Fare
Ketamini (KetaVed 100 mg / ml) (doz: 80-100 mg / kg)MWI / Vedco011075
Ksilazin (TranquiVed 100 mg / ml) (doz: 5-10 mg / kg) MWI/ VedcoNADA 139236
Göz kayganlaştırıcıMWI / Apexa701013
Oksitosin (2 IU / kg)Vet One501013
Malzemeler— Muntjac
Midazolam (1-2 mg / kg)Amerisource Bergen Drug Corp924326İsteğe bağlı: araştırmacı Midazolam'ı kendi başına veya anestezik olarak BAM kombinasyonunu kullanabilir
Butorphanol tartrat (Torbugesic) (0.45 mg / kg)Fort Dodge Hayvan SağlığıNADA 135-780
Azaperone tartrat (0.25 mg / kg)ZooPharm
Medetomadine HCl (0.07 mg / kg)ZooPharm
Antipamezol hidroklorür (Antisedan) (doz: 0.25 mg / kg)Orion CorporationNADA 141-033
Oksitosin (10 IU / kg)Vet One501013
Ekipman— Fare
P-200 Pipet AdamGilsonF123601
200 & mu; l pipet uçlarıLight LabsB-2004-SH
1 ml şırıngaMWI005427
27 G iğnelerMWI002031
Ekipman— Muntjac
15 ml konik tüplerVWR21008-918
22 G iğnelerMWI873
3 ml luer kilitli şırıngalarMWI001377

Kaynaklar

  1. Dueling, S. Muntiacus reevesi. Animal Diversity Web. , Available from: http://animaldiversity.ummz.umich.edu/accounts/Muntiacus_reevesi (2004).
  2. Pei, K., Taber, R., O'Gara, B., Wang, Y. Breeding cycle of the Formosan Reeves muntjac (Muntiacus reevesi micrurus) in northern Taiwan, Republic of China. Mammalia. 59

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Fare ModeliOksitosin UygulamasıAnestezi ProsedürüManuel SağımP-200 PipetSteril Toplama TüpleriMeme Dokusu MasajıHayvan Güvenliği ve İyileşme