Test Görsel Fonksiyonu için Basit Bir Davranış Testi Xenopus laevis

Summary

Xenopus tadpoles siyah / beyaz tankın beyaz tarafında yüzme tercih laevis'den. Bu davranış, onların vizyonu tarafından yönlendirilir. Bu davranışa dayanarak, iribaşların görme fonksiyonunu test etmek için basit bir test sunuyoruz.

Abstract

Kurbağa kurbağa yavruları görsel fonksiyon ölçümü, Xenopus laevis, canlı hayvanlarda körlüğe için tarama sağlar. Optokinetik yanıtı, test edilen bütün omurgalı gözlenmiştir bir görüntü-bazlı, dönüşlü bir davranıştır. Böylece kuyruk kapak tepkisi ince yanıtı kaydetmek için eğitimli bir teknisyen gerektirir alternatif tedbir olarak kullanılan Tadpole gözler küçük. Biz tadpoles siyah ve beyaz her iki taraf ile bir tank içinde yerleştirilen zaman bir tank beyaz tarafında yüzmek için tercih ettiği gerçeğine dayalı alternatif bir davranış testi geliştirdi. Burada sunulan deney, kolaylıkla ölçülür bir yanıt oluşturan bir basit, ucuz bir alternatiftir. Kurulum en Ksenopus laboratuarlarında hazır bir tripod, web kamerası ve iç içe test tanklar, oluşur. Bu makalede önce ve optik sinir kesilmesinin ardından, iribaşların davranışını gösteren bir film içermektedir. Bir gözün işlevini test etmek için, biz de Repre dahilHer göz ardışık günlerde retina axotomy uygulanan hangi bir kurbağa yavrusu bir sentative sonuçları. Gelecek çalışmalar seferde birçok iribaşların vizyonunu test etmek için bu testte bir otomatik versiyonunu gelişebilir.

Introduction

Xenopus laevis göz oluşumunu çalışmak için bir model organizma olarak kullanılmaktadır. Gözleri görme gelişimi ve fonksiyonu üzerinde bir etkiye sahip test genlerin ya da yollar için en az bir hafta içinde vadeye kadar büyüyen, hızla gelişir. Görme fonksiyonunu test etmek için, optokinetik ve optomotor yanıtı sırasıyla ^1,2, Zebra balığı ve Xenopus iribaşlara kullanılmaktadır. Xenopus iribaşların gözleri zebrabalıkları nispeten daha küçük olduğundan, bu deney Xenopus'ta ince kuyruk-Flip ve göz hareketleri davranışları tespit için özel ekipman kullanımı ve eğitimli personel gerektirir. Xenopus'ta daha sağl....

Protocol

Hayvan Bakımı

Xenopus Bu çalışmada kullanılan tadpoles Laboratuar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı için Upstate Medical University IACUC ve Kılavuz tarafından onaylanan prosedürlere uygun olarak, yükseltilmiş yetiştirilen ve tedavi edildi laevis.

. 1. Ön davranış Kurulum: Tadpoles

1. Bir ticari olarak temin edilebilen bir kaynaktan, döllenmiş embriyolar Xenopus elde edilir ya da daha önce tarif edildiği gibi ^6, in vitro olarak, oosit döller.
2. 20 mM KCI;; 20 mM CaCl _2; 50 mM HEPES 0.1x MMR [10 X Marc'ın Modifiye Ringer (MMR) çözelti st....

Results

Önceki raporlar bu testte, Biz iribaşların gözünde ya görme işlevini test etmek için bu tahlil değişti Arkaplan Renk Tercihi Tahlili ³ premetamorphic Ksenopus tadpoles siyah / beyaz tankın beyaz tarafına yüzmeyi tercih ettiğini göstermiştir ve çağrıda Bir haftadan daha az. Bu şekilde, gözleri histolojik inceleme için toplanabilir.

Bu tepki görsel işaretlerin kaynaklanmaktadır kadar burada gösterir. Film 1, sol ve sağ panellerinde tadpoles aynı hayvandır. .......

Discussion

Biz burada kolayca az eğitimli laboratuvar personeli tarafından bir hafta altında yapılabilir basit bir vizyon eşliğinde davranış deneyi rapor. Diğer deneyler hayvan davranışları, özel ekipman ve uzmanlık gerektiren, bu tahlil hızlı bir test görme fonksiyonunu belirlemenize olanak sağlar. Başka bir davranışsal deney, Görsel Kaçınma tahlil, TECTUM Xenopus'ta ¹⁰ görsel algı nasıl katkıda belirlemek için geliştirilmiştir. Istikrarlı bir arka plan karşı hareketli, ve böylece, basit deneyinden daha öz.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Kapaklı 1/2 Galon Flex-Tank	eNasco	SB19271M	Boyut: 5-3 / 8 "x 7" x 3-3 / 4 "
Siyah elektrik bandı
Beyaz kağıt mendil
Büyük aşılama döner tablası	VWR	50809-022	Boyut: Dia 114.3 x & nbsp; Y 76,2 mm (4 1/2  x  3")
Durasorb alt bezi	VWR	82004-836	Boyut: 43,2 x 60,1 cm (17 x 24")
Kimwipe	Krackeler Scientific, Inc.	1945-34155-CS
Standart tripod		Çeşitli
iSight kamera veya web kamerası	Apple	M8817LL/A	Daha büyük kurbağa yavruları için iyidir ancak küçük olanları görmek zordur
Taşınabilir bilgisayar	Apple/PC	Çeşitli	MacOSX Lion 10.7.5 MiniDV handycam video kamera SONY DCR-HC42 çalıştıran 13" MacBook, 2 GHz Intel Core 2 Duo kullandık
			6 iletkenli ve 4 iletkenli alfa FireWire 400 ile bilgisayara firewire ile bağlanır;
Handycam istasyonu	SONY	DCRA-C121	Bu, firewire'ı kameraya bağlamak için kullanılabilir
QuickTime Player yazılımı	Quicktime	Sürüm 10.1
26 G İğne (5/8" uzunluk)	VWR	BD305115
Dumont #5 Forseps	Güzel Bilim Araçları	11295-10
Tek Kullanımlık
Gentamisin sülfat [50 mg / ml]	Fisher Scientific	17-528Z	RT
Sylgard 184'te saklanır silikon elastomer	Fisher Scientific	NC9644388
Anında okyanus	Doktorlar Foster ve Smith	CD-116528	Stok çözeltisi = RT'de depolanan 100 g / L
Sodyum fosfat dibazik	Sigma Aldrich	S0876	Stok çözeltisi = RT'de depolanan 0,4 M
İn vitro< / em> döllenmiş embriyolar	eNasco	LM00490MX	100 embriyo / birim