Üreme ve in vivo araştırmalara uygun bir Zebra balığı tesisi kolay ve ekonomik bir şekilde inşa edilmiştir. Bakım minimumdur. Bu tesis, öğrenci katılımı ve bağımsız araştırma için idealdir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Bir Ekonomik ve Kolay oluşturun Zebra balığı Tesisi İnşaatı
Bu makalede
Özet
Özet
İn vivo biyomedikal araştırma klinik ilerlemeler in vitro bulgular çevirmek için çok önemlidir. Sınırlı kaynaklarla Küçük akademik kurumlar neredeyse imkansız oluşturmak ve araştırma için tipik kemirgen tesisleri korumak için bulabilirsiniz. Balığı araştırma farmakoloji, fizyoloji, geliştirme ve genetik çalışmalarda in vivo araştırmalar için önemli bir alternatif olduğu kanıtlanmıştır. Bu makalede, fonksiyonel Zebra balığı tesis kolay ve uygun fiyatlı bir şekilde inşa edilebileceğini göstermektedir. Biz böyle bir tesis asgari araç ve uzmanlığı ile ilgili bir iş günü içinde inşa edilebileceğini göstermektedir. Bu çalışmada inşa 27 1.8 L akvaryum Zebra balığı tesisin maliyeti yaklaşık 1500 $ oldu. Biz 3 ay boyunca bir ilk çalışma 150 balık kolonisinin bakım 1.000 $ olduğunu tahmin. Araştırma önermektedir için getirilmiştir Bu proje katılan öğrenciler, zebrafish aquaculturing için.
Giriş
İn vivo modeller bunlar sistem ve organizma düzeyinde tercüme edilecek in vitro araştırma izin beri kapsamlı biyomedikal araştırma esastır. Örneğin, küçük memeliler, yani kemirgenler, araştırma ilaçların geliştirilmesinde ve mevcut ilaçların geliştirilmesi için gerekli olduğu kanıtlanmıştır. Ancak, karmaşıklık (mali ve lojistik) neredeyse imkansız oluşturmak ve deneme küçük araştırma akademik kurumlarda teklif için kemirgen tesisleri korumak için yapmak olabilir. Bununla birlikte, in vivo araştırmalar daha az karmaşık, lojistik gerektiren diğer hayvan türlerini kullanarak gerçekleştirilebilir. Balığı (Danio rerio) başarılı bir şekilde genetik, geliştirme, patofizyolojisi ve farmakoloji 1,2,10,11,12 üzerinde çalışmak için in vivo bir modeli olarak kullanılmıştır. deney için zebrafish ev için gerekli imkanları r ile karşılaştırıldığında nispeten basit ve daha az pahalıOdent tesisler. Kim ve ark. 3 son zamanlarda detaylı parça ve işçilik maliyetlerini hem de içeren yaklaşık 1500 $ için inşa edilebilir 80 tankı Zebra balığı konut sistemi tarif var. Bu ticari tedarikçi herhangi bir sayıda bir hazır, 80 tankı sistemi satın almak için gerekli olacağını yaklaşık 8500 $ tezat duruyor. Ancak, Kim ve arkadaşları tarafından verilen açıklama. Balık araştırma acemiler için takip etmek karmaşık ve zor olabilir. Biz bir Zebra balığı tesis 1.500 $ bir yatırım için basitleştirilmiş bir şekilde inşa edilebilir inanıyoruz.
küçük akademik kurumlarda in vivo tesisin kurulması okudukları fakülte daha güçlü ve kapsamlı araştırma üretmek için ek bir araç sağlar. in vivo sonuçları ile desteklenmektedir in vitro veriler, genellikle in vitro yaklaşımlar sadece kullanılarak elde edilen verilerin daha kapsamlı biyomedikal araştırmalar üretmek. Bu nedenle,in vivo araştırma tesisi uygulanması önemli ölçüde genel araştırma çalışmalarında kurum başarısını artıracaktır (dış finansman, vb araştırma, yayınlar, iletişim, peşinde öğrenci maruz kalma.).
Bu çalışmada açıklanan gibi bir Zebra balığı tesisin yapımı finansal kez daraltıcı sırasında (in vivo araştırma tesisleri olmadan veya kurumlar) sınırlı imkanlarla araştırma, akademik kurumlar için idealdir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
NOT: Bu protokoller Presbyterian College IACUC yönergeleri izleyin.
Tablo 1 Listelenen 1. Edinme Malzemeler.
2. Üreticinin Talimatına göre 5 Raf Chrome'u birleştirin. Bu Tesisi evine kullanılacaktır.
3. Su haznesini ve filtrasyon sistemi (Şekil 1A ve 2) Construct.
- Bir kılavuz olarak Şekil 1A kullanarak, nihai montaj konumunu ve boyutunu belirlemek için 18 galon kova, pompa, filtre ve UV lambası düzeni.
- Parçalar ortaya koydu sonra, ölçmek ve montaj için gerekli uzunluğu ¾ "PVC boru kesti. Özel alan ihtiyaçları ve kısıtlamalara göre tüm boru uzunluklarını Vary.
- PVC astar ve çimento kullanarak daha önce düzenlendiği şekilde boru ve ek parçaları birleştirin, aşağıda (3.3.2 ve 3.3.3) bkz.
- Kum zımpara ile boru kesme kenarları dokunmatik An pürüzsüz olana kadard hiçbir enkaz yoktur.
- Başbakan boru dış ve PVC astar gelen dahil çubukla alınan PVC astar ile bağlantı içinde.
- Dahil çubukla kullanarak borunun dışına PVC çimento uygulayarak birlikte boru ve uydurma çimento. PVC çimentolama gereken tüm adımları tekrarlayın.
- Raf yapımında bir tarafına 18 galonluk kova yerleştirin.
- Rezervuar tankının yan bir bölme konektörü takın.
- Bölmeye ¾ "PVC boru takın.
- ¾ "Bir ¾ kullanarak pompa girişine boru" diğer ucunu takın uydurma yapmak dişli.
- İki 90 derecelik dirsek ve ¾ "PVC boru kullanılarak pompa için filtreleri bağlayın.
- Sudaki klor ve kimyasal seviyeleri enkaz süzmek ve azaltmak için bir aktif karbon filtreleri ardından bir kağıt filtre kullanın.
- Filtreler accordi UV lambası bağlayınüreticinin talimatlarına ng.
- Tel bağları kullanarak rafa ilk rafın üst tarafına pompa ve filtre sistemi takın. Seçilen raf / raf boyutu ve düzeni göre montaj ve bağlantı sırasını Vary.
- Pompa ve filtre sistemi monte ve raf bağlı kez su deposuna su galon başına 1 BioBall ekleyin.
4. ana besleme hattı (Şekil 1B ve 2) Construct.
- Tedbir ve ana kaynağı UV lamba bağlamak için PVC boru "¾ bir parça kesti
- UV filtresi gelen PVC egzoz ¾ "için tee bağlayarak ana besleme hattı başlatmak için PVC tee" ¾ kullanın. .
- Sistemin bakımı yıkama için bir boşaltma olarak hizmet etmek üzere, PVC tee altına bir açma-kapama valfi ekleyin.
- PVC ¾ "ölçme ve kesme PVC tee" ¾ üst ana besleme hattı başlayınİstenilen uzunlukta boru raf raf her besleme boruları sağlamak.
- Install ¾ "raf her raf girecek yatay çizgiler PVC tee.
- İsteğe bağlı olarak (ve önerilen), bir ekleme ¾ "açma-kapama valfı, her raf besleme hattı için her bir raf izolasyonu ve sistemin modüler tasarımı için izin verir.
- Üst rafta çizgi basınç düşürme gibi ¾ "PVC boru kullanın. Bu hat raf arkasında çalışıyorsa, depolama için bu raf kullanın. Ana egzoz hattı, bir ¾ ile (Şekil 1B) "açma-kapama vanası çizgiyi basınç azaltma End.
- Yukarıdaki adımlar, başbakan tamamlanmış ve rezervuar ve filtrasyon sistemi inşa sırasında önceden yapıldığı gibi birlikte PVC boru çimento edildikten sonra.
5. Ana egzoz hattı (Şekil 1C ve 2) Construct.
- Raf f diğer tarafında ana egzoz hattının düşey uzunluğunu çalıştırınana besleme hattı rom. Her raftan balık tankları üst ve drenaj hatlarında ana besleme hattı almak için bu dikey hat için 2 "PVC boru kullanın.
- "Dikey ana egzoz hattı için PVC boru ve 2 kullanın" 2 parçaları Kes her raftan balık tankı boşaltma hatları almak için PVC tee. Bir sünger filtre üzerinde dönüştürülmüş su çıkarmak için stok tankı ana egzoz hattı End.
- 2 "PVC boru parçaları tüm uzunluğu açılış bir inç kesin ve PVC balık tankları yatay drenaj hatları için tee dikey ana egzoz hattına takın.
- PVC kapağı 2 ", 2 yatay drenaj hatları" Cap.
- Başbakan ve gerekli parçaları (konektörler, meme veya dirsekler) kullanarak parçaları çimento.
6. balık tankları (Şekil 3) Construct.
- Matkap ile bir delik testere ile üst kenarının altına "balık tankı 1 arkasındaki delik" 1 1/8 kesti.
- (dış tankın içinden) delikten (bağlı bir 18. O halkası ile) bir dişli ¾ "PVC erkek adaptörü kaydırın.
- Takın ve 90 derecesi 3/4 sıkın 'balık tankı egzoz borusunu oluşturmak için erkek adaptöre PVC dirsek dişli. Egzoz sistemi geçiyor zebrafish önlemek için tutma somunu vidalama önce ince örgü bir parça ekleyin.
- Tanklar arkasındaki boşaltma hattı açık uzaya egzoz borusu biten balık tankı yerleştirin
7. suyu sistemi Başlangıç
- Bu hazne için kullanılan gibi çeşitli kaplar olarak, sistem içinde bulunan su için miktarın üç katı ölçer. Bu su 48 saat süre ile klima oda sıcaklığında bekletin.
- Sisteme su ilave edin ve 3 gün, en az deveran etmesi.
- Kirletici tha sistemi kurtulmak için dolaşım ilk 3 gün boyunca şiddetle sistemde su değiştirint borular içinde bulunur.
- Marş zebrafish ekleyin ve azot döngüsü kurulan almak için izin verir. Tutarlı 7. pH Normale 1.8 L başına yedi zebrafish tutun ve Linbo 4 ve 6 McNabb tarafından önerilen sonları günde bir kez hafta içi günde iki kez onları beslemek ve.
- Nitrat Monitör (<75 mg / L), nitrit (<10 mg / L), ve amonyum balık ekledikten sonra ilk hafta boyunca her gün (0 mg / L), ve iki haftada bir kez istenilen seviyeleri düzenli su değişimleri ile muhafaza edilmiştir .
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Pompa ve Flters Sistemi İnşaatı
Raf monte ve ilk adımı kurulduktan sonra pompa ve filtre sistemi inşa etmektir. Filtreler sistem pompasının bağlı ve kolay filtre bakım ve değişimi için izin veren ilk raf, alt seviyesinden bulunmaktadır. Benzer bir şekilde, UV lambası filtresi PVC boru ile bağlı olan ve gerektiğinde (Şekil 4A) ve UV lambası kolayca değiştirilmesine olanak tanımak amacıyla, plastik tel bağlar ile yerinde tutulur. Hemen bir kağıt filtre, aktif karbon filtre, ve bir UV lambası...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu makalenin temel amacı fonksiyonel Zebra balığı tesisin yapımı karmaşık değildir ve minimal inşaat bilgisine sahip acemi balık araştırmacılar tarafından inşa edilebilir olduğunu göstermektir. Ayrıca, bu makalede, bu fonksiyonel Zebra balığı tesisi için malzemeler yerel evcil hayvan besleme mağazalarda veya donanım mağazalarından kolayca ve uygun maliyetle elde edilebilir olduğunu göstermektedir. Tüm malzemeler ve aletler sisteminin inşasını elde edilmiş ve balık tankları yaklaşık bir iş günü sürer kez. 72 saat ilk çal...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar bu kağıt için herhangi bir çıkar çatışmalarını beyan ederim.
Teşekkürler
Yazarlar Araştırma ve İşbirliği (SPARC) Ödülü Küçük Eczane Ödülleri aracılığıyla bu projenin mali destek Eczacılık Presbyterian Koleji Okulu Araştırma Ofisi teşekkür etmek istiyorum. Yazarlar Bay John Smink, Su Hayvancılık Araştırma Laboratuvarı Müdürü, Clemson Üniversitesi, Clemson, onun teknik yardım yazması revizyonu için SC teşekkür ederiz.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Ürün Marka | Miktarı | ||
| 74 inç Y x 48 inç G x 18 inç D 5 raflı Çelik Bağımsız Raf Ünitesi | Stil Seçimleri | 1 | |
| 18 Galon Genel Kova/Bez | Centrex Plastics: LLC Sağlam Çanta | 1 | |
| 6 çıkışlı Güç Şeridi, 15 ft Kablolu | Ana Elektrikçi | 1 | |
| 9 Watt UV Su Bahçe Arıtıcı FiIter ve UV lambası | Smartpond | ||
| Tüm Ev Su Değiştirme Filtresi | Whirlpool | 6 | |
| Opak Tüm Ev Ön Filtrasyon Muhafazası | Whirlpool | 2 | |
| İplik Conta Bandı | William H Harvey | 1 | |
| 8-fl oz LO-VOC PVC Çimento | Oatey | ||
| 8-fl oz LO-VOC Astar | Oatey | ||
| 1/4 inç x 100 ft Vinil Damla Sulama Dağıtım Borusu | Bay Peyzaj Mimarı | ||
| 1/4 inç Dikenli Damla Sulama Açma/Kapama Vanası | Mister Landscaper | 33 | |
| 9 Portlu NPT Filtreli Sulama Manifoldu | Mister Landscaper | 6 | |
| Evli Açılır Filtre | Whirlpool | 6 | |
| 2 inç çap 90 derece PVC dirsek | LASCO | 3 | |
| 2 inç çap 90 derece tişört | LASCO | 3 | |
| 3/4 inç çap 90 derece kaymalı dirsek | LASCO | 15 | |
| 3/4 inç çap PVC adaptör | LASCO | 7 | |
| 3/4 inç çap PVC tişört | LASCO | 12 | |
| 2 inç çap PVC kapak | LASCO | 3 | |
| 1 inç Çap x 3/4 inç Çap PVC Adaptör | LASCO | 2 | |
| 3/4 inç PVC Soket Sıralı Küresel Vana | Amerikan Vana | 5 | |
| 1/2 inç Çap x 3/4 inç Çap PVC Adaptör | Lasco | 8 | |
| 3/4 inç Çap PVC Kapak | Lasco | 1 | |
| 2 inç x 5 Ft Pvc Boru | Charlotte Boru | 4 | |
| ¾-In x 10-Ft Pvc boru | Charlotte Boru | 3 | |
| 11 / 16x1-7 / 80 PVC halka | SXT | 10 | |
| ve frac12; ” PVC erkek adaptör | SXT | 1 | |
| & frac34; ” PVC kaplin & nbsp; | SXT | 1 | |
| ve frak12; ” PVC dişi adaptör ve nbsp; | SXT | 1 | |
| bağlantı | |||
| 1.8 L Çift Beta Kaleci | Üst Yüzgeç | 27 | |
| ¾ ” PVC erkek adaptör (# 18 O-ringli) | SXT | 28 | |
| 90 derece ve frak34; ” dişli PVC dirsek | SXT | 27 | |
| İnce Mesh N | /A | 1 yarda | |
| Bölme Konnektörü | N/A | 1 | |
| Demir Testeresi | N/A | 1 | |
| Matkap | N/A | 1 | |
| Delik testeresi | N/A | 1 | |
| Ayarlanabilir Anahtar | N/A | 1 | |
| Pense | Yok | 1 | |
| Mezura Yok | 1 | ||
| Güvenlik Gözlükleri Yok | 1 | ||
| İş Eldivenleri Yok | 1 |
Kaynaklar
- Detrich, H., Westerfield, M., Zon, L. The Zebrafish: Cellular and Developmental Biology, Part A.. , 3rd ed, Academic Press. New York, New York. (2010).
- Grim, J. M., et al. Hemogen (hemgn), a transcription factor that regulates erythropoiesis and skeletogenesis in zebrafish. Strategic Conference of Zebrafish Investigators Poster Presentation, 2013, Asilimar, CA, , (2013).
- Kim, S., Carlson, R., Zafreen, L., Rajpurohit, S. K., Jagadeeswaran, P. Modular, easy-to-assemble, low-cost facility. Zebrafish. 6 (3), 269-274 (2009).
- Linbo, T. L. Zebrafish (Danio rerio) husbandry and colony maintenance at the Northwest Fisheries Science Center. U.S. Dept. Commer., NOAA Tech. Memo. 62, (2009).
- Avdesh, A., et al. Regular care and maintenance of a zebrafish (Danio rerio) laboratory: an introduction. J Vis Exp. 69, 4196(2012).
- McNabb, A., Scott, K., Ochsenstein, E., Seufert, K., Carl, M. Don't be afraid to set up your fish facility. Zebrafish. 9 (3), 120-125 (2012).
- Garcia, R. L., Sanders, G. E. Efficacy of cleaning and disinfection procedures in a zebrafish rerio) facility. J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (6), 895-900 (2011).
- Rivas-Boyero, A. A., et al. Pharmacological characterization of a nociceptin receptor from zebrafish (Danio rerio). J Mol Endocrinol. 46 (2), 111-123 (2011).
- Sanchez-Simon, F. M., Zhang, X. X., Loh, H. H., Law, P. Y., Rodriguez, R. E. Morphine regulates dopaminergic neuron differentiation via miR-133b. Mol Pharmacol. 78 (5), 935-942 (2010).
- Velasco, E. M., Law, P. Y., Rodríguez, R. E. Mu opioid from the zebrafish exhibits functional characteristics as those of mammalian mu opioid receptor. Zebrafish. 6 (3), 259-268 (2009).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
