Optimize Ex-ovo Kalkınma Gelişmiş Aşamaları Chick Embriyolar ekimi

Özet

Gelişim sırasında tavuk embriyosunu görüntülemek ve ona erişmek zor olabilir. Basit, uygun maliyetli ve bir sınıfta veya araştırma ortamında kolayca kullanılabilecek bir ex ovo yöntemi geliştirdik. Bu yöntem, embriyonik gelişimin geç aşamalarına kadar embriyoya erişim sağlar (HH 40).

Özet

Anatomi, embriyoloji ve gelişim biyolojisi alanındaki araştırmalar büyük ölçüde model organizmaların kullanımına dayanmıştır. Canlı embriyolardaki gelişimi incelemek için tavuk gibi model organizmalar sıklıkla kullanılır. Tavuk, düşük maliyeti ve minimum bakımı nedeniyle mükemmel bir model organizmadır, ancak opak bir yumurta kabuğu içinde bulundukları için gözlemsel zorluklar sunarlar. Embriyoyu geliştikçe düzgün bir şekilde görebilmek için, kabuğun pencereli olması veya çıkarılması gerekir. Embriyonik gelişim çalışmasında araştırmacılara yardımcı olmak için hem pencereleme hem de ex ovo teknikler geliştirilmiştir. Bununla birlikte, yöntemlerin her birinin sınırlamaları ve zorlukları vardır. Burada, tavuk embriyoları için HH 19 evresinden birçok organın geliştiği gelişimin geç aşamalarına (HH 40) kadar embriyonik gelişimin gözlemlenmesini sağlayan basit, optimize edilmiş bir ex ovo kültür tekniği sunuyoruz. Bu tekniğin hem lisans sınıflarında hem de embriyo manipülasyonlarının yapıldığı daha gelişmiş araştırma laboratuvarlarında benimsenmesi kolaydır.

Giriş

Ex ovo kültürü, tavuğun gelişimi çalışmasında önemli bir rol oynamıştır^{1, 2}. Bu kültürleme yöntemi, nörolojik hastalıkları, uzuv gelişimini, kraniyofasiyal gelişimi incelemek ve diyabet ile ilişkili malformasyonları araştırmak için bir model olarak kullanılmıştır ^{3, 4, 5}.

Ex ovo tekniğinin birçok çeşidi vardır. En yaygın yaklaşım, bir strafor kap^6,7,8 veya bir cam kase⁵ kullanmaktır. Bu yöntemlerde, embriyoyu beşiklemek için fincan veya kase streç film ile kaplanır, fincanın üzerine bir kapak yerleştirilir ve embriyo daha sonra uygun nem oranına sahip bir inkübatöre yerleştirilir....

Protokol

Not: Tüm malzemeleri Tablo 1'de verilmiştir.

1. Tavuk Embriyolar Saklama

1. Yaklaşık% 40 nem ile Gallus 37 ^o C yatay Gallus gerginlik tavuk yumurta inkübe ve bir kez ya da günde iki kez yumurta açın. Yumurta kabuğu Torna yapışmasını embriyo önlemek için önemlidir.
2. 4 ^o C'de yumurta tutmak, önceki aksi embriyo sarısı kitle ventral yer alacak ve ek olarak 3. adımda yumurta açılması zarar görür gibi kültür kurma 24 saat içinde yumurta açmak etmeyin "halt" kalkınma inkübasyon öncesinde en fazla bir hafta derece ama bu ideal değildir.

2. Tavuk Emb....

Sonuçlar

Yöntemin ovo Bu eski geç gelişim evrelerinde (HH 40-41) (Şekil 1A ve 1B) gelişme erken aşamalarında (HH 19/20) embriyoların gözlem için izin verir. HH 19-20 de kültür kurma kültür embriyoların beka artırır. Hayatta kalma kültürü ve sahnede 21 sonra çok düşüktür (53 hpf önce) çevirerek kafasına önce, embriyo daha az sağlam embriyolar elde edilir, böylece kaldırılması üzerine kabuk daha sopa eğilimindedir. (Yaklaşık% 40 HH 40-41 kadar hayatta) Genel olarak, kültür ex.......

Tartışma

Kültürleme ve her ikisi de pencereleme ex ovo avantajları ve zorlukları vardır. Burada avantaj ve yöntem ovo Strafor bardak ex ve burada gösterilen yönteme ovo Optimize ex pencere yöntemi zorlukları karşılaştırın. Bizim yöntem geç gelişim evrelerinde ve yöntem ^{1, 2} ovo geleneksel ex bizim ayrıntılandırmaları de manipülasyon ve civciv embriyo rahatlıkla ^{izlenebilmektedir, 3} lisans öğretim laboratuvar derslerinde kullanmak üzere, ek çok k.......

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Penisilin / Streptomisin	Sigma	P4458	Donma / çözülme olaylarını önlemek için küçük alikotlar yapın
Kare Petri Kabı			9,5 cm x 9,5 cm
Tartı Teknesi	Fischer Scientific	8732113	88 x 88 x 23 mm
Kilitli kap	Kilitli	Yok	12 cm x 12 cm x 6 cm