Aort patolojisi ciddi morbidite ve mortaliteye yol açabilir, bu nedenle hastalığın ilerlemesi ve potansiyel tedavilerin araştırılması gereklidir. Burada, araştırmacılara kardiyovasküler hastalık araştırmalarında yardımcı olmak için murin aortunu izole etmek ve eksize etmek için bir protokol sunuyoruz.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
İzolasyon ve Kemirgen Aort eksizyonu; Kardiyovasküler Hastalığı Çalışmasında Çok Yönlü Tekniği
Bu makalede
Özet
Özet
Kardiyovasküler hastalık, kalp ve/veya kan damarlarının hastalığını tanımlayan geniş bir terimdir. Vücuda oksijenli kan sağlayan ana kan damarı aorttur. Ateroskleroz ve anevrizma gibi hastalıklarda aort damarı etkilenebilir. Bu hastalıkları araştıran araştırmacılar, hastalığın ilerlemesini karakterize etmek ve potansiyel terapötiklerin etkinliğini değerlendirmek için aortun doğrudan gözlemlenmesinden faydalanacaktır. Bu protokolün amacı, kardiyovasküler hastalıkları araştıran araştırmacılara yardımcı olmak için aortun uygun izolasyonunu ve eksizyonunu tanımlamaktır. Aortun izolasyonu ve eksizyonu, araştırmacıların brüt morfometrik değişikliklere bakmalarına ve istenirse histolojik değişikliklere bakmak için dokuyu korumalarına ve boyamalarına izin verir. Aort, ilgilenilen hedefleri ve etki mekanizmalarını keşfetmek için protein ve gen ekspresyonunu değerlendirmek için moleküler çalışmalar için kullanılabilir. Bu teknik, teknoloji ve maliyet açısından doğal sınırlamaları olduğu için görüntüleme modalitelerinden üstündür. Ek olarak, yeni izole edilmiş ve eksize edilmiş bir aorttan birincil izole edilmiş hücreler, araştırmacıların in situ ve in vitro tahliller yapmasına izin verebilir. Aortun izolasyonu ve eksizyonu, hayvanı feda etmek zorunda kalma sınırlamasına sahiptir, ancak bu durumda, aort hastalığı çalışmasında en çok yönlü teknik olduğu için faydalar zarardan daha ağır basar.
Giriş
Aort oksijenli kan ve vücut burada da benzer kısımlar ile vücut temin kardiyovasküler fonksiyon çok önemli bir rol oynar, hastalığa karşı hassastır. Ortak aort hastalıkları diyet, sigara ve sedanter yaşam tarzı 1 olmak üzere genetik ve çevresel faktörlerin sonuçları ateroskleroz ve anevrizma içerir. Ateroskleroz, tipik olarak kronik hiperlipidemi 2 olan hastalarda bulunan aort duvarının bir kalsiyum ve lipit bazlı plak birikmesidir. Anevrizma sonuçta 3 yırtılmasına neden olabilecek bir artış çapı ardından aorta ve damar duvarının incelme yapısal elemanların bozulma ile karakterize edilir.
Hayvan modelleri ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Tüm hayvan prosedürleri, Cincinnati Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi ve Ulusal Sağlık Enstitüleri Laboratuar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu uyarınca onay (NIH Yayın No. 85-23 ile yapıldı ) 1996 Revize.
1. Fare Hazırlanması
- Anestezik bir tedavi üstü doz hayvan teşhir ederek Euthanize, izofluran etkisi inhale. Bir zararlı uyarıcı olarak ayak tutam yoluyla birincil ötenazi doğrulayın. Ötenazi, diyafram kesme İkincil yöntem, yaklaşan adım ortaya çıkar. Alternatif yöntemler kullanılmıştır verilen ötenazi elde edilir edilebilir.
- Sanitizie nem alanına için% 70 etanol ile, ilk kesim yapılaca....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Prosedürün tamamlanmasından sonra, hala (Şekil 1A) bağlı renal arter ile göğüs ve karın boşlukları içerisine inen kalp kaynaklı sağlam bir aort, orada olacak. Buradan, aort abdominal aort anevrizması (Şekil 1B ve 1C) çalışmalarında tanısal olan morfometrik değişiklikleri ölçmek için yerinde görüntülü olabilir. Daha sonra, aort, kaldırıldı sabit ve histolojik değişikliklere bakmak lekeli olabilir. Aort genel ve ortak leke hematoksilin ve eozin boyama (Şe.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Aort hastalığı, ciddi vakalarda önemli sistemik patolojiye ve muhtemelen ölüme yol açabilir. Tedavi seçenekleri şu anda sınırlıdır, bu nedenle bu alanda sürekli araştırma yapılması gerekmektedir10. Murin modelleri, hastalığın ilerlemesini ve potansiyel olarak tedavi seçeneklerini daha fazla incelemek için idealdir4. Bu nedenle, bu yazıda açıklanan yöntemin başarıyla tamamlanması, araştırmacılara hastalığın ilerlemesini ve ilaç etkinliğini ölçmek için araçlar sağlayacaktır.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.
Teşekkürler
Yazarlar herhangi bildirimleri var.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Isofluran | Med-Vet International | #RXISO-250 | |
| %70 etanol | Fisher | 07-678-001 | |
| Fosfat tamponlu salin | Sigma Aldrich | P5368-10PAK | |
| Cerrahi bant | 3M | 1527-1 | |
| Steril gazlı bez | Dukal Corporations | 1312 | |
| 25 gauge iğne | BD | ||
| 10 ml şırınga | BD | 309604 |
Kaynaklar
- Go, A. S., et al. Heart disease and stroke statistics--2014 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 129 (3), 28-292 (2014).
- Ross, R., Harker, L. Hyperlipidemia and atherosclerosis. Science. 193 (4258), 1094-1100 (1976).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
