Yöntem makalesi

Sıçanlarda sonografik Teknoloji Kullanımı İlaç Kaynaklı Böbrek Hemodinamik Bozukluğu Erken Tespiti

DOI:

10.3791/52409

⸱

11 Mart 2016

 ,  ,  , 
1Cardiac Muscle Research Laboratory, Cardiovascular Division, Brigham and Women's Hospital, Harvard Medical School, 2Renal Division, Brigham and Women's Hospital, Harvard Medical School

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Erken evre hemodinamik disfonksiyon böbrek hastalığının gelişimi için kritik öneme sahiptir. Ancak, tespit metodolojileri sınırlıdır. Sonografideki son gelişmeler, böbrek hasarının erken tespiti için invaziv olmayan, doğru bir seçenek sunmaktadır. Bu çalışma, ilaca bağlı nefrotoksisite sıçan modeli kullanarak böbrek fonksiyon bozukluğunu tespit etmek için adım adım sonografik bir metodolojiyi özetlemektedir.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Böbrek normalde hemodinamik homeostazı korumak için fonksiyonları ve ilaç toksisitesinin neden olduğu hasarın önemli bir sitedir. İlaca bağlı nefrotoksisite kritik hastalarda akut böbrek hasarı (ABH) tüm klinik vakaların 19-% 25 katkı tahmin edilmektedir. AKI algılama tarihsel böbrek fonksiyon bozukluğu erken dönemde nefrotoksisite tam değerlendirmesinde kanıtlanabilir yetersiz olan serum kreatinin (SCR) ya da kan üre azotu (BUN) gibi ölçütlere güvendi. Şu anda, bu tür değişiklikler aslında, serum biyobelirteç düzeylerindeki artış önce olabilir ederken doğru AKI erken dönemde hemodinamik değişiklik tespit etmek için hiçbir sağlam tanı yöntemi yoktur. Böyle erken teşhis klinisyenlerin doğru bir teşhis yapmak ve tedavi stratejisi için karar verme in yardımcı olabilir. Fareler AKI indükleme Sisplatin ile tedavi edildi. Nefrotoksisite yüksek frekanslı sonografi SCR ölçüm kullanarak altı gün ve histopatolojik üzerine değerlendirildiböbrek. 2D ve Renk-Doppler görüntüleri kullanarak hemodinamik değerlendirme sonografi kullanılarak, seri sıçanlarda nefrotoksisiteyi incelemek için kullanılmıştır. Bizim verilerimiz histolojik inceleme ile erişkin sıçanlarda başarılı ilaca bağlı böbrek hasarı gösterdi. AKI renkli Doppler temelli sonografik değerlendirme rezistif indeks (RI) ve pulsatil-indeksi (PI) tedavi grubunda artmış olduğunu göstermiştir; ve pik sistolik hız (mm / s), diyastol sonu hız (mm / s) ve hız-zaman integrali (VTI, mm) aynı grupta renal arterlerde azalmıştır. Önemlisi, sonografi ile değerlendirildi bu hemodinamik değişiklikler SCR seviyelerinin yükselişi öncesinde. Böyle RI veya PI olarak sonografi tabanlı endeksler, böylece kemirgenlerde böbrek fonksiyonlarının azalması yararlı öngörü belirteçleri olabilir. AKI uygulanan sıçanların böbreklerinde bizim sonografi tabanlı gözlemlerden, bu non-invazif hemodinamik ölçümler erken evre böbrek disfonksiyonu tespit doğru, hassas ve sağlam bir yöntem olarak düşünebilirsiniz gösterdi. TOnun çalışma aynı zamanda araştırma hayvan kullanımı ile ilgili etik konuların önemini vurgulamaktadır.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Serum kreatinin (SCR) fazla iki yıl için böbrek fonksiyonunu değerlendirmek için altın standart metrik olmuştur. Son zamanlarda, birçok çalışma böbrek hasarı çok daha önce SCR 1 değişimlerden daha ortaya çıktığını bildirdi. Ancak, erken ilaca bağlı nefrotoksisite de dahil olmak üzere renal hasar sırasında meydana gelen hemodinamik değişikliklerin tespiti için sağlam yöntem vardır.

İlaca bağlı akut renal hemodinamik fonksiyon bozukluğu, böbrek yetmezliği 2,3 renal doku hasarı ve daha fazla ilerlemesi yol açar. Son birkaç yılda, çalışmalar, bilgisayarlı tomografi (CAT), Fonksiyonel manyetik rezonans görüntüleme (fMRI) ve sonografi gibi görüntüleme araçları hemodinamik değerlendirmesinde 4 bir rol oynadığını göstermektedir. Geçerli görüntüleme araçları, Renk-Doppler teknikleri ile birleştiğinde gri skala sonografi, en sık böbrek 3,5,6 anatomik durumunu belirlemek ve değerlendirmek için kullanılmaktadır. Sullivan ve. ark. ve Bonnin ve. ark. Son zamanlarda sonografi vazokonstriksiyon ve hipoksi stres hayvan modellerinde 7,8 analiz hemodinamik değişiklikler etkili, güçlü ve non-invaziv bir araç olduğunu bildirdi. Bu teknik aynı zamanda yaygın olarak arteryel stenozu 9,10 tespit etmek için kullanılır.

Yüksek çözünürlüklü ultrason görüntüleme alanındaki en son teknik gelişmeler, in vivo 11, araştırmacılar yüksek frekans (25-80 MHz) ve yüksek çözünürlük (<0.03 mm çözünürlük) sondalar kullanılarak kardiyovasküler toksisite ele sağladı. Biz böbrek incelemek için bu yüksek çözünürlüklü sonografi kullanılarak nefrotoksisite erken teşhisi için non-invaziv ve hassas yöntem için görülmemiş bir fırsat sağlayacaktır varsayımında.

Sisplatin için diğer ilaçlarla 12-14 ile kombinasyon halinde testis, yumurtalık, mesane, baş, akciğer, boyun kanserleri tedavi etmek için kullanılır. Sisplatin nedeniyle p hücre nekrozuna nefrotoksisite iyi belgelenmiş oldu ettiroximal tübüller (PT) ve toplama kanalları kan üre azotu (BUN) ve SCR 15 yükselen sonuçlandı. Bu yazıda, nefrotoksisite indüklenen İlaç (Sisplatin) sıçan modeli kullanılarak böbrek disfonksiyonu karakterize etmek non-invazif böbrek sonografi kullanılarak ayrıntılı bir adım-adım metodoloji sağlar.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Amerikan Veteriner Hekimleri Birliği (AVMA) kurallara uygun olarak Charles River Laboratuvarları satın ve Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) protokolleri onayladı kullanarak erkek Sprague Dawley sıçanlarda tüm prosedürleri uygulayın.

1. Hayvan Hazırlama ve Cerrahi Yöntemler

  1. herhangi bir deneysel işlem öncesi bir hafta boyunca tüm hayvanları alıştırıldı.
  2. izofluran kullanarak hayvan anestezisi (% 2-3 uyardığı ve% 1.0 korumak için) ve kuruma, tahriş veya ülserasyon önlemek için her iki göze göz merhemi uygulanır.
  3. 40. bıçak ve gerektiğinde tüy dökücü krem ​​kullanarak hayvanın göğüs saç çıkarın. Biz ventral yüzü görüntüleme elde edilen iyi görüntü verilerini olamaz eğer hayvanın arka formu saç kaldırmak zorunda kalabilirsiniz.

2. Nefrotoksisite Rat Modeli

  1. Sisplatin kaynaklı nefrotoksisite modelinde, protokol a kullanarak, Cisplatin yönetmekdaha önce tarif edilen s. 15
  2. Başlangıçta, 24 saat Cisplatin uygulamadan önce (Gün 0) de ultrasonografi gerçekleştirin. (Adım 3 Bkz, Görüntüleme Protokolü)
  3. sıçanları (n = 6) içine iki grup Rastgele. Gün 1 'de, (periton boşluğu içine bir çalışma grubu ve normal tuzlu su içinde, sisplatin hayvanın vücut ağırlığına göre hesaplanmıştır (10 mg / ml) (10 mg / kg vücut ağırlığı tek doz nefrotoksisite indüksiyonu), enjeksiyon hacmi (1 mi / Kg vücut ağırlığı)) tatbik kontrol grubunda NS).
  4. 24, aşama 1.2, 48, 72, 96, 120, Sisplatin uygulamadan sonra 144 saat hayvan anestezisi.
  5. hayvanın istikrarlı anestezi aşaması altında yüksek çözünürlüklü ultrason sistemi (Malzeme ve Ekipmanları Masa bakınız) kullanarak görüntüyü alır. tam iyileşme ile anestezi indüksiyonu gelen görüntüleme sırasında hayvanın temel fizyolojik fonksiyonlarını izlemeye devam edin.
  6. görüntüleme işlemleri sırasında hayvanın hayati işaretleri takip: sıçan-sıcaklık: 35,9-37,5, solunum hızı: 66-144 / dk, kalp hızı: 250-600 / dk.Bizim önerilen çalışmada okuma optimum hayati işaretidir: Sıcaklık: 36,5-37,0, solunum hızı: 80-100 / dk, kalp hızı: 450-550 / dk.
    NOT: İntravenöz sıvı infüzyon ve ısıtma lamba cerrahi ve anestezi etkilerini en aza indirmek için hayvanın normal fizyolojik durumunu korumak için. Gerekirse işlem sırasında mekanik ventilatör ile solunum Yrd. Bununla birlikte, mekanik ventilasyon nadiren bu deneyde gereklidir.

3. Görüntüleme Protokolü

Not: ultrason makinesi sağlayıcı uzun görüntüleme işlemi için ısıtılmış bir platform sağlar. sadece 5 ila 15 dakika sürer, çünkü Ancak, bizim gösterdi deneyde ısıtmalı platformu kullanmayın. Fizyolojisi kontrol anahtarına bağlı bir rektal termometre ile takip vücut sıcaklığı kontrol edilir.

  1. Böbrek (B Modu) enine resim:
    1. 21 MHz merkez frekans ile MS 250 ultrason kullanarak bağlanmakaktif bağlantı noktasına ed, "General Imaging" uygulama ön ayarı ayarlayın.
    2. platformda hayvan sırtüstü ile hayvan 21 MHz ultrason raylı sistemi kullanarak prob, orta hattı konumlandırmak ve aorta izole. Bu pozisyonda, prob açısı sternum sol hattı (yatay eksen) karşı 90 derece (Şekil 1A, B).
    3. Bu pozisyondan sonda renal arter düzeyinde artık öyle ki hayvan ile platformu kaydırın (sol veya sağ ya bir defada görüntü bir can).
    4. mikromanipülatörler kullanarak, sağ veya sol renal arter ya görüntüleyebilirsiniz.
    5. ekranın ortasında tam bir böbrek görünümü elde etmek prob y ekseni boyunca hafifçe eğerek prob açısını ayarlayın.
    6. Şekil 1C ve D, sine deposunda kullanılan prob ile izin verilen en yüksek kare hızı kullanarak görüntü gösterildiği gibi uygun görülecek (renal pelvis, renal arter) belirlendikten sonra.
  2. Böbrek (Renkli Doppler görüntüsü) Enine resim:
    1. klavyede Renk Doppler tuşunu kullanarak, Renkli Doppler akustik pencere açın. Bu renal arter ve renal ven (Şekil 1D) izole etmek için yardımcı olur. (Ve kırmızı renk venöz akışını gösteren Mavi renk arteriyel kan akımı gösterir).
    2. (Y ekseni üzerinde tarafından ve sarı ok gösterilir) odak derinliği böbrek merkezinde yatıyor emin olun. cine mağaza ile verileri kaydetmek.
    3. Emin rekor mümkün mümkün olan en yüksek kare hızı (> 200 kare / sn) veri yapın.
  3. Böbrek (Darbeli dalga veya PW görünüm) Enine resim:
    1. Renk-Doppler modunda, ekranda (Şekil 1F) sarı bir gösterge hattı (Darbeli dalga Doppler örnek hacmi) getirmek için ise, PW tuşu tıklayın.
    2. PW açısı anahtarı kullanılarak damar yoluyla akış yönünü paralel bir açıda renal arter sarı hattı yerleştirin.
      3. 60 derece veya daha az Doppler açısı sağlamak (bu Şekil 1 D mavi ve E gösterilir) akış yönünde renal arter boyunca PW sarı gösterge satırı koyun.
    3. Bu modda, akustik pencere üst ve alt bölüme böler.
    4. zirve sistol ve diyastol arteriyel akışının hızını gösterir dalga formlarının görüntü yakalamak için Cine mağaza kullanın.

Görüntüleme sonra 4. Hayvan Taşıma

  1. Gün 5 Gün 0 dan, görüntüleme sonrası sternal yatma pozisyonunda (yatak üzerinde temiz bir kağıt havlu ile) temiz bir kurtarma alana hayvan yerleştirin. Biz hayvanlar gibi agresif hayvanlar için "Kuyruk Holding" yöntemi ile son derece dikkatli tüm hayvanları ele Not anestezi kurtarmak.
  2. anestezik kurtarma sırasında, harici hea ile hayvanın vücut sıcaklığı tutmakt kaynağı ve elektrofizyolojik problar ile monitör hayvanın vital hayvan tamamen anestezi kurtarır kadar.
  3. Onlar uyanık ve aktif olduğunda dönüş tesis konut odasına hayvanları iyileşti.
  4. Gün 6 ve hasat böbrekler üzerinde kurumsal kurallarına göre tüm fareler euthanize adım 4.5 gibi histolojik değerlendirme için (adım 4.7 bakınız).
  5. böbrek fonksiyonlarını kontrol etmek için kreatinin testi için metabolik kafeste ekli toplama tüpleri gelen hayvanın idrarı toplayın.
  6. Hayvan böbrek parafin bölümünü gerçekleştirmek ve nefrotoksisiteyi (detay için adım 4.7 bakınız) kontrol etmek için boyama HE (hematoksilen ve eozin) yürütmek.
  7. hayvanlar kurban sol ventrikül ile% 10 tamponlu formalin fiksasyonu takiben% 0.9 NaCI çözeltisi ile asıl bulbus olfaktoryusları alındı. % 0.9 NaCl çözeltisi ile kan kaybından sonra, histolojik değerlendirme 16 sıçan böbreklerinin, kaldırın.
    1. Parafin böbrek Morphol gözlemlemek için 6 mm bölümleri embedogy ve nefrotoksisite. 4 ° C'de 48 saat süre ile, fosfat-tamponlu salin (PBS) içinde% 30 sakroz böbrek dokusu kurutmak. Sonra 4 ° C'de 24-48 saat süreyle% 10 tamponlu formalin bölümleri düzeltmek.
    2. Sonraki, parafin böbrek dokusunu gömmek ve kesit kadar oda sıcaklığında doku parafin blokları saklayın. Ayrıntılı bölüm dokusu parafin kesit makine kullanarak blokları ve kaplamalı cam slayt bölümleri yerleştirin.
    3. bölümünü Deparrafinize ve rehidre ve 3 dakika boyunca Eosin, ardından 10 dakika için hematoksilin ile boyanmıştır. bir slayt bölümleri monte edin ve onları bir kemirgen patolog tarafından değerlendirilmiştir.

5. Veri Hesaplama ve Analiz

  1. Adım 3.2 elde edilen renkli Doppler görüntüleri renal arter pik hızlar hesaplayın. Hız saatler sistolik ve diyastolik hız doruklarına iz İntegral (VTI) aracını seçin.
  2. equatio hesapla Dirençli İndeks (RI) ve Pulsatil İndeksi (PI)Aşağıdaki ns.
    RI = (pik sistolik hız-end diastolik hız) / pik sistolik hız
    PI = (sistolik hız-end diastolik hız) / ortalama hız.
  3. Üç döngü ölçümlerin ortalama ve standart sapmalar RI ve PI sonuçların istatistiksel analiz gerçekleştirin. diğer standart parametreler için, (Malzeme ve Ekipmanları Masa bakınız) özel yazılım kullanarak veri analizi gerçekleştirmek için üreticiden kılavuzuna başvurun.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışmada sunulan görüntüler tek bir operatör tarafından alınmıştır. Tüm görüntüler (Malzeme ve Ekipmanları Masa bakınız) yüksek frekanslı ultrason makinesi kullanılarak toplanmıştır. Tüm görüntüleme verileri tek bir araştırmacı tarafından analiz edilmiştir. Sonuçlar Sisplatin ile tedavi edilen hayvanlar 0.5 gün 6 (Şekil 2A) 2,1 (normal <1.1) kadar SCR olduğunu gösterdi. Bununla birlikte, histolojik çalışmalar, normal tuzlu su muamele edilmiş hayvanlara kıyasla, akut tübül geçiş yaralanma tutarlı desenler gösterdi.

böbrek hemodinamik değişiklikleri ölçmek için yüksek çözünürlüklü ultrason görüntüleme kullanarak, veri pulsus parvus morfolojisi Cisplain tedavi altı gün sonra hayvanların tespit edilirken, gün 0 ve 6 arasında NS ile tedavi edilen hayvanlarda morfolojisinin bir değişiklik olmadığını göstermiştir. Normal RI ve PI üst sınırı sıçanlarda 17, sırasıyla, 0.7 ve 1.15 bulunmaktadır. hemodinamik değerlendirmek için yukarıdaki endeksleri kullanılarak 6. günde Sisplatin ile tedavi edilen hayvanlarda RI ve PI önemli bir artış olduğunu göstermiştir böbrek değişiklikler.

figure-results-1
Şekil sıçanlarda böbrek görüntü tespit edilmesi için 1. Ultrason aygıtı ayarlar. Sıçan böbrek sonografik görüntüleme çalışması sırasında, hayvan aşama (A) ve bir görüntüleme sensörü konumuna (B) 'nin ayarına sahip bir görüntüleme sistemi, grafiksel çizimlerdir. Örnek sonografik görüntüleri yüksek frekanslı, yüksek çözünürlüklü ultrason sistemleri (Malzeme andand Ekipman Tablosuna bakınız) kullanılarak sıçan böbrek elde. (CF). Veriler ayrıca hemodinamik parametre ölçüm ve analiz için yeterli bilgi böbrek damarlarının açık böbrek anatomik yapısını ve kan akışını göstermektedir.09fig1large.jpg "target =" _ blank "> bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.

figure-results-2
Şekil 2. Histoloji ve Böbrek Sisplatin tedavi altında sıçanların sonografik görüntüler. Serum kreatinin (SCR) ve histoloji çalışması Sisplatin tedavi sıçan araçla tedavi sıçan ve şiddetli proksimal tübüler böbrek hasarı (sarı ok) normal böbrek dokusunu sunar (A, B). SCR Sisplatin tedavi sonrası bir oranda artmıştır, ancak normal sınırlar (<1.1) içinde kalmıştır. Aracın ve Sisplatin ile tedavi edilen sıçanlarda (C) sonografi gün 0, 3, Renk-Doppler modunda sıçanların sağ böbreğin görüntüleri ve 6; hemodinamik parametreler, RI ve PI, Renk-Doppler ultrason (D, E) ile değerlendirildi, artan önemli bulunmuştur. Normal RI üst limiti PI 0.7 ve 1.15 olduğunu. Önemli bir şekilde, Tveri üzerinde o bu hemodinamik değişiklikler SCR yükselen öncesinde gösteriyor. Nabız dalga hızı ölçümü histoloji çalışma sonuçları ile korelasyon Sisplatin tedavisi sonrası yavaş ve zayıf nabız (pulsus parvus işareti, sarı daire) göstermektedir. Bu olgu renal arter stenozu, tıkanıklığı ve daha fazla böbrek fonksiyon bozukluğunu gösterir. Histolojik veriler başarılı ilaca bağlı proksimal tübüler böbrek hasarı gösterdi ve sonografik değerlendirme Renk Doppler teknolojisi kullanarak RI, PI ve nabız dalga hızı önemli değişiklikler göstermiştir. N = 3, * p <0.05. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

figure-results-3
İlaca bağlı AKI Tablo 1. Böbrek hemodinamik parametreler

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Son on yılda, pek çok gelişmeler, yüksek kalite, hassasiyet ve doğruluk ile ultrasonografik verileri sunan yüksek frekanslı mekanik problar, geliştirilmesi de dahil olmak üzere sonografik teknoloji meydana gelmiştir. Bu sondalar, böylece bu tür sıçan ve fareler 18 gibi küçük hayvanları incelemek için güçlü bir araç olarak hizmet edebilir, 5 ila 12 mm ve yüksek kare hızları (fazla 200 kare / sn) bir penetrasyon derinliği yaklaşık 50 mikron eksenel çözünürlük sağlayabilir 19. Ayrıca, aynı zamanda fizyolojik düzeyde vital bulgular ile hafifçe sedasyon veya bilinçli hayvanlar üzerinde ultrasonografik görüntüleri toplamak için izin verir. Buna ek olarak, bu non-invaziv yöntem de hayvanlar 19 ödün vermeden hastalığın ilerlemesi sırasında yapısal ve fonksiyonel değişiklikler boyuna değerlendirmesini yapmak için fırsat sağlar.

1959 yılında, Dr. Rusell ve Fırça ilk Awar yükseltmek için üç "R" kurallarına (Yedek, Azaltma ve Arıtma) tarifAraştırmada hayvan kullanımında etik sorunlar eness. önerilen protokol non-invaziv küçük hayvan sonografi can Nephorotoxicity çalışmasında en az ağrı, acı veya sıkıntı altında hayvanların az sayıda kullanır ilk kez gösterir. Nedenle, deney hayvanları için üç "R" kurallarına karşılamak için potansiyel bir etkili bir yöntemdir.

Birçok ultrasonografik çalışmalar kardiyak uygulamalarda odaklanmıştır; Böbrek fonksiyonu değerlendirmeleri genellikle kalp durumu yerine böbrek 20-25 doğrudan çalışma ölçümlerinden elde edilmiştir. Biz gerçek zamanlı olarak böbrekte anatomik ve fonksiyonel değişiklikleri görmenizi bir görüntüleme metodolojisi kurduk. Biz böbrek görünümü için özel tamamlayıcı akustik pencere, gri skala / B Modu ve Renk-Doppler, önceden seçilmiş bir dizi kullanılır. Biz bu endekslerin ve Sisplatin kaynaklı toksisite modelinde böbrek fonksiyon değişiklikleri arasındaki ilişkiyi değerlendirmek için RI ve PI endeksleri kullanılmıştır.

Ancak, aşağıdaki gibi önerilen görüntüleme yöntemleri birkaç zorluklar ve sınırlamalar vardır: 1) Uygun anestezik ajan seçimi ve anestezi derecesi kalp ve solunum istikrar açısından büyük önem taşımaktadır. (Solunum ve kalp hızı dalgalanmalar dahil) Tutarsız fizyolojik bir fenomen renal arter akımını, görüntüleme ve böbrek fonksiyon değerlendirme kalitesini etkileyebilir. Biz IACUC görüntüleme ve böbrek fonksiyon değerlendirme sırasında uygun normal fizyolojik fonksiyonu sağlamak için yedek anestezik ajan olarak enjektabl anestezik ajan, Pentobarbital (50 mg / kg vücut ağırlığı, ip), onaylı kullanacak; göğüs kılları varlığı ultrasonografik görüntü kalitesini etkiler olarak 2) Epilasyon, kritik bir adımdır; 3) böbreklerin sonografi eğitimli operatör için görece kolay olmasına karşın; Ortalama operatör için, bireysel hayvanın eşsiz anatomisi tekniği adapte küçük manipülasyonlar yapmak önemlidir; 4) sıçan büyüklüğü oldukça büyük ise, (3, yukarıda50 gram), daha düşük bir frekans probu (Bu çalışmada 21 MHz kullanılan daha az) en görüntüleme için gerekli olabilir. Görüntüleme sisteminin önerilen operasyon öncesi bir eğitim kursu almak ihtiyatlı olabilir.

Önerilen sonografik metodoloji ve türetilmiş protokolünü kullanarak ilaca bağlı nefrotoksisite tespit yenilik böbrek hasarı durumunda hemodinamik değişikliklerin erken sağlam tespit edilmesidir. Sonuçlar aslında içi renal vasküler hemodinamik değişiklikler yükselen SCR önce olduğunu göstermektedir. Bu veriler histolojik analizi kullanılarak geleneksel altın standarda karşı benchmarked ve küçük hayvan sonografi hayvan kullanımının asgari şartı olan, invaziv olmayan, duyarlı ve tekrarlanabilir bir yöntemdir olduğunu göstermektedir edilir. Bu nedenle fare modeli kullanılarak ilaca bağlı nefrotoksisite erken tespiti için etkili bir araçtır.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Örnek teknik destek için Fred Roberts'a teşekkür ederiz. Brigham Kadın Hastanesi Kardiyovasküler Fizyoloji Çekirdeği'ne bu çalışma için enstrümantasyon ve fon sağladığı için teşekkür ederiz. Bu çalışma kısmen (SUNDRY) HL093148, HL086967 ve Bölüm Fonları NHLBI hibeleri ile desteklenmiştir.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Tüy dökücü kremMiltex, Inc.Cerrahi HazırlıkGörüntülemeden 24 saat önce
uygulayın cis-Diaminplatin (II) diklorürSigma479306Küçük hayvanlarda akut böbrek hasarını indüklemek için.
İzofluranBaxter Uluslararası A.Ş.NDC 10019-773-40İndüksiyon için %2-3 ve bakım için %1-1,5; kalp atışları dakikada 500 atışın üzerinde tutulacaktır
Yüksek Frekanslı UltrasonFUJIFILM VisualSonics, Inc.Vevo 2100
Yüksek Frekanslı Mekanik DönüştürücüFUJIFILM VisualSonics, Inc.MS250, MS550D, MS400

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Bonventre, J. V. Diagnosis of acute kidney injury: from classic parameters to new biomarkers. Contrib Nephrol. 156, 213-219 (2007).
  2. Lerman, L. O., Textor, S. C., Grande, J. P. Mechanisms of tissue injury in renal artery stenosis: ischemia and beyond. Progress in cardiovascular diseases. 52 (3), 196-203 (2009).
  3. Karas, M. G., Kizer, J. R. Echocardiographic assessment of the right ventricle and associated hemodynamics. Progress in cardiovascular diseases. 55 (2), 144-160 (2012).
  4. Milman, Z., et al. Hemodynamic response magnetic resonance imaging: application for renal hemodynamic characterization. Nephrol Dial Transplant. 28, 1150-1156 (2013).
  5. Anavekar, N. S., et al. Usefulness of right ventricular fractional area change to predict death, heart failure, and stroke following myocardial infarction (from the VALIANT ECHO Study). Am J Cardiol. 101 (5), 607-612 (2008).
  6. Lindqvist, P., Calcutteea, A., Henein, M. Echocardiography in the assessment of right heart function. Eur J Echocardiogr. 9 (2), 225-234 (2008).
  7. Sullivan, J. C., et al. Novel use of ultrasound to examine regional blood flow in the mouse kidney. American journal of physiology. Renal physiology. 297, F228-F235 (2009).
  8. Bonnin, P., Sabaa, N., Flamant, M., Debbabi, H., Tharaux, P. L. Ultrasound imaging of renal vaso-occlusive events in transgenic sickle mice exposed to hypoxic stress. Ultrasound Med Biol. 34 (7), 1076-1084 (2008).
  9. Desberg, A. L., et al. Renal artery stenosis: evaluation with color Doppler flow imaging. Radiology. 177 (3), 749-753 (1990).
  10. Ciccone, M. M., et al. The clinical role of contrast-enhanced ultrasound in the evaluation of renal artery stenosis and diagnostic superiority as compared to traditional echo-color-Doppler flow imaging. International angiology : a journal of the International Union of Angiology. 30 (2), 135-139 (2011).
  11. Bauer, M., et al. Echocardiographic speckle-tracking based strain imaging for rapid cardiovascular phenotyping in mice. Circ Res. 108 (8), 908-916 (2011).
  12. Boulikas, T., Vougiouka, M. Recent clinical trials using cisplatin, carboplatin and their combination chemotherapy drugs (review). Oncology reports. 11 (3), 559-595 (2004).
  13. Vaidya, V. S., Ferguson, M. A., Bonventre, J. V. Biomarkers of acute kidney injury. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 48, 463-493 (2008).
  14. Hye Khan, M. A., Abdul Sattar, M., Abdullah, N. A., Johns, E. J. Cisplatin-induced nephrotoxicity causes altered renal hemodynamics in Wistar Kyoto and spontaneously hypertensive rats: role of augmented renal alpha-adrenergic responsiveness. Exp Toxicol Pathol. 59, 253-260 (2007).
  15. Vaidya, V. S., Bonventre, J. V. Mechanistic biomarkers for cytotoxic acute kidney injury. Expert Opin Drug Metab Toxicol. 2 (5), 697-713 (2006).
  16. Lu, T. S., Chen, H. W., Huang, M. H., Wang, S. J., Yang, R. C. Heat shock treatment protects osmotic stress-induced dysfunction of the blood-brain barrier through preservation of tight junction proteins. Cell stress, & chaperones. 9 (4), 369-377 (2004).
  17. Kaya, M. Hemodynamics - New Diagnostic and Therapeutic Approaches. , InTech. 1-30 (2012).
  18. Bjornerheim, R., Grogaard, H. K., Kjekshus, H., Attramadal, H., Smiseth, O. A. High frame rate Doppler echocardiography in the rat: an evaluation of the method. European journal of echocardiography : the journal of the Working Group on Echocardiography of the European Society of Cardiology. 2 (2), 78-87 (2001).
  19. Zhang, L., et al. A high-frequency, high frame rate duplex ultrasound linear array imaging system for small animal imaging. IEEE transactions on ultrasonics, ferroelectrics, and frequency. 57, 1548-1557 (2010).
  20. Frea, S., et al. Echocardiographic evaluation of right ventricular stroke work index in advanced heart failure: a new index? J Card Fail. 18 (12), 886-893 (2012).
  21. Marwick, T. H., Raman, S. V., Carrio, I., Bax, J. J. Recent developments in heart failure imaging. JACC Cardiovasc Imaging. 3 (4), 429-439 (2010).
  22. Pokreisz, P. Pressure overload-induced right ventricular dysfunction and remodelling in experimental pulmonary hypertension: the right heart revisited. Eur Heart J supplements. 9 (Supplement H), H75-H84 (2007).
  23. Senechal, M., et al. A simple Doppler echocardiography method to evaluate pulmonary capillary wedge pressure in patients with atrial fibrillation. Echocardiography. 25 (1), 57-63 (2008).
  24. Souders, C. A., Borg, T. K., Banerjee, I., Baudino, T. A. Pressure overload induces early morphological changes in the heart. Am J Pathol. 181 (4), 1226-1235 (2012).
  25. Tanaka, N., et al. Transthoracic echocardiography in models of cardiac disease in the mouse. Circulation. 94 (5), 1109-1117 (1996).

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Drug Induced NephrotoxicityRenal Hemodynamic DysfunctionHigh Frequency SonographyResistive Index RIPulsatile Index PICisplatin Induced AKIColor Doppler ImagingPeak Systolic VelocityEnd Diastolic VelocityVelocity Time Integral

İlgili makaleler