Bu protokolün amacı, kemirgenlerde iskemik kardiyoplejik arresti takiben miyokardiyal sersemlemeyi değerlendirmektir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Kardiyoplejik Tutuklanma ile Miyokard Çarpıcı İlişkili sıçan İzole Kalp Modeli
Bu makalede
Özet
Özet
Aşağıdaki protokol bozulmuş kardiyak işlev veya miyokard çarpıcı şu ılımlı iskemik hakaret değerlendirmek kullanımı gereksizdir. tekniği Kardiyoplejik tutuklama ve kardiyopulmoner bypass, off-pump KABG, nakli, anjin, kısa iskemi, vb kardiyak cerrahi de dahil olmak üzere çok sayıda klinik açıdan fenomen ile ilişkili iskemik yaralanma modelleme için yararlıdır. protokol miyokard kasılma fonksiyonu ölçümü odaklanan kemirgen kalplerinde hipotermik hiperkalemik kardioplejik tutuklama ve reperfüzyon modeli genel bir yöntem sunar. Kısaca, bir fare, kalp, Langendorff modda perfüze bir intraventriküler balonuyla Araçlı ve temel kardiyak fonksiyonel parametreler kaydedilir. Stabilizasyon sonrasında kalp diyastolik tutuklama başlatmak için kardiyo hipotermik kardiyopleji çözeltisi infüzyonu bilgilendirmek maruz bırakılır. Kardiyopleji 2 saat boyunca aralıklı teslim edilir. Bundan sonra, kalp reperfüzyon ve warme olduğuNormotermik sıcaklık ve miyokard fonksiyon geri d izlenir. Kemirgenlerde brüt miyokardiyal doku hasan serbest güvenilir bir depresif kardiyak kontraktil fonksiyon bu protokol sonuçlanır.
Giriş
Çarpıcı miyokard iskemi veya kardiyo 1,2,3,4,5 ile iskemik hakaret uzun süreli kısa bir süre izleyen yeterli kan akımının restorasyon rağmen geri dönüşümlü azaltılmış kontraktil aktivite olarak tanımlanır. sunulan yöntem, özellikle kasılma fonksiyonunda geri dönüşümlü bozukluklar neden olabilir klinik olarak anlamlı iskemik hakaret modellemek için kullanılır (örneğin, kalp cerrahisi kardiyoplejik arrest, iskemi, anjin, vb kısa dönemleri kullanan ilişkili iskemik hakaret). Şiddetli iskemi çalışmaları (miyokard infarktüsü, nekroz) aksine bu protokol doku hasarı, yeniden ve hücre ölümüne olmadan miyokard fonksiyonel iyileşmeyi ve kardiyo değ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
NOT: Tüm Prosedürler ömrü Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi ve Laboratuvar Hayvanları Bakım ve 10 Kullanımı için Ulusal Araştırma Konseyi Kılavuzu'na göre tüm hayvanlar ve prosedürler ile kabul edildi.
Devre İzleme 1. Balon İmalat ve Sol Ventrikül Basıncı
- Bir karıştırma çubuğu ile bir çanak içinde. Miller ve arkadaşlarına göre 11 LV balon Construct sıcak bir levha üzerinde 9.5 ml damıtılmış su, ışık mısır şurubu ve 14.2 ml sükroz 33.8 g, ve ısı karışımı, şeker eriyene kadar karıştırın . Yaklaşık 150 ºC ulaşana kadar ısıtma çözümü devam edin.
NOT: Çok sayıda yöntemler k....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Şekil 1, bir fare deney gelen tipik sonuçlar verilmektedir. LVP (kırmızı çizgi), dP / dt (yeşil hat) ve sıcaklık (mor hat) continusouly ~ 3 saat boyunca kaydedildi. Mektuplar bir işaret - bazal ölçüm, b, c, d, e - reperfüzyon, g başlangıcında, h, i, j - - reperfüzyon sırasında Koroner akış ölçümü kardiyopleji solüsyonu, f teslim. Not depresif LVDP ve başlangıca kıyasla reperfüzyon üzerine dP / dt. Şekil 1B A üzerine kaydedilmiş ~ 2 sn veri içerir. Not LVP azalma ve A benzer dt dP / LVED.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
önceki protokol ayrıntıları yöntemler kardiyoplejik arrest ile ilişkili global iskemi miyokard çarpıcı ikincil değerlendirmek için. Bizim ellerde bu protokol kalp fonksiyonunda bir ~ yaklaşık% 40 azalma meydana (LVDP, +/- dP / dt) 30 dakika sonrası reperfüzyon zaman noktasında kalp hızında küçük değişikliklerle. Kalp reperfüzyon ve rewarmed gibi kardiyak fonksiyon tüm parametreleri en az 20 ila 30 stabilize önce büyük oranda azaltılmış kalp hızı ile ilk zaman noktalarında azalır. Koroner akış 30 dakika iskemi sonrası re.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Kardiyopleji Çözeltisi (St Thomas II) | Sembol / Konsantrasyonlar (mM) | ||
| Sodyum Klorür | NaCl; 110 | ||
| Potasyum klorür | KCl; 16 | ||
| Kalsiyum Klorür | CaCL2; 1.5 | ||
| Magnezyum Klorür | MgCL2; 16 | ||
| Sodyum Bikarbonat | NaHCO3; 10 | ||
| Krebs-Heinslet Tamponu | |||
| Sodyum Klorür | NaCl; 118 | ||
| Potasyum Klorür | KCl; 4.8 | ||
| Magnezyum Sülfat | MgSO4; 1.7 | ||
| Sodyum Bikarbonat | NaHCO3; 24.9 | ||
| Potasyum Fosfat (monobazik) | KH2PO4; 1.2 | ||
| Kalsiyum Klorür | CaCL2; 1.4 | ||
| Sodyum Pirüvat | Na piruvat; 2 | ||
| Glikoz | C6H12O6; 6 | ||
| Balon reaktifleri | |||
| Mısır Şurubu | |||
| Spagetti | |||
| Silikon Dispersiyon Jeli Strafor | |||
| Blok | |||
| laboratuvar fırını / inkübatörü ( 50C) | |||
| Langendorff Perfüzyon ekipmanı | |||
| İzole perfüze kalp sistemi (IH-SR (Hugo-Sachs) veya eşdeğeri) | |||
| Isıtmalı su sirkülatörü | |||
| Soğutma suyu sirkülatörü | |||
| 2-30 ml/dk | |||
| Hat içi perfüzyon filtreleri - 1 um cam elyaf | |||
| LVP ve perfüzyon basıncı | |||
| Küçük dereceli silindir (~10 mL) | |||
| Küçük sıcaklık probu ve termometre (Werner veya eşdeğer) | |||
| perfüzyon resevoir (1L) | |||
| kardiyopleji resevoir (~200 mL) | |||
| gaz fıskiye | |||
| 95/5 O2/CO2 karışımı | |||
| Cerrahi aletler ve reaktifler | |||
| Metzenbaum ve Potz cerrahi makas | |||
| iki Dumont numara 5 forseps | |||
| ketamin | |||
| ksilazin, | |||
| heparin | |||
| aortu tutmak için yumuşak kenarlı küçük klemp (yani uçları bantlanmış terminal klemp) | |||
| İpek 2-0 ve 4-0 dikişler |
Kaynaklar
- Kloner, R. a, Jennings, R. B. Consequences of Brief Ischemia: Stunning, Preconditioning, and Their Clinical Implications: Part 1. Circulation. 104 (24), 2981-2989 (2001).
- Mentzer, R. M. Myocardial protection in heart surgery. J Cardiovasc Pharmacol Th....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
