Karaciğer naklinde mevcut organ koruma yöntemi, donör karaciğerlerin soğuk (0-4 °C) koruma sıvısı (University of Wisconsin solüsyonu veya Histidin-Triptofan-Ketoglutarat solüsyonu gibi) ile yıkanması ve ardından saklanmasıdır. Bu yöntem statik soğuk saklama (SCS) olarak adlandırılır. 0-4 °C'deki karaciğerlerin metabolik hızı çok düşük olsa da, hala 0.27 µmol oksijen/dak/g karaciğer dokusu miktarına ihtiyaç duyulmaktadır ve bu miktar SCS sırasında karşılanamamaktadır1. Bu nedenle, geleneksel SCS yöntemi, donör karaciğerlerde bir dereceye kadar (ek) hasara yol açar. Koruma hasarının bu miktarı yüksek kaliteli donör karaciğerlerde bir sorun teşkil etmese de, donörde halihazırda bir dereceye kadar hasar görmüş suboptimal karaciğerlerde kritik ve sınırlayıcı bir faktör haline gelebilir. Bu nedenle, suboptimal kalitedeki karaciğerler veya sözde genişletilmiş kriter donörü (ECD) karaciğerleri, erken greft yetmezliği riskinin çok yüksek olduğu düşünüldüğü için sıklıkla nakil için reddedilir. Dolaşım sonrası ölümden sonra bağışlanan (DCD) karaciğerleri, yaşlı donörleri veya steatotik greft alan alıcılarıyla ilgili olarak yüksek oranlarda gecikmiş greft fonksiyonu, primer fonksiyon kaybı ve non-anastomotik biliyer striktürler (NAS) tanımlanmıştır2. NAS, karaciğer nakli sonrası morbidite ve mortalitenin ana nedenlerinden biridir. NAS, donörün hem ekstrahepatik hem de intrahepatik safra kanallarında meydana gelebilir ve kanal içi biliyer çamur ve kalıp oluşumu ile birlikte seyredebilir3,4. NAS etiyolojisinin multifaktöriyel olduğu düşünülse de, greft koruma ve transplantasyon sırasında safra kanallarının iskemi/reperfüzyon hasarı, temel bir mekanizma olarak tanımlanmıştır2,5. DCD greft transplantasyonu, NAS gelişimi için en güçlü risk faktörlerinden biri olarak belirlenmiştir. DCD donörde bir sıcak iskemi dönemi, organ koruma sırasında soğuk iskemi ve ardından alıcıda reperfüzyon hasarının kombinasyonunun, safra kanallarında geri dönüşümsüz hasardan sorumlu olduğu ve safra kanallarının zayıf rejeneratif kapasitesi ile birleştiğinde karaciğer nakli sonrası fibrotik skarlara ve safra kanallarının daralmasına yol açtığı düşünülmektedir2,5. DCD karaciğer alan hastaların %30'ına kadarında NAS rapor edilmiştir6-8. Nakil için karaciğer greftlerinin mevcut SCS yönteminin, DCD donörlerden gelenler gibi önceden hasarlı ECD karaciğerler için yetersiz olduğu açıkça görülmüştür. ECD karaciğerlerin transplantasyonda kullanımını artırmak ve optimize etmek için alternatif yöntemlere ihtiyaç vardır.
Makine perfüzyonu (MP), SCS ile karşılaştırıldığında donör organların daha iyi korunmasını sağlayabilen bir organ koruma yöntemidir. MP, özellikle ECD greftlerin korunması için uygun olabilir. MP'nin önemli bir avantajı, koruma süresince grefte oksijen sağlama imkanıdır. MP; hipotermik (0-10 °C), subnormotermik (10-36 °C) ve normotermik (36-37 °C) MP (NMP) olarak sınıflandırılan çeşitli sıcaklıklarda gerçekleştirilebilir. MP için kullanılan sıcaklığa bağlı olarak perfüzyon sıvısının türü ayarlanmalıdır ve sıcaklık arttıkça daha fazla oksijen sağlanmalıdır. İnsan karaciğer naklinde MP'nin ilk klinik uygulaması, perfüzyon sıvısının aktif oksijenasyonu olmadan hipotermik perfüzyona dayanmaktaydı9,10. Hayvan modellerinde, hipotermik oksijenli MP'nin (0-10 °C), karaciğer greftlerinin iskemi/reperfüzyon hasarına karşı koruyucu etkileri olduğu11 ve safra kanallarının peribiliyer vasküler pleksusunun daha iyi korunmasını sağladığı gösterilmiştir12. 20 °C veya 30 °C'de subnormotermik oksijenli MP de hayvan modellerinde çalışılmış ve SCS ile karşılaştırıldığında, DCD karaciğerlerin greft fonksiyonlarının daha erken toparlanmasını sağladığı gösterilmiştir13,14. İnsan karaciğerlerinde subnormotermik oksijenli MP'nin fizibilitesi yakın zamanda yedi adet reddedilmiş insan donör karaciğer serisinde rapor edilmiştir15. NMP (37 °C), transplantasyon öncesinde greft canlılığının ve fonksiyonelliğinin değerlendirilmesine olanak tanır16,17. Ayrıca MP, karaciğer greftinin transplantasyon öncesinde kademeli olarak yeniden ısınmasını sağlar; bunun greftin toparlanmasını ve canlandırılmasını kolaylaştırdığı kanıtlanmıştır18.
Mevcut protokolde hepatik makine perfüzyonu için kullanılan perfüzyon cihazı, sürekli portal akış ve pulsatif arteriyel akış sağlayan iki santrifüj pompa aracılığıyla çift perfüzyona (portal ven ve hepatik arter yoluyla) olanak tanır. Sistem basınç kontrollüdür ve intrahepatik dirence bağlı olarak karaciğer boyunca akışın otoregülasyonuna izin verir. İki içi boş fiber membran oksijenatör, karaciğer greftinin oksijenlenmesinin yanı sıra CO2 uzaklaştırılmasını sağlar. Sıcaklık, hedeflenen MP tipine göre ayarlanabilir (minimum sıcaklık 10 °C). Akış, basınç ve sıcaklık, perfüzyon sürecinin sürekli kontrolünü sağlayacak şekilde cihaz üzerinde gerçek zamanlı olarak görüntülenir. Her greftin perfüzyonu için yeni, steril, tek kullanımlık bir tüp seti, rezervuar ve oksijenatör grubu mevcuttur (Şekil 1).
Bu video makalesinin amacı, yeni geliştirilen bu karaciğer perfüzyon makinesi kullanılarak insan donör karaciğerlerinin ex situ normotermik makine perfüzyonu için adım adım bir protokol sunmaktır.

Şekil 1: (A) şematik bir çizim, (B) perfüzyon makinesinin bir fotoğrafı, (C) oksijenatörün yakından görünümü ve (D) insan donör karaciğerlerinin normotermik perfüzyonu için kullanılan santrifüj pompa. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.