Burada, yüksek çözünürlüklü kızılötesi termografi (HRIT) kullanarak bitkilerde buz oluşum alanlarını ve buz yayılma yollarını görselleştirmeye izin veren bir protokol sunuyoruz.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Burada, yüksek çözünürlüklü kızılötesi termografi (HRIT) kullanarak bitkilerde buz oluşum alanlarını ve buz yayılma yollarını görselleştirmeye izin veren bir protokol sunuyoruz.
Bitkiler aktif olarak büyürken meydana gelen donma olayları, özellikle bitkinin donma toleransı yoksa ölümcül bir olay olabilir. Bu tür don olayları genellikle tarımsal üretim üzerinde yıkıcı etkilere sahiptir ve ayrıca özellikle alp, alt arktik ve arktik ekosistemlerde doğal bitki popülasyonlarında topluluk yapısını şekillendirmede önemli bir rol oynayabilir. Bu nedenle, bitkilerde dondurma işleminin daha iyi anlaşılması, dondan korunma yöntemlerinin geliştirilmesinde ve donmadan kaçınma mekanizmalarının anlaşılmasında önemli bir rol oynayabilir. Burada, yüksek çözünürlüklü kızılötesi termografi (HRIT) kullanarak tesislerde dondurma sürecini görselleştirmek için bir protokol açıklıyoruz. Bu teknolojinin kullanılması, bitkilerde birincil buz oluşum yerlerini, buzun nasıl yayıldığını ve buz bariyerlerinin varlığını belirlemeye izin verir. Ayrıca, bitkilerin donma sıcaklığının belirlenmesinde dışsal ve içsel nükleatörlerin rolünün incelenmesine ve çeşitli bileşiklerin donma sürecini etkileme veya donma toleransını artırma yeteneğinin değerlendirilmesine olanak tanır. HRIT kullanımı, bitkilerde evrimleşen, donma sürecini doğrudan veya dolaylı olarak etkileyen ve nihayetinde bitkilerin don olaylarında hayatta kalmasını sağlayan birçok adaptasyonun görselleştirilmesini sağlar.
Bitkilerin aktif büyüyor meydana dondurucu soğuklar bitki çok az veya hiç donma toleransının sahip, özellikle öldürücü olabilir. Böyle don olayları sık sık tarımsal üretim üzerinde yıkıcı etkileri ve özellikle alpin, alt-arktik ve arktik ekosistemler 1-6, bitkilerin doğal popülasyonlarında toplum yapısının şekillenmesinde önemli bir rol oynayabilir. Şiddetli ilkbahar donlarından Episodes son yıllarda 7-9 ABD ve Güney Amerika'da meyve üretiminde önemli etkileri vardı ve daha tipik ortalama düşük sıcaklıklarda ardından sıcak hava erken başlangıçlı şiddetlenir edilmiştir. Erken sıcak hava no frost hoşgörü 1,3,10-12 çok az var hepsi yeni sürgünler, yapraklar, çiçekler ve büyümesini aktive kırmak için tomurcukları neden olur. Böyle düzensiz hava desenleri devam eden iklim değişikliği doğrudan yansıması olduğu bildirilmiştir ve ormanının için ortak bir hava desen olması bekleniyoreeable gelecek 13. Artan don toleransı sağlayabilir, ekonomik, etkili ve çevre dostu yönetim teknikleri ya da agrokimyasallar sağlamak için çabalar nedenlerle bir dizi için sınırlı bir başarı oldu ama bu kısmen tolerans donma ve bitkilerde kaçınma mekanizmaları donma karmaşık doğası isnat edilebilir. 14
Bitkilerde don sağkalım ile ilişkili adaptif mekanizmalar geleneksel hoşgörü dondurma ve kaçınma dondurma, iki kategoriye ayrılır oylandı. Birinci kategori bitkilerin varlığı ve dokuları buz dehidratif etkisiyle ilişkili stresini tolere izin spesifik bir gen grubu ile düzenlenir biyokimyasal mekanizmaları ile ilişkilidir. İkinci kategori, tipik olarak, ama sadece değil, bir bitkinin 14 yapısal olmadığını belirlemek, bir bitkinin yönleri ve buz formları ile ilişkili iken. Bir reklam dondurarak kaçınma yaygınlığı rağmenaptive mekanizma, az araştırma altında yatan mekanizmaları ve donma kaçınma düzenleme anlamak için son zamanlarda tahsis edilmiştir. okuyucu bu konuda daha ayrıntılı bilgi için, bir son gözden 15 olarak adlandırılır.
Düşük sıcaklıklarda buz oluşumu basit bir süreç gibi görünse de, birçok faktör bitkinin içinde yayılır bitki dokularında hangi buz çekirdekleşirken ve nasıl sıcaklığın belirlenmesinde katkıda bulunur. Böyle çekirdek oluşturucularının Dışsal ve içsel buz varlığı, heterojen vs homojen çekirdeklenme olayları, termal-histerezis (antifriz) proteinler, belirli şekerler ve diğer osmolitler varlığı ve bitkinin yapısal yönlerini bir dizi gibi parametreler geleni önemli oynamak Bitkilerde dondurma işleminde rolü. Topluca, bu parametreler buz başlatmış ve büyür nasıl nerede bir bitki, donuyor hangi sıcaklığı etkiler. Ayrıca, elde edilen, buz kristallerinin morfolojisi etkileyebilir.Çeşitli yöntemler LTSEM'ye (nükleer manyetik rezonans spektroskopi (NMR), 16, manyetik rezonans görüntüleme (MRI), 17, kriyo-mikroskopi 18-19, ve düşük sıcaklık tarama elektron mikroskopisi de dahil olmak üzere laboratuar koşulları altında bitkilerde dondurma işlemi incelemek için kullanılmıştır ). laboratuvar ve saha ortamlarında tüm bitkilerin 20 Donma, ancak esas termokupl ile takip edilmektedir. dondurma incelemek için termokupl kullanımı su, katı bir sıvı bir faz geçişi uğrar ısı kurtuluş (füzyon entalpisi) dayanmaktadır. Donma sonra ekzotermik olay olarak kaydedilir. 21-23 termokuplar bitkilerde donma okuyan tercih tipik yöntemi olmasına rağmen, bunların kullanımı bir donma olayı sırasında elde edilen bilgilerin miktarını sınırlamak birçok sınırlamalar vardır. Örneğin, termokupl ile o yayar nasıl buz, bitkilerde başlatılan yeri belirlemek için neredeyse imkansız zordur,bir hatta hızında yayılır eğer ve bazı dokular buz serbest kalırsa.
Yüksek çözünürlüklü kızılötesi termografi (HRIT) 24-27 Gelişmeler Bununla birlikte, önemli ölçüde bir diferansiyel görüntüleme modunda kullanıldığında, özellikle bütün bitkilerde donma süreci hakkında bilgi edinmek için yeteneğini artırmıştır. 28-33, mevcut raporda, donma sürecinin çeşitli yönlerini nerede ve ne sıcaklık buz at bitkilerde başlatılan etkileyen çeşitli parametreleri incelemek için bu teknolojinin kullanımını tarif eder. Bir protokol yüksek, sıfırın altındaki bir sıcaklıkta otsu bitkiye dondurma başlatan bir dış çekirdek oluşturucu olarak hareket etmek buz çekirdeklenme aktif (INA) bakterinin yeteneğinin, Pseudomonas syringae (Cit-7) göstermektedir ki sunulacaktır.
Yüksek çözünürlüklü kızılötesi kamera
Bu raporda belgelenen protokol ve örnekler kızılötesi yüksek çözünürlük kullananVideo radyometre. radyometre (Şekil 1), kızılötesi ve görünür spektrum görüntü ve sıcaklık verileri bir kombinasyonunu temin eder. Kameranın spektral tepkisi 7,5-13,5 um aralığındadır ve 640 x 480 piksel çözünürlükte içerir. Tarafından oluşturulan görünür spektrum görüntüleri dahili kamera kompleksi, termal görüntülerin yorumlanmasını kolaylaştıran gerçek zamanlı, IR görüntüleri ile kaynaşmış olabilir. Kamera için lensler bir dizi close-up ve mikroskobik incelemelerde bulunmak için kullanılabilir. Kamera bir stand-alone modunda kullanılan, ya da arabirim ve propietary yazılımını kullanarak bir dizüstü bilgisayar ile kontrol edilebilir. yazılımı kaydedildi videoları yerleşmiş olan termal çeşitli verileri elde etmek için kullanılabilir. Bu kızılötesi ışıma ölçerlerin geniş bir yelpazede piyasada mevcut olduğunu not etmek önemlidir. Bu nedenle, araştırmacı bilgili bir ürün mühendisi ile amaçlanan uygulama tartışmak ve araştırmacı herhangi specifi yeteneğini test esastırc radyometre gerekli bilgileri sağlamak. açıklanan protokol kullanılan görüntüleme radyometre akrilik kutusunda Strafor i n ısınma ve soğutma protokolleri esnasında yoğunlaşma maruziyeti caydırmak amacıyla yalıtılmış (Şekil 2) yerleştirilir. Bu koruma, tüm kameralar ya da uygulamalar için gerekli değildir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bitki Materyallerinin Hazırlanması 1.
Buz Çekirdeklenme Aktif (INA) Bakteri İçeren Su Çözümleri 2. Hazırlık
3. Donma Deneme Oluşturma
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Ice + bakteri buz çekirdeklendirici aktivitesi Pseudomonas syringae (suş Cit-7)
10 ul su damlası ve P. ihtiva eden su içinde 10 ul syringae (Cit-7), bir Hosta yaprağın alt yüzeyi üzerine yerleştirilmiştir (Hosta spp.) (Şekil 4). Gösterildiği gibi, INA bakteriler içeren su damlası, ilk dondu ve yaprak yüzeyi üzerindeki suyun damla donmamış kalırken dondurmak için yaprak indüklemek için sorumludur.
Bir Woody Fabr...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Kuyu, 0 ° C'nin altındaki sıcaklıklarda ve su oldukça değişken olabilir donacağı sıcaklığa süper-soğutmaya tabi yeteneğine sahiptir. Saf su süper-36 sıcaklık limiti yaklaşık -40 ° C'dir ve homojen çekirdekleşme noktası olarak tanımlanmaktadır. Sıcak sıcaklıklarda su donmakta daha -40 ° C ila daha sonra buz oluşumu ve büyümesi için bir katalizör olarak hizmet eden oluşturulması için küçük buz embriyolar etkinleştirmek çekirdek oluşturucularının heterojen varlığı ile ortaya zaman. 37 doğada m...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarlarını ya da çıkar çatışmalarının var.
P23681-B16: Bu araştırma, Avusturya Bilim Fonu'nun (FWF) tarafından finanse edildi.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Kızılötesi Kamera | FLIR | SC-660 | Uygulamaya bağlı olarak birçok model mevcuttur |
| Kızılötesi Analitik Yazılım | FLIR | ResearchIR 4.10.2.5 | $3,500 |
| Pseudomonas syringae (suşu Cit-7) | Nazikçe California Üniversitesi'nden Dr. Steven Lindow tarafından sağlanmıştır; Berkeley icelab@berkeley.edu | ||
| Pseudomonas Agar F | Fisher Bilimsel | DF0448-17-1 |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.