Bir Zenginleştirilmiş Ortamında Konut Fareler için Protokol

Özet

Fareler için çevresel zenginleştirme, farelerde sağlam metabolik ve anti-kanser etkileri sağlamak için karmaşık ve zorlu bir kurulumun yanı sıra kapsamlı yetiştirme ve işleme teknikleri gerektirir. Bu protokol, farelerde yukarıda belirtilen etkileri yeniden üretmek için ayrıntılı prosedürler sağlar.

Özet

Çevresel zenginleştirme (EE), standart laboratuvar konutlarına kıyasla zihinsel ve fiziksel sağlığı artıran fareler için bir barınma ortamıdır. Son çalışmalarımız, çevresel zenginleştirmenin yağlanmayı azalttığını, enerji harcamasını artırdığını, diyete bağlı obeziteye direndiğini ve farelerde kanser remisyonuna ve inhibisyonuna neden olduğunu göstermektedir. EE tipik olarak daha büyük yaşam alanı, etkileşimde bulunulacak çeşitli 'oyuncaklar', çalışan tekerleklerden oluşur ve bir dizi başka yeni çevresel değişikliği içerebilir. Bütün bunlar daha karmaşık bir sosyal katılımı, bilişsel ve fiziksel uyarımları teşvik eder. Daha da önemlisi, oyuncağın yeri ve türü düzenli olarak değiştirilir, bu da fareleri sık sık değişen ve yeni bir ortama uyum sağlamaya teşvik eder. Farelerde sağlık etkilerini teşvik etmek için EE'de birçok değişken manipüle edilebilir. Bu nedenle, bu yaklaşımların kontrol edilmesi zordur ve ilişkili fenotipleri başarılı bir şekilde çoğaltmak için uygun şekilde yönetilmelidir. Bu nedenle, bu videonun amacı, diğer araştırmacıların EE'nin obezite ve kansere karşı koruyucu etkilerini kolayca yeniden üretebilmeleri için karmaşık, zorlu ve kontrollü bir ortam sağlamak için EE'nin nasıl düzgün bir şekilde kurulduğunu ve sürdürüldüğünü göstermektir.

Giriş

Çevresel zenginleştirme (EE) hayvanlar ¹ stres değil, karmaşık ve zorlu bir ortamda etkilerini araştırmak için kullanılan deneysel bir paradigma. EE sırayla duyusal, bilişsel, motor, sosyal stimülasyon ² artar artan boşluk, fiziksel aktivite ve sosyal etkileşimler, oluşan bir hayvan konut tekniğidir. Konut ortamında Depoları, çalışan tekerlekler, daire jantlar, tüp labirentine ve diğer nesneleri keşif ve etkileşim teşvik ederek bu duyusal bilişsel, sosyal ve motor stimülasyonu teşvik. muhafaza değişiklikleri nesnelerin yerleşimi düzenli fareler uyarlamak zorunda olduğu bir roman ortamı sunmak. Bu strateji, daha caydırıcı, düşmanca bir ortamda ya da uyumsuz sıkıntı ^3,4 aksine, eustress olarak bilinen, yararlı iyi huylu ve sağlıklı adaptif tepkiyi, teşvik hafif ve kısa zorluklar sunuyor. , Fareler eustress teşvik ve zararlı sıkıntı sınırlayarakolumlu fenotip bir çeşitlilik göstermektedir.

Geleneksel olarak stresli ¹ düşünce unsurları yoksun olurken EE, geniş bir uygulama yelpazesi ile güvenilir bir deneysel model. kemirgenler üzerinde EE etkileri daha yarım yüzyıl için çalışılmıştır. 1960'ların başında çalışmalar kortikal kolinesteraz düzeyleri azalmış ve subkortikal kolinesteraz düzeyleri artan yaşam alanı, sıçan sayısının artması ve ahşap oyuncaklar, labirentine ve platformların ^5,6 çeşitli ortamlarda muhafaza edilmiş sıçanlarda arttığını gösterdi. Buna ek olarak, EE farklı yaş ve genetik arka farelerde beyin, davranış ve metabolizmasında pek çok uyarlanabilir değişikliklerle ilişkilidir. Bu nedenle, EE fareler üzerinde çevrenin etkisini inceleyerek deneyler geniş bir kapsam için yararlı bir paradigma olduğunu. EE etkileri bir haftalık maruz olduğu kadar hızlı farelerde gözlenen edilebilir ve on sekiz ay ⁷ kadar eski hayvanlarda görülmektedir. EE u genelliklefonksiyonun kurtarma, öğrenme ve hafıza ² incelemek için nörobilim ve nörodavranışsal deneylerde sed. Ayrıca, EE toksin kaynaklı ve Huntington hastalığı, Alzheimer hastalığı, Parkinson hastalığı, epilepsi, felç dahil olmak üzere insan nörolojik hastalıkların transgenik hayvan modelleri çeşitli fenotipi üzerinde önemli bir etkisi vardır ve ² daha fazla.

Ancak, yıllar içinde zenginleştirme tasarımı zor farklı laboratuvarlardan çalışmalar arasında karşılaştırma yapma tutarsızlık olmuştur. Örneğin, yukarıda adı geçen insan nörolojik hastalıklara göre EE etkileri ile ilgili çalışmalar her zenginleşmesine parametreleri değiştirilerek vardı. Huntington hastalığı üzerine çalışma iki günde ^8,9 değişti karton kutular, tüneller ve yaprak içeren büyük kafeslerde (44 x 28 x 12.5 cm ³⁾ yanı sıra, ahşap ve plastik nesneleri 4-6 fareler yer. Alzheimer üzerinde yapılan çalışmalardan biri# 8217; s 2 çalışan jantlar, plastik tüpler, karton kutular ve değiştirilemez veya ¹⁰ haftalık yeniden düzenlenmiştir yuvalama malzeme içeren daha geniş bir kafes (1 m ³⁾ 20 fareler barındırdı. EE Birçok kurulumları gibi çalıştırmak veya gizlemek için nesneler olarak benzer temalar var, henüz EE konut, yaşam alanı başına düşen farelerin sayısı ve çevreyi değiştirme süresi çok değişir.

EE tutarsız tasarımlar EE etkileri başarısız çoğaltma yol açmıştır. Kanser ve metabolizması üzerindeki Verilerimiz birlikte göstermektedir ki önemli anti-kanser ve anti-obezite etkileri ^14,15 için aşağıdaki ayrıntılı EE muhafaza protokolü kurşun sağlanan uyarıların kombinasyonu. Ancak, birinde görüldüğü gibi, EE sonuçlarını etkileyebilecek farklı laboratuvarlar tarafından benimsenen EE ayarlarının fark farelerde ¹¹ implante spesifik kanser tümörlerinin büyümesi üzerine EE etkilerini çoğaltmak girişimi başarısız oldu. Farklı sonuçlar fro değişen çeşitli nedenlerle nedeniyle olabilirkonut ekipmanları ¹¹ temizliği için kullanılan deterjan türüne tümör hücre kültürlerinin farklı büyüme oranlarını m. Bizim deneylerde görülen sonuçların çoğaltmak amacıyla, zenginleştirme ve hayvancılığın belirli bir tasarım gereklidir. Aşağıdaki prosedür, diğer araştırmacılar başarıyla etkili zenginleştirme modeli tekrarlamayı sağlayacak EE konut ayrıntıları.

Protokol

Aşağıda açıklanan prosedürler Ohio State Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır.

Konut Fareler için Zenginleştirilmiş Çevre 1. Hazırlık önce

1. Temizlik ve enstrümanların bulundurulmasına.
   1. Bir kafes yıkama yoluyla büyük zenginleştirme bin (120 cm x 90 cm x 76 cm) çalıştırın. Tipik Hayvan Tesisi kafes yıkama protokolü 82 ºC ulaşan son döngü ile 5 ila 6 yıkama döngüleri içerir. Bütün yıkama yaklaşık 40 dakika sürer. Bin Hava kurutun.
      1. Büyük zenginleştirme bin ve diğer konut aletleri, kafes yıkama yoluyla gönderilen edilemezse, o zaman sprey ve üreticinin talimatlarına sporisidal dezenfektanlarla bin içini silin. Bir önceki dezenfektan herhangi kokusu kurtulmak için bir kağıt havlu ile bir musluk suyu batırılmış kağıt havlu ya da% 30 etanol ve kuru ile bin siliniz.
   2. Kullanım plastic boru, daire tipi tekerlekli igloos ve EE diğer çeşitli plastik dolap gibi oyuncaklar. Bir kafes yıkama yoluyla bu oyuncakları yıkayın. Bir kafes yıkama takip adımı 1.1.1.1 erişiminiz yoksa.
   3. EE metal çalışan tekerlekleri kullanın. Bir kafes yıkama yoluyla tekerlekleri yıkayın. Tekerlekler üzerinde boya böylece hayvanların üzerinde çalıştırdığınızda tekerlek gürültülü olur solmaya başlarsa, tekerlek ve axel bağlamak nerede küçük bir miktar vazelin uygulayın.
   4. EE ahşap günlükleri kullanın. Elle herhangi yataklar ya da diğer enkaz kaldırarak günlükleri temizleyin. Daha sonra 15 dakika boyunca 121 ° C bir sıcaklığa ulaşıncaya kuru çevrim ya da tekstil döngüsü, bunları otoklav ile sterilize günlükleri.
   5. Bir beslenme ve içme tel kafes için ön alt dışında bir delik çapı en az 5 cm rack.Cut tutmak için 29 cm x 18 cm x 12.5 cm x 19 cm x 14 cm 30.5 cm boyutları arasındaki kafesleri kullanın fareler EE gelen ve dışarı çıkmak için. Kafes yıkama yoluyla bu beslenme kafesleri temizleyin.
2. Çevreyi ayarlama
   1. Büyük zenginleştirme kutusu içine ¼ inçlik mısır koçanı laboratuvar hayvanları yatak dökün. Yatak takımları ile 2-2.5 cm derinliğe kadar bin tüm zemin yüzeyini kaplayan.
   2. Bin bir köşesinde iki ya da üç günlükleri yerleştirin. Köşedeki yerleştirin günlükleri yaklaşık 1.225 cm ² lik bir alanı ayırmak için. Günlükleri tarafından tecrit alanda, üstüne tabak tekerlekli üç igloos yerleştirin. Tekerleklerin serbestçe dönmeye için yeterli oda var ki jantlar, bin, günlükleri, ya da birbirlerinin duvarlarına temas etmediğinden emin olun.
   3. Adet birlikte plastik boru, böylece centeral bağlama parçasının dışarı birden silah dalı. Bin ortasında bu boru yerleştirin.
   4. Bin iki köşelerinde, tek besleme kafesi bin ile aynı yatak ile dolu her yer ve beslenme kafesin önünde delik bin merkezine doğru dönük olmalıdır. Bu beslenme kafeslerde temiz gıda ve su tel üstündeyiyecek ve su tutmaya konulmalıdır. Kafes üzerinde herhangi bir kapağı koymayın. Kafes teller yiyecek ve su koyun.
   5. Birbirine olsa gelecek değil, tüm bin üç metal jantlar yerleştirin. tekerleklerin üç farklı biri 11.5 cm tekerleği, tek 20,5 cm tekerlek ve bir 28 cm tekerleği vardır. Ardından zenginleştirme bin genelinde 4-5 daha plastik dolap gibi oyuncak ya da tüneller yerleştirin.
   6. Mikro-izolatör filtre kağıdı ile bin örtün. Bin filtre kağıdının klibi için bağlayıcı klipleri kullanın.
   7. Yenilik EE önemlidir. Hayvanlar için yeni bir ortam yaratmak için EE çerçevesinde bu kurulum kullanın ve yukarıda belirtilen kafeslerde, nesneler ve oyuncak yerleştirme değişir.

2. Konut Hayvanlar

1. EE düzenli laboratuvar konut ve deneyler için hayvanların Breed. İsteğe bağlı olarak, sütten üzerine EE yaş gibi erken 21 olarak gün hayvanları yerleştirin. Önce EE konut Genotip ve kulak delme / etiket hayvanlar.
2. YerleştirirkenHayvanlar zenginleştirme kutusuna standart kafes serbestçe hareket edebilir, böylece standart bir kafes zenginleştirme kutusu içine hayvanlar, yan bin kafesini yerleştirin. Yuvalama materyalleri zenginleştirme kutusu içine transfer edilmesine izin vermeyin.
3. Ev EE aynı yaş, cinsiyet ve genetik gerginlik 10-20 hayvanlar.

3. Ortamı bakımı ve Çalışmalar sırasında Fare gözlemleme

1. Günlük
   1. Sessizce hastalık ya da sıkıntı belirtileri hayvanları gözlemlemek. Gerekirse, yavaşça ileri sağlık koşulları incelemek için hayvanları anlaştım. Tutanak anormal gözlem ve deney çıkarılmasını gerektiren hayvan görüntüler koşulları eğer bir sağlık teknisyeni veya veteriner personeli danışın.
   2. Küçük yaralar ya da grev kırıcılar için üçlü anti-biyotik merhem topikal tedavi sağlamak. Bir hayvan kronik bir hastalık ya da yaralanma nedeniyle kaldırılması gerekiyor ise ötenazi için deney hayvan kaldırmak. Hayvanların Eğergeri EE hayvanların iade yok nezaret hayvan araştırma bakım komitesi veya veteriner erken çıkarma kriterleri karşılamak.
2. Haftada iki kez
   1. Yem ve su seviyelerini kontrol edin. Bu besleme sağlanması ve su önümüzdeki 3-4 gün sürecek. Bunlar yayılır ve fareler tarafından kullanılabilir, böylece çalışan tekerlekler ve zenginleştirme oyuncakları düzleştirin. Çok kirli olduğunu herhangi değiştirin.
3. Haftalık
   1. Temiz su şişeleri ile su şişeleri değiştirin. Bölüm 1.2'de kurulum izleyen bir şekilde zenginleştirme cihazları yeniden düzenleyin. Henüz geçen hafta kurulumu farklıdır.
      NOT: Bir deney bir faaliyet için zenginleştirilmiş bir ortamda kaldırılacak hayvanları gerektiriyorsa (vücut ağırlığı, kan beraberlik, davranış testi, vb kayıt) o hayvanların uzak zenginleştirme kutusundan ise çevreyi yeniden düzenlemek için en iyisidir.
   2. Elle EE besleme kafesleri temizleyin ya da kafes yıkama yoluyla göndermekolarak Bölüm 1.1.5 ayrıntılı. Hem de temiz tel raflar ile yiyecek ve su tutun tel rafları değiştirin.
   3. Bölüm 2.2'de talimatları uygulayın. zenginleştirme geri hayvanları yerleştirirken. Gerekirse kirli çöp dışarı karıştırıyordu ve yeni temiz yatak aşağı yayarak, geniş zenginleştirme bin ve temiz geri kalanını kontrol nokta.
4. İki haftalık
   1. Haftalık yetiştiriciliği yapılırken, elle oyuncak temizlemek veya Bölüm 1.1.2 ayrıntılı olarak kafes yıkama yoluyla gönderebilirsiniz. Gerekirse, temizleme için gerekli olan bir süre için, standart bir mikro-izolatör kafese fareler yerleştirin.
5. Aylık
   1. Zenginleştirme oyuncaklar hareketli ve kafesleri beslenme ve çöp dışarı karıştırıyordu ile çöp dışarı çoğunluğu temizleyin. Taze çöp ile değiştirin. Kafesin her alanda yatak bir inç olduğundan emin olun. Gerekirse, temizleme için gerekli olan bir süre için, standart bir mikro-izolatör kafese fareler yerleştirin.
6. Her üçAylar (ya da Deney Sonunda)
   1. Tüm yatak ve oyuncaklar ve temiz çıkarın ve Bölüm 1.1.1 de açıklandığı gibi zenginleştirme bin dezenfekte edin. Deney devam ediyorsa, kafesleri, oyuncak çeşitleri beslenme, yeni yatak ile değiştirin ve sonra bin fareler dönün.
7. EE yer aldığı araştırma kurumu tarafından isteniyorsa her üç ayda daha sık tüm zenginleştirme bin dezenfekte edin. Bu gerekli ve başka bir büyük zenginleştirme konteyner Bölüm 1.2'de ayrıntılı olarak ek zenginleştirme konteyner kurmak, varsa. bir önceki temizlenir edilirken ve yeni kaba hayvan aktarın.

4. Kontrol Konut Koşulları

1. Boyutları 30.5 cm x 19 cm x 14 cm Mikro-izolatör kafesler kontrol grubunda ev hayvanları. Kafes bir otomatik sulama sistemine bağladım değilse, gıda ve su şişesi tutmak için kafes içinde bir tel raf ekleyin.
2. EE olduğu gibi kontrol kafes içinde aynı mısır koçanı yataklar sağlayın. Fareler dışında bir yuva yapmak için 4 cm x 4 cm nestlet sağlayın.
3. Haftada bir kez teller, yiyecek ve su besleme, değiştirin ve / veya kafesleri temizleyin. Kafesleri ve tel raflar temiz kafes yıkama yoluyla veya Bölüm 1.1.1.1 olarak detaylı. Hayvanlar daha sık ya da yatak üzerine içme suyu sızıntıları varsa idrarını eğer daha sık kafesleri temizleyin.
4. Kontrol konut gazetesi hayvanların sağlığını izlemek. Hayvanlar yiyecek ve bol su var emin olunuz.
5. Düzenli fare kafes içinde aynı cinsiyetten Evi 3 ~ 5 fareler. Kafese bir oyuncak, tüp ya da kafesi vermeyin.
6. Kurumsal laboratuvar hayvan bakım tesisi sağlığı ve laboratuar teknisyenleri bu kontrol fareler yetiştiriciliği sağlayabilir.
7. EE fareler için olduğu gibi, 12 saat aydınlık / karanlık döngüsünde hayvanları tutun.

Sonuçlar

EE, büyüme faktörü ifadesini etkileyen merkezi sinir sistemi (MSS) ^12,13 olan nöron ve hücrelerin yaşam süresini arttırmaktadır. Daha yeni çalışmalar, EE, bu teknik, bir tohum çizgisi mutasyon içerir ve spontan adenom oluşumuna karşı çok duyarlı olan B16 melanom, MC38, kolon kanseri, ve APC ^{dakika / +} fare de dahil olmak üzere üç fare kanser modellerinde kanser gelişiminin belirgin bir bastırılmasına neden olduğu gösterilmiştir Bağırsaklar ^14. Şekil 2 teyit sonuçları 5 hafta (~ tümör kitlesi% 80 düşüş) için EE maruz kalan farelerde implante B16 melanom tümör büyümesinin baskılanması. Tümör ¹⁴ kurulduktan sonra EE başlatıldığı zaman kanser gelişimini bastırma-farelerde bile gözlenmiştir. EE normal kilolu (~ tümör kütlesinin% 50 azalma), ^14, farelerde daha yüksek yağlı diyet kaynaklı obezite, farelerde melanom büyüme (~ tümör kütlesinin% 70 azalma) daha fazla inhibisyonuna yolaçtı. EE ind Sağlam leptinin damla, IGF-1 azalması ve adiponektin düzeyleri ¹⁴ artış da dahil olmak üzere, serum biyomarkerlerindeki uced imza değişir.

Buna ek olarak, EE, bu teknik, yağlanmayı azaltır, enerji harcanmasını artırır, diyetle uyarılan obeziteye karşı direnç yol açar ve ¹⁵ ekseni hipotalamo-sympathoneural-adiposit etkinleştirerek kahverengi bir yağ fenotipik anahtara beyaz indükler. adiposity azalma EE maruz erken altı gün görüldü (Şekil 3A, B) ve yine dört hafta (Şekil 3C, D) için EE maruz kalan hayvanlarda doğruladı. O (yani, biri EE ile ilişkili anti-kanser ve anti-obezite etkileri iki EE etkileri beyin kaynaklı nörotrofik faktör aşırı ifadesi ile çoğaltılabilir, tek başına fiziksel aktivite ile hesaba ve olamaz da not etmek BDNF önemlidir ) hipotalamus ^14,15 olarak.

2874fig1.jpg "/>
Şekil 1: Zenginleştirilmiş çevre bin kurmak zenginleştirilmiş ortam x 90 cm 120 cm bir alana sahiptir ve daire jantlar, plastik boru, ahşap günlükleri ve diğer plastik zenginleştirme oyuncakları ile iki modifiye kafesleri, çalışan tekerlekleri, igloos içerir..

Şekil 2: Zenginleştirilmiş ortamı C57BL / 6 erkek farelerde tümör büyümesini azaltır üç haftalık erkek fareler, tümör aşılamasından önce 5 hafta boyunca EE veya kontrol kafeslerde ev edildi.. Sağ böğrüne subkutan, yukarıda sıralanan hayvan başına 10 ⁵ hücre aşılamadan sonra 17 gün B 16 melanoma tümör ağırlıkları (grup başına n = 10. Student t-testi, * p <0.05).

s / ftp_upload / 52874 / 52874fig3c.jpg "/>

Şekil 3: Zenginleştirilmiş çevre C57BL / 6 erkek farelerde adipozitenin azaltır Üç haftalık fareler EE tabi tutulmuştur;. Dört hafta içinde, 6 gün, başka bir grup. (A), EE altı gün (* p <0.05, n = grup başına 5. Student t-testi) yağ yastığı ağırlıkları azalmıştır. (B) 'EE altı gün (* p <0.05, n = grup başına 5. Student t-testi) göre vücut ağırlığı yağ yastığı ağırlıkları azalmıştır. (C), EE içerisinde dört hafta (* p <0.05, n = grup başına 5. Student t-testi) yağ yastığı ağırlıkları azalmıştır. (D), EE içerisinde dört hafta (* p <0.05, n = grup başına 5. Student t-testi) göre vücut ağırlığı yağ yastığı ağırlıkları azalmıştır. BAT: kahverengi adipoz doku, IWAT: kasık beyaz yağ dokusu, EWAT: epididimal beyaz yağ dokusu,RWAT: Retroperitoneal beyaz yağ dokusu.

Tartışma

Beyindeki gen ifadesinin üzerine EE sağlam etkileri henüz şişmanlık ve farelerde kanser büyüme fiziksel aktivite, sosyal etkileşim ve bilişsel zorluklar teşvik eden bir şekilde hayvanlara roman ortamı korumak ve işlemek için araştırmacının yeteneğine ağır bağlı azalmış değil sıkıntı hayvanları yok. Hatırlanması gereken en önemli iki usul adımlar vardır. Birincisi, her hafta oyuncaklar, nesneler ve kafesleri yerleşimini değiştirmeyi unutmayın. Oyuncak ve objeler önceki haftaya aynı olabilir olsa da, fareler roman olarak çevreyi algılarlar. Oyuncaklar değiştirin ve her hafta farklı olanları kendilerini nesneleri. İkincisi, çevreyi temiz tutmak için unutmayın. Kirli yatak kaldırılan almazsa, artan azot seviyelerinin hayvanlara bir stres olabilir.

Buna ek olarak, bu EE protokolü not için bir çok teknik vardır. Farklı veya benzersiz oyuncaklar ve farklı kullanımıplastik boru labirentine tasarımları teşvik edilmektedir. Çevre zor olabilir ama hayvanların sağlığı için bir tehdit değil. Işlevsiz oyuncaklar yakalandığını fare bacaklarda riskini artırır, ya da çiğneme tüketilen eğer hayvanlara zehirli olabilir çünkü Ayrıca, işlevsiz olan oyuncak sakının. EE One sabiti 2-3 günlüklerine göre bin bir köşesinde ya da yanına tecrit igloos üstünde üç tabak jantlar, kullanımıdır. Günlükleri arkasında tabaklar çalışan Bu kurulum tüm zenginleştirme çalışmalarında mevcut olmuştur. Diğer nesnelerin kullanımı ve yerleştirme açısından, düzen açıklaması yukarıdaki EE kurulumu temel bir mavi baskı olduğunu. Plastik boru bu temel çerçevesinde, rapor edilen sonuçları üretmek için yeterli bir roman ortamı sağlamalıdır tabaklar, kafesleri ve günlükleri çalışan, tekerlekleri çalışan kurulum değişimi.

Diyabet veya diğer metabolik sahip transgenik hayvanlar ile çalışma durumundahastalıklar, hayvanlar yiyecek ve su tükendi yok emin olmak için gıda ve su tüketimi yakın ilgi. Hayvanlar diyabet varsa, onlar daha çok idrara, böylece EE konut yatak nokta kontrol ve daha sık temizlenmesi gerekebilir. yatak en sık kaldırıldı ihtiyacınız EE konut yerlerde köşeleri vardır. Onlar hayvanlar tarafından kullanılabilir, böylece tekerlekler ve diğer oyuncaklar ayarlamak unutmayın. hayvanlar yatak içine tabak tekerlekleri çalışan ve üzerinde çalışan tekerlekleri vurma yeteneğine sahiptir. Hayvanlar yaş 3 ila 5 hafta genç iseler, hayvanların nerede clueless olarak araştırmacı bırakarak, EE kafesleri altında kazmak ve orada altında birlikte gizlemek olabilir. , Kirli yataklar çıkarma oyuncakları değiştirmek veya kafesleri temizlerken, onların çevreye ayarlarken onları stres vermeyecek şekilde temiz bir standart kafes hayvanları koymak önerilir. Onlar env gizlemek için daha az yer varsa, bir kafes içinde tüm hayvanlar elde etmek kolaydırironment. Bu nedenle, bir kafes içinde hayvanların tecrit önce oyuncak kaldırma işlemi kolaylaştırır. Temizlik için bekleyen ya da EE çevreyi ayarlarken Dahası, tek bir standart kafeste fazla 5-6 hayvan koymayın. EE yetişkinlikte başlatılır özellikle EE erkek hayvanların saldırgan olabilir. Bu nedenle, herhangi bir yaralı veya ölü hayvanlar için çevreyi gözlemlemek önemlidir.

Buna ek olarak, kabın bu büyük boyutu için EE ev hayvanları tipik sayısı 10-20 fare. EE evine hayvanların sayısını belirlenirken yaklaşık 10 ya da daha az fareler kullanılarak diğer araştırmacılar değişir EE kullanılan hayvanların sayısı, ve kafes ya da depo boyutu göz önüne alınmalıdır. Yaşayan bir ortamda çok fazla hayvan olması erkek farelerde saldırganlık neden olabilir. Biz EE muhafaza olan fareler C57BL / 6 kökenden olmuştur. Diğer soyların Fareler daha fazla veya daha az agresif veya daha fazla eğilimli sağlık sorunları olabilirBu EE kurulumu. Bu fareler ve zenginleştirilmiş bir çevre için hayvancılık planını belirlenmesinde dikkate alınmalıdır.

Dört hafta EE muhafaza şişmanlık azalma, leptin seviyesi damla ve B16 melanoma gelişiminin inhibe edilmesi için yeterlidir. Uzun EE metabolizma ve kanser inhibisyonuna güçlü etkilere yol açabilir. Farenin sırasında ya da EE maruz bırakılmadan önce, cerrahi prosedürlerden geçen durumunda, tek parça halinde dikiş ile yerleştirilebilir. Olsun ya da olmasın hayvanların cerrahi zımba veya çalışma yapılmamıştır sağlam kateterler ile bu özel EE kurulum iyi yanıt verir. Ayrıca, şu anda bu belirli EE yaşlı hayvanların ömrünü veya Healthspan'in nasıl etkilediğini araştırıyor. Ön veriler, dişi C57BL / 6 fareleri, yaşı 10 ay, genç farelerde benzer EE yanıt olduğunu göstermektedir. EE konut bir sınırlama ve tercihen bir cinsiyete özgü bir odada, hayvan tesis uzayda böyle büyük bin uzlaşmacı. Eff üzerinde Böylece gelecekteki çalışmalardaha küçük bir ölçekte EE ects yanı sıra, temiz yüksek sıcaklık temizlik tahammül kolay ve hayvanların sağlığı için güvenli bulgu oyuncaklar, metabolik ve kanser araştırmalarında EE uygulamaları artıracaktır.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Büyük zenginleştirme kutusu (120 cm x 90 cm x 76 cm)	Özel yapım.	Özel yapım.	Polipropilenden yapılmıştır. Haznenin kenarları 1,5 cm kalınlığındadır.
Büyük zenginleştirme kutusu alternatifi (120 cm x 110 cm x 76 cm)	Global Industrial	155202	Gerekirse, bu kutu yukarıdakine alternatif olarak çalışır.
Habitrail Mini tüpler	Habitrail	62720; 62705; 62725; 62715; 62054-Daire
tekerlekli plastik iglolar	Bio Serv	K3327; K3250-Metal
Koşu Tekerlekleri	Süper Evcil Hayvan	61392; 61394; 61396-Manzanita
Ahşap Kemirme Çubukları, 3"	Bio Serv	W0016
Fare Tünelleri	Bio Serv	K3322-Büyük
EE kutusuna giren fare kafesleri.	Lab Products Inc	10027 Fare	Kafesi-Kafesi
Klenz 180 Alkali Kafes Yıkama Deterjanı, Kafes Klenz 250 Asit Deterjan	Steris Yaşam Bilimleri	1K1802; 1K2502	Bu deterjanlar oyuncaklar, büyük zenginleştirme kutuları ve kafesler için kafes yıkamada kullanılır.
Sporklenz	Steris Yaşam Bilimleri	6526Q8	Kafes yıkamada oyuncakları, kutuları ve kafesleri yıkamak için alternatif spor öldürücü / dezenfektan.
Bed-O-Cobs 1/4" yatak takımı	The Andersons, Inc.	4B	Mısır koçanı yatağı 1/4 "çapındadır.
Kontrol için yuvalar, barındırılan fareler,	Ancare		Pamuk kareler