Yöntem makalesi

Biyolojik Sıvı Ortamda Ölçeklenebilir, Metalik Yüksek Aspect Ratio Nanokompositlerin Üretimi

8.8K görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/52901

⸱

8 Temmuz 2015

 ,  ,  ,  , 
1Biophysics Department, Centenary College of Louisiana, 2Department of Chemistry, Louisiana Tech University, 3Department of Integrative Physiology, University of North Texas Health Sciences Center, 4Biomedical Engineering, Louisiana Tech University, 5Institute for Micromanufacturing, Louisiana Tech University

Bu makalede

Özet

Burada biyolojik şartlar altında ve sıvı ortam içinde, yeni, yüksek en-boy oranı biocomposites sentezlemek için bir protokol mevcut. biocomposites sırasıyla çapı ve uzunluğu mikrometre nanometre kadar ölçeklendirilebilir. Sistin ile birlikte bakır nanopartiküller (KNP'ler) ve bakır sülfat sentezi için önemli bileşenleridir.

Özet

Bu protokolün amacı yüksek en-boy oranı yapıları ile iki yeni biocomposites sentezini tarif etmektir. biocomposites bakır nanopartiküller (KNP'ler) ya da metalik bileşen katkı bakır sülfat ile ya, bakır ve sistin oluşmaktadır. Sentez biyolojik koşullar (37 ° C) ve 24 saat sonra kendi kendini monte kompozit malzemelerin oluşturulması altında sıvı içinde gerçekleştirilir. Oluşturulduktan sonra, bu kompozitler hem sıvı ortam içinde ve kuru halde son derece stabildir. Kompozit uzunluğu aralığı Mikro-nano ölçekleme ve birkaç mikron çapı 25 nm. Enerji dispersif X-ışını spektroskopi (EDX) ile alan emisyonu tarama elektron mikroskobu böylece nihai nanokompozitlerin kükürt kaynağı olarak sistin teyit başlangıç ​​CNP malzemeden yokken kükürt, NP-türevi doğrusal yapılar içinde mevcut olduğunu gösterdi . Bu lineer nano ve mikro-kompozitlerin sentezi str uzunlukları ve çeşitli aralığındauctures sentez teknesine oluşturulmaktadır. Sentezden sonra, sıvı karışımın sonikasyonu sonication artan zamanla ortalama uzunluğu azaltarak yapıların ortalama boyuta kontrol edilmesine yardımcı olduğu gösterilmiştir. Oluşan yapılar yüksek toplanma olmayan, kararlı, sıvı faz içinde oluşturulmaktadır olduğu için, santrifüj, aynı zamanda konsantre edilmesi ve oluşturulan bileşikler ayrılmasında yardımcı olmak için kullanılabilir.

Giriş

Bakır, biyolojik dünyada bazı enzim fonksiyonlarında 1,2 gerekli olan, ancak daha yüksek konsantrasyonlarda nanopartikül form 3,4 dahil olmak üzere güçlü olarak toksik olan oldukça reaktif bir metaldir. Nanoyapılar için artan yüzey alanı / kütlesi nedeniyle CNP'ler ve diğer bakır bazlı nanomalzemeler kullanıldığından, bakır toksisitesi ile ilgili endişeler daha önemli hale gelmiştir. Bu nedenle, nanopartikül formundaki küçük bir bakır kütlesi bile, hücreye nüfuz etme ve reaktif formlara ayrılma kabiliyeti nedeniyle yerel toksisiteye neden olabilir. Bazı biyolojik türler, metal iyonlarıyla kompleks oluşturabilir ve şelatlayabilir ve hatta bunları deniz midyelerinde açıklandığı gibi biyolojik yapılara dahil edebilir 5. Nanomalzemelerin 4 potansiyel toksik etkilerini incelerken, zamanla ve tipik hücre kültürü için kullanılan biyolojik koşullar altında (37 ° C ve% 5 CO2), yüksek en-boy oranlı (doğrusal) bir yapıya sahip kararlı bakır biyokompozitlerin oluşturulabileceği keşfedildi.

Bir eleme süreciyle, tam hücre kültürü ortamında meydana gelen bu doğrusal biyokompozitlerin ilk keşfi, biyokompozitlerin kendi kendine bir araya gelmesi için gerekli olan temel elementlerin tanımlanmış bir protokolüne basitleştirildi. İki tip yüksek doğrusal biyokompozitin kendi kendine montajının, iki başlangıç metal bileşeni ile mümkün olduğu keşfedildi: 1) CNP'ler ve 2) bakır sülfat, ortak biyolojik bileşen sistindir. Nano ölçekli ve mikro ölçekli özelliklere sahip "kestane" ve "nanoçiçek" olarak adlandırılan daha karmaşık bakır içeren yapılar daha önce bildirilmiş olsa da, bunlar 100 ° C veya daha yüksek sıcaklıklar gibi biyolojik olmayan koşullar altında üretilmiştir 6-8. Bildiğimiz kadarıyla, biyolojik koşullar altında sıvı fazda ölçeklenebilir olan bireysel, doğrusal bakır içeren nanoyapıların sentezi daha önce tanımlanmamıştır.

Nanokompozitlerin sentezi için kullanılan başlangıç malzemelerinden birinin, yani CNP'lerin, daha önce 4. hücreler için çok toksik olduğu bildirilmişti. Son zamanlarda, nanokompozitler oluşturulduktan sonra, bu yapıların kütle başına başlangıç NP'lerinden daha az toksik olduğu bildirilmiştir 9. Bu nedenle, burada tarif edilen sentez, hem NP formunu daha büyük yapılara dönüştürmek hem de hücreler için daha az toksik kompozitler üretmek anlamında, reaktif bakır türlerinin stabilize edilmesinde faydası olan biyolojik ve biyokimyasal bir reaksiyondan türetilebilir.

Biyolojik sıvı ortam 10,11 ile etkileşime girdiğinde toplandığı veya topaklandığı bilinen diğer birçok nanomalzeme formunun aksine, bir kez oluştuğunda, burada açıklanan oldukça doğrusal kompozitler, muhtemelen daha önce bildirilen yükün yeniden dağılımı nedeniyle toplanmayı önler 9. Mevcut çalışmada detaylandırıldığı gibi, bu kümelenmeden kaçınma, en az 3 nedenden dolayı bir kez oluşturulmuş yapılarla çalışmak amacıyla uygundur: 1) bir kez oluşturulduktan sonra kompozit yapılar santrifüjleme kullanılarak konsantre edilebilir ve daha sonra girdap karıştırma kullanılarak tekrar kolayca dağıtılabilir; 2) Oluşturulan yapılar, farklı süreler boyunca sonikasyon ile ortalama boyutta azaltılabilir; ve 3) oluşturulan doğrusal yapılar, yakın zamanda tanımlanan "kahve halkası etkisinden" 12 kaçınmak için ek bir araç sağlayabilir ve böylece özellikle küresel parçacıklar içerenler olmak üzere daha eşit dağılmış malzeme kaplamaları oluşturmak için bir katkı maddesi sağlayabilir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Deney 1. Planlama

  1. Sentezi için gerekli olan bakır nanokompozitlerin hacmini belirleyin. Bu temelde, küçük hacimli şişeler (25 cm2), ya da malzemelerin hazırlanmasında, aşağıda gösterildiği gibi daha büyük bir şişe bir dizi seçim.
  2. Bu sentez için,% 5 CO2 ve en az% 40 nem ile 37 ° C inkübatör kullanın. Böyle bir inkübatör mevcuttur ve tekrar tekrar sentez döneminde (yaklaşık 24 saat) boyunca rahatsız olmayacak emin olun.
    DİKKAT: Tekrarlanan açma ve inkübatör kapanış kesinlikle nanokompozit yapılarının değişmiş sentezinde neden olabilir sıcaklık dalgalanmalarını neden olacaktır.

Malzemelerin 2. Hazırlık

  1. Sentezi başlatmak için hemen önce çözücü maddeler, katı maddeleri ekleyerek, bir deney başlamadan önce taze tüm malzemeleri hazırlayın. Uzun zamanlar b sıvı içinde sistin ve bakır başlangıç ​​maddelerinin stok çözümleri tutulmasıefore Deney tavsiye edilmez ve değişken sonuçlara yol açabilir. Bir kez Parafilm ile kabın üst sararak kuru başlangıç ​​malzemeleri, satıcıdan devam açıldı.
    Not: Aşağıdaki protokol sistin 7 ul steril su 6643 ul ve KNP'lerle 350 ul kullanılarak 25 cm 2 hücre kültürü şişesi içinde tepkimesi için bir örnek olarak kullanılmıştır.
  2. KNP'lerle en az 2 mg tartılması bakır nanopartiküller bir 2 mg / ml çözeltisi hazırlayın. Cilt ile KNP'lerle olası temasını önlemek için bu adımı sırasında tek kullanımlık eldiven giyin. Boş bir steril 16 ml cam şişede nanopartiküller yerleştirin.
    1. KNP'lerin içeren şişeye, 2 mg / ml'lik bir çözelti oluşturmak ve sentez başlamadan önce nanopartiküllerin dağılmasını temin etmek için 20 saniye için çözüm vorteks uygun hacimde steril deiyonize su ekleyin (en az 1 mL toplam hacim tavsiye edilir). Bu vorteks karıştırma inhibe edecek şekilde su ile şişe yarısından fazlası yol doldurmayın. KNP'ler will hızla şişenin dibine yerleşmek ve (siyah gri) rengi koyu görünecektir.
    2. Sentezi başlamadan önce KNP'lerle maksimum dağılım temin etmek üzere, oda sıcaklığında 17 dakika boyunca CNP çözeltisi sonikasyon. Periyodik KNP'ler Sonication nedeniyle karıştırma emin olmak için kontrol edin. Başarılı Sonikasyon sonrasında, KNP'ler en az 30 dakika süre ile çözelti içinde askıda kalır ve çözelti, koyu renkli olur.
  3. Sentezi için bir 72.9 mg / ml çözelti yapmak için sistin yeterli kütleye tartılır. Sistin su içinde doğrudan çözünür olmadığı için, antistatik tartım kabında tartılır sistin yerleştirin.
    1. Sistin tamamen eriyene kadar tartım kabı içeren sistin için, steril, 1 M NaOH yeterli hacmi ekleyin. Örneğin, bir 72.9 mg / ml çözelti elde edilerek, 1 M NaOH içinde 100 ul tam sistin 7.29 mg çözülür.
    2. Steril akış doku kültürü kaputu bu adımı yürütmek, steril koşullar korumak için.
      UYARI: NaOH1 M konsantrasyon yakıcı ile, yani deri ile konsantre NaOH temasını önlemek için bu adım sırasında atılabilir giyim eldivenleri
  4. Steril doku kültürü kaputu çalışan birinci steril sentezi şişeye steril su 6643 ul sistin 7 ul, ve şişe kapağı ile 37 ° C'de kuluçka makinesi içinde, 30 dakika boyunca inkübe edin etkili sağlamak için (gevşek) havalandırılmış Karıştırma. KNP'ler sonikasyon aşamasından sonra yerleşmiş çünkü, 30 saniye boyunca girdaplanarak 2 mg / ml CNP solüsyonu yeniden süspanse edin.
    1. Sentezini başlatmak için 25 cm 2 hücre kültürü şişesi steril su, 50 parça KNP'ler ve 949 parça 1 parça sistin birleştirmek: Aşağıdaki bileşen oranları korumak için (steril tekniği kullanarak) sentez şişeye yeterli CNP çözüm ekleyin. Örneğin, bir 7 mi sentezi hacmi için, sistin stok çözeltisi 7 ul, KNP'lerle 350 ul steril su 6643 ul birleştirir. Balona kapağını takın ve böylece secur olduğunu sıkıne.
    2. Sentez için tüm bileşenleri birleştirdikten sonra, yavaşça 4-5 kez dönen tarafından şişede karıştırın. CO2 inkübatör şişeyi koyun ve ve sentez sırasında balonun dışına gaz değişimi olacak şekilde kapağı gevşeterek şişeyi havalandırma.
  5. Sentez yaklaşık 24 saat inkübatör çalışmasına izin ver. Sentez sırasında, bir, mikroskopi ve gözle yüksek doğrusal kompozit oluşumunu gözlemleyebilirsiniz.
    Not: yapı oluşumu süreci yapıları tespit etmek için ilk olarak sabit olduğu anlamında anda meydana gelebilir, o zaman görünümü artan bir yoğunluğa hızlı bir şekilde ilerler. Formasyon bu nedenle 24 saat önce oluşabilir. yapılar büyük ve yoğunluğu artar haline kez süreç aynı zamanda gözle görülebilir. Yapıların üretimi daha sonraki zaman noktalarında mikroskop altında ve göz zaman içinde görülmekte iken, sürekli biçimde sentez koşullarının kesintiye ve sıcaklık zayıf yol açacaktırSentez sonucu.
  6. Sıkı sentezi şişesi kapak kapama ve bir buzdolabına (4 ° C), teknenin depolayarak biocomposites sentezini iptal eder. Bir kez üretilen yapıları, en az bir yıl boyunca bu şekilde sabit kalır. Kullanılan bileşenlerin sentez tarihi ve sona ermeden sentez inkübasyon süresi de dahil olmak üzere sentez koşulları ile balon etiketleyin.

Bakır Sülfat Kullanılması 3. Sentezi

  1. Bakır sülfat tuzu ile KNP'lerin değiştirerek kendini montaj sentezini yürütmek. Steril teknik kullanılarak, 2 mg / ml'lik bir solüsyon yapmak için, steril deiyonize su, yeterli hacimde bakır sülfat, en az 2 mg çözülür. bakır sülfat kristalleri kolayca bu konsantrasyonda çözelti içine gitmek, ama gerekirse flakon vorteks ve tüm kristalleri çözülür sağlamak için göz tarafından kontrol edin.
  2. Daha önce tarif edilen, ancak bakır sülfat ile KNP'lerin değiştirilmesi gibi bakır sülfat hazırlanmasından sonra, sentez yapmak.
    Not: Bir başlangıç ​​malzemesi olarak, bakır sülfat kullanarak kendi kendine bir araya nanokompozitler KNP'lerle sentezlenen yapılar için daha kesin bir şekil çok daha tutarlı olduğu bulunmuştur.
  3. CNP kompozitler gibi bakır sülfat biocomposites sentezini sonlandırma (2,6 aşama) ve 4 ° C de, uzun dönemli saklayın.

4. Karakterizasyonu ve Biocomposites Post-sentez taşınması

  1. KNP'lerle gelen ve beyaz ışık mikroskobu 9 bakır sülfat gelen ve elektron mikroskobu 9 türetilen biocomposites karakterize.
    1. Kompozit bir şişeye, düz döşeme birkaç dakika içinde şişenin alt yüzeyine yerleşmek gibi karakterizasyonu ve biocomposites beyaz bir ışık mikroskobu ile sentez sonrası incelenmesi için, bir ters mikroskop kullanarak ve daha sonra odak noktası haline getirilebilir. Biocomposites ve sıvı ortamın arasındaki kontrastı en üst düzeye çıkarmak için mikroskop parlak alan ayarını kullanın. KNP'lerle ve polis türetilen kompozitlersülfat başına hem renkli opak açıkça görünür, ancak girmemiş CNP agrega rengi çok koyu görünecektir.
      1. Kompozit görüntü yakalamak için mikroskop bağlı bir dijital kamera kullanın. Ayrı ayrı yapılar için uzunluklarının bir aralığı gözlenecektir.
    2. Karakterizasyonu ve biocomposites sentez sonrası denetimi ve 4 ° C'de depolamadan sonra, şişeler mikroskopi görüntüleme yaparken odaklama etkili belirsiz olacaktır buzdolabından çıkarıldıktan üzerine ilk yoğunlaşmayı oluşturmak gibi şişeler, en az 15 dakika boyunca oda sıcaklığına gelmesine izin. Oda sıcaklığına dengede bırakıldıktan sonra, mikroskopi görüntü kalitesi üst düzeye çıkarmak için temiz bir kağıt havlu ile balonun üst ve alt yüzeylerini silin.
    3. Buzdolabında ise oluşturan kompozit kümeleri ayırmak için 30 saniye boyunca uzun süreli saklanan ya da görüntüleme kompozitler, girdap şişesi çalışırken. Vorteks sonra ters mikrofon ile yapıları incelemekroscope agrega ayrışmış emin olun ve gerekirse vorteksleme tekrarlamak için.
    4. KNP'lerin kullanarak belirli bir deney için sentez etkinliğini değerlendirmek için ters beyaz ışık mikroskobu kullanarak. Örneğin, bu tür sentez süresi olarak farklı parametrelerle şişelerinden CNP türetilmiş biocomposites için kullanılan sentez şişelerinde reaksiyona girmemiş KNP'lerle varlığını ya da yokluğunu belge.
      Bağımsız KNP'ler bir ışık mikroskobu ile gözlenmek için çok küçük, ancak reaksiyona girmemiş CNP yüksek en boy oranı, doğrusal bir biçime sahip olacaktır başarıyla sentezlenmiştir CNP-kompozitler aksine, yuvarlak şekil ve koyu renkli bir nesne olarak görülür agregatlar ve Not: Farklı uzunluklarda bir dizi olacaktır. Bu bir kez meydana getiren bireysel yapılar halinde dağılması zor olan yüksek ölçüde dallanmış "kestanesi" tipi yapılarda neden olacağı için, sona önce bir süre çok uzun için sentez gerçekleştirilmesi kaçının.
    5. Etkinliğini değerlendirmek için ters beyaz ışık mikroskopisi kullanınBakır sülfat kullanılarak, belirli bir deney için sentez. Bakır sülfat, bu protokolü kullanarak çözelti içine tamamen gider yana, çözüm KNP'lerin kullanarak sentezden çözümün daha az karanlık görünür. Böyle bir fesih öncesi sentez zaman gibi farklı sentez koşulları şişeler karşılaştırarak bakır sülfat kompozit boyutunu ve kapsamını belgeleyin.
      Not: Başarıyla sentezlenen kompozit farklı uzunluklarda bir dizi gösterecektir. Bu "kestanesi gibi" bir yapıda olacaktır bazıları kompozitler, yüksek ölçüde dallanmış agrega neden olacağı için, sona önce bir süre çok uzun için sentez gerçekleştirilmesi önlemek ve hangi bir kez meydana getiren bireysel yapılar halinde dağılması zor olan .
  2. Biocomposites sonrası sentezi, bir santrifüj tüpü içinde kompozitlerin santrifüj çözümler yoğunlaştırmak. 15 ml santrifüj tüpüne CNP-türevi yapılar ya da bakır sülfat türevi yapılar, ya 6 ml ilave edilir. 10 dakika boyunca santrifüjoda sıcaklığında, 500 x g'de topak elde etmek için. Daha küçük miktarlar için, 0.6 ml boyutlu tüpler çözüm yapıların 500 ul ekleyin. En az 10 dakika süreyle oda sıcaklığında 2000 x g'de santrifüjleyin bir topak oluşturmak için.
    1. Yeterli bir süre boyunca (mikrofüjler için en az 10 dakika) santrifüje tabi tutulmasının ardından yapıları dikkatli bir şekilde pelet üzerinde yüzer sıvının çıkarılması ile konsantre edilir tüpün altındaki gözlemlenebilir pelet kaydedin. Bakır sülfat elde edilen Biyokompozit yapıları renk ve KNP'lerle türetilen yapılarda mavi koyu (siyah gri) vardır görünür.
    2. Bu tüp daha kompozitler ekleyin ve istenirse yapıları konsantre aynı tüpte işlemi tekrarlayın. Konsantre granül dağıtmak için, 10-30 saniye süre ile, istenen tüp çözeltisinin hacmi ve vorteks ekleyin.
  3. Sonikasyon yapılar bir zamanlar değerlerini düşürmek için yapıların ortalama nüfus büyüklüğü (uzunlukları) taşımak için, kurdu. En le steril deiyonize su ve sonikasyon yerleştirin yapılarıast 10 dk. Zamanla, bu yöntemi kullanarak, yapılar parçalanmış, ortalama uzunluk (metin bakınız Şekil 6) daha küçük hale gelir. Ters beyaz ışık mikroskobu ve dijital kamera kullanarak farklı sonication kez kompozit boyutlarda Belge değişir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Şekil 1, bu çalışmada tarif lineer biocomposites oluşturmak için sentez adımlarına ait bir akım şeması şemasını göstermektedir. Başlangıç ​​materyalleri olarak KNP'ler ya da bakır sülfat, 2 mg / ml'lik bir çözelti oluşturmak üzere, steril su ile birlikte, bu çözüm, karıştırılır ve eşit bir karışım sağlamak için sonike ve bu çözelti daha sonra, bakır sentezi için, aşağıdaki oranda karıştırılır edilir: 949 parça, steril su: 50 parça bakır karışımı: 1 kısım sistin stok solüsyonu. Gerçek miktarlar b...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

KNP'lerle dahil Nanomalzemelerin potansiyel toksik etkileri değerlendirirken, uzun vadede, KNP'ler büyük, birleştirilmiş forma başlangıçta daha dağınık partikül dağılımı (Şekil 2) dönüştürülmüş olduğu gözlendi. Bazı durumlarda, biyolojik şartlar altında, hücre kültürü çanağı üretildi, bu son derece birleştirilmiş formasyonlar "kestanesi" içeren daha önce tarif edilen bakır andıran merkez agrega oldukça lineer çıkıntılar oluşturulmuştur 6. Burada gösterilen koşullar altında, ...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Teşekkürler

Yazarlar, Louisiana Tech Üniversitesi Mikro Üretim Enstitüsü'ndeki elektron mikroskobu çalışmalarında Alfred Gunasekaran'a ve ek mikroskopi çalışmalarında yardım için Dr. Jim McNamara'ya teknik yardımlarına teşekkür etmek isterler. Açıklanan çalışma kısmen Louisiana Mütevelli Heyeti PKSFI Sözleşme No. tarafından desteklenmiştir. LEQSF (2007-12)-ENH-PKSFI-PRS-04 ve James E. Wyche III, Louisiana Tech Üniversitesi'nden (MD'ye) Profesörlük Kazandı.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Mini VortekserVWR (https://us.vwr.com)58816-121
CO2 Kuluçka Makinesi Model # 2425-2VWR (https://us.vwr.com)Satıcıyla iletişime geçinMevcut model calalog # 98000-360
Eppendorf Santrifüj (Soğutmalı Mikrosantrifüj)Labnet (http://labnetinternational.com/)C2500-RModeli Prizma R
Hücre Kültürü Santrifüj Modeli Z323KLabnet (http://labnetinternational.com/)Satıcıyla iletişime geçinMevcut model Z206A katalog # C0206-A
Sonikatör (Ultrasonik Temizleyici)Branson Ultrasonics Corporation (http://www.bransonic.com/)1510R-MTH
DengeSartorius (http://dataweigh.com)Model CP225D benzer model CPA225D
Olympus IX51 Ters Işık MikroskobuOlympus ( http://olympusamerica.comSatıcıyla
Olympus DP71 mikroskop dijital fotoğraf makinesiOlympus (http://olympusamerica.comSatıcıyla
harici güç kaynağı ünitesi - Olympus mikroskobu için beyaz ışıkOlympus (http://olympusamerica.comTH4-100
10X, 20X ve 40X mikroskop objektifleriOlympus (http://olympusamerica.comSatıcıyla
Taramalı Elektron MikroskobuHitachi (http://hitachi-hitec.com/global/em/sem/sem_index.html)model S-4800
Transmisyon Elektron MikroskobuZeiss (http://zeiss.com/microscopy/en_de/products.html)model Libra 120
Masa Üstü İş İstasyonu Tek Yönlü Akış Temiz TezgahEnvirco (http://envirco-hvac.com)model PNG62675Steril hücre kültürü için kullanılır teknik
iletişime geçiniletişime geçin iletişime geçin

Kaynaklar

  1. Klinman, J. P. The copper-enzyme family of dopamine beta-monooxygenase and peptidylglycine alpha-hydroxylating monooxygenase: resolving the chemical pathway for substrate hydroxylation. The Journal of biological chemistry. 281, 3013-3016 (2006).
  2. Uauy, R., Olivares, M., Gonzalez, M. Essentiality of copper in humans. The American journal of clinical nutrition. 67, 952S-959S (1998).
  3. Karlsson, H. L., Cronholm, P., Gustafsson, J., Copper Moller, L. oxide nanoparticles are highly toxic: a comparison between metal oxide nanoparticles and carbon nanotubes. Chemical research in toxicology. 21, 1726-1732 (2008).
  4. Parekh, G., et al. Layer-by-layer nanoencapsulation of camptothecin with improved activity. International journal of pharmaceutics. 465, 218-227 (2014).
  5. Harrington, M. J., Masic, A., Holten-Andersen, N., Waite, J. H., Fratzl, P. Iron-clad fibers: a metal-based biological strategy for hard flexible coatings. Science. 328, 216-220 (2010).
  6. Keyson, D., et al. CuO urchin-nanostructures synthesized from a domestic hydrothermal microwave method. Materials Research Bulletin. 43, 771-775 (2008).
  7. Liu, B., Zeng, H. C. Mesoscale organization of CuO nanoribbons: formation of 'dandelions'. J Am Chem Soc. 126, 8124-8125 (2004).
  8. Peng, M., et al. Controllable synthesis of self-assembled Cu2S nanostructures through a template-free polyol process for the degradation of organic pollutant under visible light. Materials Research Bulletin. 44, 1834-1841 (2009).
  9. Deodhar, S., Huckaby, J., Delahoussaye, M., DeCoster, M. A. High-Aspect Ratio Bio-Metallic Nanocomposites for Cellular Interactions. IOP Conference Series: Materials Science and Engineering. 64, 012014(2014).
  10. Montes-Burgos, I., et al. Characterisation of nanoparticle size and state prior to nanotoxicological studies. Journal of Nanoparticle Research. 12, 47-53 (2010).
  11. Wiogo, H. T., Lim, M., Bulmus, V., Yun, J., Amal, R. Stabilization of magnetic iron oxide nanoparticles in biological media by fetal bovine serum (FBS). Langmuir. 27, 843-850 (2011).
  12. Yunker, P. J., Still, T., Lohr, M. A., Yodh, A. G. Suppression of the coffee-ring effect by shape-dependent capillary interactions. Nature. 476, 308-311 (2011).
  13. Kahler, H., Lloyd Jr, B., Eden, M. Electron Microscopic and Other Studies on a Copper–Cystine Complex. The Journal of Physical Chemistry. 56, 768-770 (1952).
  14. Furia, E., Sindona, G. Complexation of L-cystine with metal cations. Journal of Chemical & Engineering Data. 55, 2985-2989 (2010).
  15. Hawkins, C., Perrin, D. Polynuclear Complex Formation. II. Copper (II) with Cystine and Related Ligands. Inorganic Chemistry. 2, 843-849 (1963).
  16. Hallman, P., Perrin, D., Watt, A. E. The computed distribution of copper (II) and zinc (II) ions among seventeen amino acids present in human blood plasma. Biochem. J. 121, 549-555 (1971).
  17. Jensen, L. S., Maurice, D. V. Influence of sulfur amino acids on copper toxicity in chicks. The Journal of nutrition. 109, 91-97 (1979).
  18. Lee, Y., Choi, J. R., Lee, K. J., Stott, N. E., Kim, D. Large-scale synthesis of copper nanoparticles by chemically controlled reduction for applications of inkjet-printed electronics. Nanotechnology. 19, 415604(2008).
  19. Hume, J., et al. Engineered coiled-coil protein microfibers. Biomacromolecules. 15, 3503-3510 (2014).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Bak r Nanopar ac k SenteziSistin Biyokompozit Olu umul eklenebilir Nanokompozit retimiAlan Emisyonlu SEMEnerji Da l ml X n SpektroskopisiSonikasyonla Boyut KontrolSantrif jle Konsantrasyon Y ntemiBeyaz I k Mikroskopisi Karakterizasyonu

İlgili makaleler